具体描述
本书是英国牛津大学出版社出版的实验技术丛书中《Transcription Factors: A Practical Approach》第2版的中译本。全书共分为11章，详细介绍了研究真核生物转录因子的实用技术，内容包括用cD-NA表达文库，序列相似克隆转录因子，用基因位点克隆技术确定转录因子的靶基因，转录因子的纯化及特征分析，DNA迁移率变动分析，DNA-蛋白质复合体外足迹分析以及转录因子的修饰分析等。本书可供分子生物学、生物化学、生物技术、医药卫生以及农林等领域对转录调控感兴趣的师生及科研人员参考。
细胞信号通路研究：从基础理论到前沿应用 图书简介 本书旨在为生命科学领域的科研工作者、研究生以及对细胞信号传导机制有深入了解需求的专业人士，提供一本全面、深入且具有高度实践指导意义的参考著作。本书聚焦于细胞信号通路这一生命活动的核心调控网络，系统阐述了信号从细胞外刺激到细胞内应答的完整路径、关键组分及其相互作用的复杂机制。全书内容紧密结合当前的生物学研究热点和技术进展，力求在理论深度与实际操作之间架起一座坚实的桥梁。 第一部分：信号传导的基础框架与经典模型 本部分奠定理解复杂信号网络的理论基石。首先，详细解析了信号分子（如生长因子、细胞因子、激素和神经递质）的性质、合成、释放及靶点识别的分子基础。重点探讨了细胞膜上各类受体的结构、分类及其激活机制，包括G蛋白偶联受体（GPCRs）、酪氨酸激酶受体（RTKs）、离子通道型受体以及核受体家族的独特性质。 随后，本书深入剖析了经典的两大信号级联——MAPK通路（包括ERK、JNK和p38分支）和PI3K/Akt/mTOR通路。对这些通路中关键激酶和磷酸酶的生化功能、调控位点及其在细胞增殖、分化、凋亡和代谢中的核心作用进行了详尽的描述。此外，对磷脂信号分子（如PIP2、DAG、IP3）的生成、代谢及其对下游效应器的影响机制进行了细致的梳理，突出了脂质信号在膜内通讯中的枢纽地位。 第二部分：信号转导的交叉对话与网络拓扑 现代信号传导研究已不再局限于线性的“A→B→C”模式，而是展现出高度复杂的网络拓扑结构。本部分致力于揭示不同信号通路间的“串扰”（Crosstalk）和整合机制。 我们详细探讨了不同受体信号如何汇集到共同的下游靶点，例如，如何通过共激活或相互抑制机制实现对细胞命运的精细调控。内容涵盖了细胞骨架重塑信号（如Rho GTPases家族）、细胞周期调控（如CDKs和细胞周期蛋白的周期性激活）与生存信号的协同作用。 特别地，本书引入了网络生物学和系统生物学的视角，运用图论和动力学模型的基本概念，分析信号网络中的模块化结构、反馈回路（正反馈与负反馈）以及振荡现象的产生机制。这部分内容有助于读者从整体上理解信号传导系统如何保证鲁棒性（Robustness）和特异性（Specificity）。 第三部分：信号通路的前沿研究领域与新兴机制 紧跟国际科研前沿，本部分着重介绍了近年来涌现出的、对传统信号认知产生颠覆性影响的新机制和新分子实体。 1. 表观遗传调控与信号的整合： 阐述了信号通路如何通过调控组蛋白修饰酶（如HATs、HDACs）和DNA甲基化酶的活性，将外界信号快速转化为基因表达的长期变化。例如，讨论了特定激酶如何直接磷酸化组蛋白或染色质重塑蛋白，从而影响基因的开启或沉默。 2. 非编码RNA在信号传导中的作用： 详细分析了微小RNA（miRNAs）、长非编码RNA（lncRNAs）如何作为信号的“微调器”或“中继站”。阐述了它们如何靶向特定信使RNA（mRNA）的稳定性或翻译效率，从而放大或抑制特定信号响应。 3. 溶酶体与自噬信号的调控： 聚焦于新兴的细胞器间通讯领域，特别是溶酶体作为信号整合中心的功能。深入解析了mTORC1在溶酶体表面的激活机制，以及自噬（Autophagy）通路如何被营养状态和生长因子信号精确控制，以平衡细胞的合成与降解需求。 4. 细胞外囊泡（EVs）介导的远距离通讯： 探讨了外泌体（Exosomes）和微囊泡（Microvesicles）如何携带信号蛋白、脂质和核酸，实现细胞间的“秘密通讯”。分析了EVs在肿瘤微环境重塑和免疫应答中的关键作用。 第四部分：实验技术与数据解析 理论的掌握必须辅以扎实的实验技能。本部分是本书的实践核心，它系统地介绍了研究信号通路所依赖的最新和经典技术。 蛋白质的检测与定量： 详述了免疫印迹（Western Blotting）的高级应用，包括磷酸化特异性抗体的选择与优化。着重介绍了共免疫沉淀（Co-IP）和双荧光互补实验（BRET/FRET）在解析蛋白-蛋白相互作用（PPIs）中的精确操作流程和数据解释。 信号通路的活体分析： 详细介绍了基于报告基因系统的通路活性监测方法，如双荧光素酶报告系统。同时，重点讲解了“点击化学”（Click Chemistry）在标记和追踪信号分子活化状态中的应用。 成像技术： 涵盖了高分辨率荧光显微技术（如STED、SIM）在解析信号分子在细胞内动态定位和聚集行为中的优势。介绍了单分子追踪技术在分析受体内吞和循环机制中的应用。 高通量筛选技术： 阐述了利用CRISPR/Cas9文库筛选关键信号调控因子、以及利用高内涵成像（HCS）平台对细胞表型进行量化分析的方法论。 本书特色 本书的结构设计注重逻辑递进性与知识的广度，避免了对单一分子机制的过度简化。它不仅详述了信号通路“是什么”，更侧重于解释“如何被调控”以及“如何被实验验证”。对于复杂的调控网络，本书提供清晰的流程图和互动式的案例分析，帮助读者掌握整合多源信息、设计有效实验方案的能力。本书是构建现代细胞生物学和分子医学知识体系不可或缺的工具书。
作者简介
目录信息
1 DNA迁移率变动分析
1.1 概述
1.2 DNA结合蛋白的检测
1.2.1 DNA迁移率变动分析的应用
1.2.2 DNA探针的选择
1.2.3 用于阻滞分析的标记寡核苷酸探针的制备
1.2.4 限制性片段探针的标记
1.2.5 蛋白提取物的制备
1.2.6 结合反应
1.2
· · · · · · (收起)
1.1 概述
1.2 DNA结合蛋白的检测
1.2.1 DNA迁移率变动分析的应用
1.2.2 DNA探针的选择
1.2.3 用于阻滞分析的标记寡核苷酸探针的制备
1.2.4 限制性片段探针的标记
1.2.5 蛋白提取物的制备
1.2.6 结合反应
1.2
· · · · · · (收起)
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