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出版者:安徽科学技术出版社

作者:顾志红，张利民，

出品人:

页数:127

译者:

出版时间:2005-9

价格:13.80元

装帧:

isbn号码:9787533733308

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• 医学化学
• 基础化学
• 实验教程
• 医学教育
• 化学实验
• 高校教材
• 医学专业
• 实验指导
• 化学教学
• 本科生

探索生命的化学密码：现代生物学实验方法解析 本书旨在为广大学子和科研爱好者提供一个深入理解现代生物学研究核心的平台。我们不侧重于基础化学反应的原理推导，而是聚焦于这些原理在生物学领域如何得到淋漓尽致的体现和应用。通过一系列精心设计的实验，读者将能够亲身感受生命体内部错综复杂的化学反应如何维持其生机勃勃，以及科学家们如何运用创新的实验技术揭示这些奥秘。 第一部分：分子世界的基石——探寻生物大分子的结构与功能 生物体的基本功能，无论是能量的产生、信息的传递，还是物质的合成与分解，都离不开四大类重要的生物大分子：核酸、蛋白质、糖类和脂质。本部分将带领读者走进这些分子的微观世界，从结构层面理解它们如何构建生命体，从功能层面把握它们在生命活动中的关键作用。 章节一：核酸的奥秘——DNA与RNA的提取、鉴定与初步分析 实验目标： 掌握从植物和动物细胞中高效提取DNA和RNA的方法，了解不同核酸样品的纯化技术，并通过紫外吸收光谱法和琼斯试剂法等经典方法对提取的核酸进行初步的定量和定性分析。 实验内容： 植物DNA提取： 选取新鲜的植物叶片（如菠菜），在低温条件下进行匀浆，利用细胞裂解液打破细胞壁和细胞膜，释放出核酸。通过加入RNase酶降解RNA，以及利用高盐溶液沉淀蛋白质，最后经过乙醇沉淀法获得粗提DNA。 动物DNA提取： 选取易于获取的动物组织（如鸡血），通过离心去除红细胞，再利用裂解液和蛋白酶K处理，去除蛋白质和脂质，最后同样采用乙醇沉淀法得到DNA。 RNA提取： 重点在于抑制RNA酶的活性。选取新鲜的酵母菌或细菌，利用强裂解液（如Trizol试剂）快速裂解细胞，同时加入RNase抑制剂，再经过酚-氯仿萃取和乙醇沉淀，获得总RNA。 核酸鉴定： 紫外吸收光谱法： 测定核酸在260nm和280nm波长处的吸光度，计算A260/A280比值，初步判断核酸的纯度。高纯度的DNA和RNA的A260/A280值分别在1.8-2.0和2.0-2.2之间。 琼斯试剂法： 利用琼斯试剂（一种用于检测醛基的试剂）与核酸中的糖类成分反应，产生颜色变化，辅助鉴定。 琼脂糖凝胶电泳： 将提取的核酸样品与DNA Ladder（已知分子量的DNA片段）一同进行琼脂糖凝胶电泳。通过观察DNA条带的大小和迁移距离，可以初步判断DNA的完整性以及是否存在降解。 理论拓展： 深入探讨DNA和RNA的结构特点（双螺旋、单链、磷酸二酯键、碱基配对原则），以及它们在遗传信息存储、转录和翻译过程中的核心作用。介绍基因组学、转录组学等现代研究领域中核酸分析技术的重要性。 章节二：蛋白质的多彩世界——提取、纯化与定量分析 蛋白质是生命活动的执行者，它们的结构决定了功能，而功能的实现依赖于精确的折叠和相互作用。本章将引导读者体验从复杂生物样品中分离纯化蛋白质，并掌握测量蛋白质浓度的常用方法。 实验目标： 掌握从细胞或组织中提取蛋白质的方法，学习初步的蛋白质纯化技术，并通过 Bradford 法、 Lowry 法等经典比色法测定蛋白质浓度。 实验内容： 细胞裂解与蛋白质提取： 选取合适的细胞系（如E. coli或哺乳动物细胞），通过物理方法（如超声波破碎、研磨）或化学方法（如加入裂解缓冲液，含SDS、尿素等）破坏细胞膜和核膜，释放出细胞内的蛋白质。 初步纯化： 超速离心： 通过不同转速的离心，去除细胞碎片和未溶解的细胞器，获得澄清的蛋白质溶液。 沉淀法： 利用硫酸铵盐析法，通过逐渐增加硫酸铵的浓度，使不同溶解度的蛋白质逐步沉淀，从而达到初步分离的目的。 蛋白质定量分析： Bradford 法： 利用染料Coomassie Brilliant Blue G-250在酸性条件下与蛋白质结合，形成蓝色的复合物，在595nm波长下有最大吸收。该方法灵敏度高，操作简便。 Lowry 法： 基于Folchin-Ciocalteu试剂（一种钨钼酸盐混合物）与蛋白质中的酪氨酸、色氨酸残基以及肽键反应，产生蓝色的产物，在750nm和550nm波长下有最大吸收。该方法也较为常用，但操作步骤相对复杂。 理论拓展： 介绍蛋白质的基本结构层次（一级、二级、三级、四级结构），以及蛋白质的功能多样性，如酶催化、信号转导、结构支持等。阐述电泳、层析等更高级的蛋白质分离纯化技术在蛋白质组学研究中的应用。 章节三：糖类与脂质的探索——初步鉴定与功能探究 糖类（碳水化合物）和脂质虽然在结构上相对简单，但它们在生命体中扮演着至关重要的角色，分别作为能量的直接来源和储存形式，以及细胞膜的重要组成成分和信号分子。 实验目标： 学习鉴定不同类型的糖类（还原糖、非还原糖、多糖），初步提取和鉴定脂质。 实验内容： 糖类鉴定： 斐林试剂法： 鉴定还原糖。斐林试剂（氢氧化钠溶液与硫酸铜溶液的混合物）在加热条件下，与还原糖反应生成红色的氧化亚铜沉淀。 本尼迪特试剂法： 同样用于鉴定还原糖，操作与斐林试剂法类似，试剂更稳定。 碘液法： 鉴定多糖（如淀粉）。淀粉遇碘液变蓝色。 酵母发酵法： 利用酵母发酵产生酒精和二氧化碳的现象，间接证明葡萄糖等还原糖的存在。 脂质提取与鉴定： 植物种子脂质提取： 选取富含油脂的植物种子（如花生、芝麻），通过研磨和有机溶剂（如石油醚、乙醇）萃取，去除杂质后蒸发溶剂，得到粗提脂质。 苏丹Ⅲ/Ⅳ染料法： 利用苏丹Ⅲ（橙红色）或苏丹Ⅳ（红色）染料与脂质发生反应，呈现特定的颜色，从而鉴定脂质的存在。 理论拓展： 详细介绍单糖、二糖、多糖的结构与功能，如葡萄糖在能量代谢中的作用，纤维素和淀粉作为结构物质和能量储存的区别。阐述脂质的分类（脂肪、磷脂、固醇等），以及它们在细胞膜组成、激素合成、维生素吸收等方面的关键作用。 第二部分：生命过程的动态观察——酶促反应与代谢途径 生命活动本质上是一系列有序的生化反应。酶作为生物催化剂，在这些反应中起着核心作用。本部分将通过观察酶促反应的速率、影响因素以及追踪代谢途径，让读者更直观地理解生命的活力。 章节四：酶的魅力——酶活性测定与影响因素探究 酶是蛋白质大家族的重要成员，它们能够极大地加速生物体内的化学反应。本章将通过设计实验，让读者亲身体验影响酶活性的各种因素。 实验目标： 掌握测定酶活性的基本方法，探究温度、pH、底物浓度和酶浓度对酶活性的影响。 实验内容： 酶活性测定： 过氧化氢酶催化过氧化氢分解： 观察气泡产生速率，或者利用氧气传感器测量氧气生成量。 淀粉酶催化淀粉水解： 定期取样，加入碘液观察淀粉消失的速率。 蛋白酶催化蛋白质水解： 观察溶液浊度的降低或紫外吸收度的增加。 影响因素探究： 温度对酶活性的影响： 在不同温度梯度下测定酶活性，找出最适温度。 pH对酶活性的影响： 在不同pH缓冲液中测定酶活性，找出最适pH。 底物浓度对酶活性的影响： 在一定酶浓度下，改变底物浓度，观察酶活性变化，理解米氏动力学。 酶浓度对酶活性的影响： 在一定底物浓度下，改变酶浓度，观察酶活性变化。 理论拓展： 详细阐述酶的催化机制（如活性中心、底物特异性），理解酶促反应的动力学模型（米氏方程），以及酶在生物体内代谢调控中的重要作用。介绍酶抑制剂和激活剂的概念。 章节五：能量的转化——呼吸作用与光合作用的实验验证 呼吸作用和光合作用是生命体能量代谢的两个核心过程。本章将通过经典的实验，揭示这些过程的物质基础和能量转化。 实验目标： 验证有氧呼吸和无氧呼吸的产物，观察光合作用中氧气的释放以及淀粉的生成。 实验内容： 呼吸作用验证： 有氧呼吸产物测定： 酵母菌或植物组织在有氧条件下培养，用澄清石灰水检测二氧化碳的生成。 无氧呼吸产物测定： 酵母菌在无氧条件下培养，检测产生的酒精（用重铬酸钾溶液）。 呼吸作用耗氧量测定： 利用呼吸仪或简单的气体体积变化测量装置，测定不同条件下（如不同温度、不同底物）的耗氧量。 光合作用验证： 光合作用释放氧气： 水生植物（如黑藻）在光照下，收集释放的气体，用带火星的木条检验是否为氧气。 光合作用产物（淀粉）鉴定： 对经过光照的植物叶片进行脱色和染色处理，用碘液检测叶片是否产生淀粉。 光合作用需要光和二氧化碳： 设计对照实验，如暗处理叶片，或用碱石灰吸收二氧化碳，观察淀粉的生成情况。 理论拓展： 深入解析有氧呼吸（糖酵解、柠檬酸循环、电子传递链）和光合作用（光反应、暗反应）的详细过程，解释它们在能量代谢和物质循环中的地位。介绍植物生理学和微生物学领域的相关实验技术。 第三部分：分子生物学的现代工具——基因工程与生物技术基础 随着分子生物学的发展，基因工程和生物技术已成为现代生命科学研究的重要手段。本部分将介绍一些基础的分子生物学实验技术，让读者领略改造生命和认识生命的能力。 章节六：基因的“魔法”——DNA连接、转化与基因表达初步 基因是生命的蓝图，而基因工程技术则允许我们对这个蓝图进行编辑和操作。本章将通过模拟实验，让读者接触到基因工程的基本流程。 实验目标： 理解DNA连接酶的作用，学习将外源DNA导入细菌细胞（转化）的原理，并初步了解基因表达调控的概念。 实验内容： DNA限制性内切酶与连接酶的模拟实验： 利用不同类型的模型（如纸条、积木）模拟DNA的切断和连接过程，直观理解粘性末端和平末端的概念，以及DNA连接酶如何弥合磷酸二酯键。 大肠杆菌转化实验（模拟）： 介绍感受态细胞的制备，载体DNA（如质粒）的制备，以及将载体DNA导入大肠杆菌细胞（如热激法、电击法）的原理。选取对特定抗生素具有抗性的质粒作为载体，并利用抗性基因来筛选转化成功的细菌。 基因表达的初步理解： 介绍启动子、终止子、编码区等基因结构元件的作用。通过简单的概念模型，说明基因转录和翻译的过程，以及影响基因表达的调控机制。 理论拓展： 详细介绍限制性内切酶的种类和作用方式，DNA连接酶的工作原理。深入讲解重组DNA技术的关键步骤（酶切、连接、转化、筛选），以及基因工程在医学、农业、工业等领域的广泛应用。介绍基因沉默、基因过表达等现代分子生物学研究的常用策略。 结语 本书内容丰富，实验操作性强，旨在为读者构建一个扎实的生命科学实验基础。我们相信，通过亲身实践，您将能够更深刻地理解生命的奥秘，激发对科学探索的热情，并为未来的深入研究打下坚实的基础。生命的化学是一门博大精深的学科，本书只是您踏入这个精彩世界的起点。愿您在实验的探索之路上，收获知识，拓展视野，创造属于自己的科学成就。

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实验安全和规范操作的强调力度，是这本书给我留下的又一个深刻印象。我接触过不少实验指导书，往往只是在扉页简单列出几条注意事项，但这本书的处理方式显得更为系统化和情境化。它将安全条例渗透到了每一个具体的实验环节中去。比如，在涉及有毒试剂的操作部分，除了常规的通风和防护要求外，还详细描述了万一发生小范围泄漏时的即时处理流程和后续的废弃物安全处置标准。更值得称赞的是，它引入了一些“常见错误与潜在风险回顾”的版块，通过模拟学习者可能犯的错误场景，来反向强化安全意识。这种“预警式”的教学设计，极大地提高了学习的警惕性，让人在动手之前就能够形成一个完整的风险评估意识，这对于任何基础科学实验的入门者都是至关重要的生命线教育。

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这本书的排版和装帧设计着实让人眼前一亮，拿在手里沉甸甸的，感觉质量很高。纸张的质感很棒，印刷清晰锐利，即便是图表和化学结构式的细节也处理得非常到位，阅读起来非常舒适，长时间盯着看也不会觉得眼睛很累。尤其是那些复杂的实验流程图，线条流畅，逻辑清晰，配合恰到好处的留白，使得原本枯燥的实验指导瞬间变得直观易懂。封面设计上，虽然我更关注内容本身，但不得不说，那个抽象的分子结构图案设计得很有艺术感，既体现了科学的严谨性，又不失现代设计的简洁美。装订方面也非常结实，可以平摊在实验台上而不会合拢，这对于需要边看边操作的实验过程来说简直是太方便了，可见出版方在细节上是下了真功夫的。如果仅仅从工具书的角度来看，这种用心的设计和制作，无疑是为学习体验加分不少，让人在使用过程中感到愉悦和尊重。

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这本书的语言风格，可以说是教科书级别中少有的兼具权威性与可读性的典范。它完全避开了那种干巴巴的、纯粹指令式的书面语，转而采用一种非常严谨但又饱含引导性的叙述方式。例如，在解释某个现象时，它会用上精确的化学术语，但紧接着会用一段非常口语化且贴近思考过程的文字进行解释和类比，仿佛一位经验丰富的导师正在你耳边细语指导。这种双轨制的语言策略，使得文本既满足了学术上的严谨要求，又极大地降低了非专业背景读者的理解门槛。这种平衡感把握得非常到位，让阅读过程更像是一场高质量的、有互动的学习体验，而不是冷冰冰的知识灌输。

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这本书在理论与实践结合的深度上，处理得相当老到和精妙。它并没有简单地罗列实验步骤，而是将每一项基础化学实验的背后原理，用一种非常深入浅出的方式进行了阐述。我尤其欣赏它在“为什么”和“怎么做”之间搭建的坚实桥梁。比如，讲解滴定实验时，不仅细说了如何精确配制标准液，更花了大量的篇幅去剖析指示剂变色的化学基础，以及缓冲溶液在滴定终点判断中的作用机制，甚至还扩展到了不同酸碱强度对选择指示剂的限制性讨论。这种由浅入深，层层递进的讲解结构，让读者不仅仅是学会了“操作”，更是真正理解了“科学思想”。对于初学者而言，它提供了一个扎实的理论基石；对于有一定基础的人来说，它也是一个极佳的知识点查漏补缺的参考，内容密度和广度都令人印象深刻。

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章节内容的组织逻辑，体现了一种非常清晰的教学规划性。从最基础的溶液配制、误差分析方法，到相对复杂的定性分析和定量测定，过渡得自然而流畅，就像是一条精心铺设的知识阶梯。它没有一下子把所有复杂的仪器和技术都堆砌在一起，而是采用循序渐进的方式，确保学生在掌握了基础的量具使用和数据处理能力后，再去挑战更高阶的实验技术。我注意到，很多基础概念的引入都选在了最相关的实验模块中进行，而非冗长的前言介绍，这极大地提高了知识的即时应用效率。这种“带着问题去学习”的结构设计，让学习的每一步都有明确的目的性和成就感，有效避免了早期学习阶段容易产生的迷茫和倦怠情绪。

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