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出版者:东南大学

作者:袁榴娣 编

出品人:

页数:144

译者:

出版时间:2007-8

价格:14.50元

装帧:

isbn号码:9787564108632

丛书系列:

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《分子生物学前沿技术》 图书简介 本书系统梳理了当前生命科学领域最前沿、最具革命性的分子生物学实验技术，旨在为高年级本科生、研究生以及一线科研工作者提供一套全面、深入且兼具实践指导意义的技术手册。我们深知，现代生物学研究的深度和广度已远远超越了传统方法的范畴，因此，本书将重点聚焦于那些正在重塑我们理解生命过程、加速疾病机理阐明与新疗法开发的关键工具。 全书共分为六大部分，覆盖了从基因组编辑到单细胞分析的广阔技术图谱。 --- 第一部分：基因组编辑与调控的精细操控 本部分深入剖析了以CRISPR/Cas系统为核心的核酸编辑技术群的最新进展及其在复杂生物学问题中的应用。我们不仅详细讲解了经典Cas9系统的操作流程、脱靶效应评估与优化策略，更着墨于新型碱基编辑器（Base Editors, BEs）和先导编辑器（Prime Editors, PEs）的分子机制与应用边界。 1.1 CRISPR/Cas系统的最新迭代与递送策略： 讨论了CRISPR系统的多样性（如Cas12、Cas13等）在RNA编辑和诊断中的潜力。特别关注了无病毒载体（如脂质纳米粒LNP、电穿孔优化）在体内基因治疗递送中的挑战与突破。 1.2 高精度单碱基和片段编辑： 详细介绍了PE系统的设计原理，包括如何通过反转录酶的精确控制实现点突变的纠正，以及在诱导复杂插入/缺失（Indel）时的优化参数。我们提供了针对特定基因组位点的sgRNA设计指南，并强调了设计高特异性sgRNA的关键考量因素。 1.3 表观遗传调控的动态重塑： 这一章节侧重于使用CRISPR与失活效应子（如dCas9-DNMT3A融合体）来实现特定基因位点的DNA甲基化或组蛋白修饰的定向调控，用于研究基因沉默与激活的动态过程，而非永久性的基因敲除。 --- 第二部分：高通量测序（NGS）的深度解析 高通量测序技术已成为生物学研究的基石。本部分侧重于如何从技术层面理解不同测序平台（Illumina, PacBio, Oxford Nanopore）的优势与局限，并重点讲解了面向特定研究需求的文库构建与数据分析流程。 2.1 长读长测序（LRS）的优势与挑战： 详述了PacBio HiFi和ONT技术在解析基因组复杂结构变异（SV）、鉴定全长转录本（Isoforms）方面的能力。重点讨论了如何通过优化DNA提取和文库制备，以最大化捕获高分子量DNA，并降低合成错误率。 2.2 单细胞多组学整合分析： 这是本部分的核心。我们深入探讨了从单细胞RNA测序（scRNA-seq）到单细胞ATAC测序（scATAC-seq）的技术流程。重点剖析了多模态整合技术（如Multiome），如何同时解析同一细胞的基因表达和染色质可及性，从而构建更精细的细胞图谱。 2.3 空间转录组学（Spatial Transcriptomics）： 详细介绍了原位测序技术（如Visium, MERFISH）的原理，及其在保留组织学背景下对基因表达进行高分辨率成像的应用。我们提供了组织切片处理、靶向捕获效率优化的实操建议。 --- 第三部分：蛋白质组学与蛋白质相互作用的探究 理解细胞功能，必须精准描绘蛋白质的修饰、丰度和相互作用网络。本部分聚焦于质谱技术的最新进展及其与生物化学分离技术的耦合。 3.1 深度蛋白质组学与定量分析： 讲解了自上而下（Top-Down）和自下而上（Bottom-Up）质谱策略的适用场景。特别关注了基于TMT/iTRAQ的绝对定量方法，以及如何在复杂样品中提高低丰度蛋白质的鉴定率。 3.2 蛋白质翻译后修饰（PTM）的位点鉴定： 重点介绍了磷酸化、泛素化等关键PTM的富集技术（如金属离子亲和层析、抗体捕获），以及如何利用高分辨率质谱解析其确切的修饰位点。 3.3 原位蛋白质相互作用捕获： 介绍了BioID、APEX等邻位标记技术，如何用于在活细胞内快速、广谱地捕获蛋白质的物理互作伙伴，并探讨了捕获数据的生物信息学验证流程。 --- 第四部分：先进的细胞示踪与活细胞成像技术 对生命活动的实时、非侵入性监测，是揭示动态生物学机制的关键。本部分关注新型荧光探针和显微成像技术。 4.1 改进的荧光蛋白与探针设计： 讨论了新一代光开关蛋白（如Dronpa系列）和高亮度、高光稳定性的荧光报告基因。此外，介绍了用于监测特定离子、代谢物或活性氧物种的化学合成荧光探针的构建原则。 4.2 超分辨率显微技术（SRM）： 详细对比了STED、PALM/STORM等不同超分辨方法的原理，并提供了优化信噪比、减少光漂白的技术诀窍。重点阐述了如何利用这些技术解析膜蛋白复合体或细胞骨架的纳米级结构。 4.3 二光子显微技术与活体成像： 讲解了二光子显微镜在深层组织成像中的优势，以及如何结合体外灌流系统或在体模型，实现对神经回路活动或免疫细胞行为的长时间动态追踪。 --- 第五部分：合成生物学与人工生命系统的构建 本部分探讨如何利用分子工具设计和构建具有特定功能的生物系统，从简单的基因回路到复杂的细胞重编程。 5.1 模块化基因线路的设计与构建： 介绍了利用标准化的启动子、编码序列和终止子元件，构建逻辑门电路（如AND, OR门）的方法学，以及在酵母、大肠杆菌中的实际应用案例。 5.2 异源代谢途径的工程化： 详细阐述了如何通过计算模型预测代谢流，并结合基因组编辑技术，将复杂的非天然代谢途径高效地移植到宿主细胞中，用于生物燃料或高价值化合物的生产。 5.3 合成细胞与最小基因组研究： 讨论了人工合成基因组的构建策略，以及通过逐步削减天然基因组，以探究生命必需基因集合的最新进展。 --- 第六部分：生物大分子的结构解析：冷冻电镜（Cryo-EM）的实践指南 冷冻电镜已成为解析大分子复合物高分辨率三维结构的“金标准”之一。本部分提供了从样品制备到三维重建的详细操作流程。 6.1 优质样品制备是成功的关键： 详尽描述了不同类型复合物（膜蛋白、大分子机器）的纯化标准，以及不同冷冻速度对冰层质量的影响。重点讲解了对样品进行初步滴定和筛选的必要性。 6.2 数据采集与成像参数优化： 深入探讨了显微镜的电压、照明模式、像差校正对最终分辨率的影响。提供了针对低丰度或柔性大分子的数据采集策略。 6.3 2D分类、3D重建与原子模型拟合： 详细介绍了EMAN2、Relion等主流软件的工作流程，特别强调了在低分辨率数据中如何通过约束和补充分辨模型来提高结构精度，并进行原子模型的准确拟合与验证。 本书力求技术全面、操作性强，避免了对基础生物化学概念的冗余描述，而是聚焦于“如何做”和“为什么这样做”，为读者提供掌握尖端科研工具的坚实基础。

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关于热带雨林生态系统的野外调查手册，这本书的实用性简直是无与伦比的，它与其说是一本书，不如说是一套完整的现场操作指南。从如何正确设置标准气候监测站，到采集不同土层微生物样本的最佳无菌技术，再到识别上百种特定区域的昆虫物种的图谱和记录表格，事无巨细，考虑得极为周全。书中大量的流程图和注意事项清单，确保了即便是经验相对不足的田野工作者，也能最大限度地减少操作失误。我尤其欣赏它对于“危险动物接触预案”的详尽说明，包括毒蛇的识别、急救措施以及如何设置有效的防兽围栏等，这些内容在其他理论书籍中是绝对看不到的。书的封面采用了防水耐磨材料，内页纸张也进行了特殊处理，显然是为适应潮湿、多变的热带环境而设计，这种对使用者场景的深刻理解，使得它在工具书行列中脱颖而出，真正做到了“带着它就能开展工作”。

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这本关于十九世纪俄国批判现实主义文学的选集，选材角度相当刁钻且具有高度的文学品味。它没有过多纠缠于陀思妥耶夫斯基或托尔斯泰的那些宏大叙事，而是将笔墨集中在那些被主流文学史略微边缘化的作家身上，比如冈察洛夫和萨尔蒂科夫-谢德林。通过对他们作品中关于官僚主义腐败和地方贵族没落的讽刺性描写的深入解读，展现了那个沙皇体制下社会结构的深刻病态。这本书的文字是极其优美的，翻译者在转译那些充满俄式幽默和深刻自嘲的段落时，保留了原文的韵味和尖锐度，读起来酣畅淋漓，仿佛能听见那个时代特有的喧嚣与压抑。每一篇评论都像是一把精巧的手术刀，剖开了人物内心的矛盾和时代的荒谬，对于想深入理解俄国文学脉络和民族精神的读者来说，这是一次精神上的洗礼，远超一般文学鉴赏的范畴。

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我不得不说，这本探讨全球供应链管理的案例分析集，在实际操作层面提供了极大的启发。它摒弃了空泛的理论模型，而是聚焦于近十年内发生的几次重大供应链中断事件，比如东南亚某关键芯片短缺事件和跨洋物流的拥堵危机。作者的功力在于，他不仅仅罗列了问题，更重要的是，深入挖掘了企业在面对“黑天鹅”事件时的反应机制、风险评估模型的失效点，以及最终是如何通过技术手段（例如引入区块链追踪和AI需求预测）实现韧性重建的。阅读过程中，我反复记下了书中关于“多源采购策略”和“库存缓冲区的动态调整”的具体参数建议。这本书的语言风格非常务实，充满了商业术语和数据图表，读起来节奏很快，让人总想一口气读完，生怕错过任何一个可能影响到企业成本和效率的细节。它真正做到了将学术研究转化为可立即执行的商业策略。

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这本关于中世纪艺术史的专著，简直是一场视觉的盛宴，作者的考据工作做得极其扎实，每一个章节都仿佛带领读者穿越回了那个骑士与信仰交织的时代。书中对哥特式大教堂的彩绘玻璃技艺的深入剖析，细致到连光线穿透不同颜料时产生的细微色差都有所描摹，读起来完全不是枯燥的学术论述，而更像是一场沉浸式的导览。特别是书中收录的大量高清、原尺寸的插图，使得那些原本只能在遥远博物馆中瞻仰的壁画细节，如今也能在指尖细细品味。我尤其喜欢它对不同地区、不同时期修道院艺术风格差异的对比分析，比如罗马式建筑的厚重与后来的放射式哥特风格的轻盈感之间的演变逻辑，讲得清晰而富有洞察力。这本书的排版也十分考究，留白得当，字体选择古典而不失易读性，让人愿意捧着它，在午后的阳光下，慢慢翻阅，体会那种历史的厚重感和匠人的精神。它成功地将晦涩的艺术史知识，转化为一种可以被大众理解和欣赏的美学体验，对于任何对那个时代文化或建筑感兴趣的人来说，都是不可多得的宝藏。

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翻开这本关于量子计算基础的教材，我的第一反应是，作者的叙述方式太“硬核”了，毫不留情地直击数学核心。这本书似乎完全没有考虑到初学者的感受，开篇就抛出了一连串复杂的线性代数和概率论知识，如果不是对相关领域有深厚背景，恐怕光是啃完前三章的数学预备知识就要耗费大量时间。不过，一旦你成功跨越了这道门槛，后续的内容就会展现出其惊人的严谨性和深度。书中对量子门操作、纠缠态的数学表述，以及Shor算法和Grover算法的推导过程，逻辑链条清晰到令人赞叹，每一步的变换都有严格的数学依据支撑，没有丝毫的模糊地带。它更像是一本供专业研究人员参考的工具书，而非入门读物。对于那些已经有一定基础，希望将理论知识精确化、严密化的读者来说，这本书无疑是极佳的选择，那些复杂的希尔伯特空间描述和矩阵乘法，是通往真正理解量子力学应用的关键钥匙。

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