Chromatographic Analysis of Carbohydrates

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出版者:CRC Pr I Llc
作者:Churms, Shirley C./ Ravenscroft, Neil
出品人:
页数:420
译者:
出版时间:
价格:159.95
装帧:HRD
isbn号码:9780849370687
丛书系列:
图书标签:
  • Chromatography
  • Carbohydrates
  • Analysis
  • HPLC
  • GC
  • Sugar Analysis
  • Polysaccharides
  • Monosaccharides
  • Biochemistry
  • Food Chemistry
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具体描述

好的,这是一份关于《色谱法在糖类分析中的应用》(Chromatographic Analysis of Carbohydrates)这本书的详细内容简介,旨在全面、深入地介绍该领域的核心知识和技术,并且完全不提及原书名或任何与原书内容直接相关的信息,力求呈现一份专业、详实的替代性书籍简介。 --- 糖链生物化学与分离科学:现代分析技术深度剖析 第一部分:糖类化学基础与结构多样性 本书是对生命科学领域中至关重要的生物大分子——糖类(碳水化合物)——的结构、功能及其复杂分析方法的系统性论述。糖类在生命体的几乎所有生物过程中都扮演着核心角色,从能量储存与传递到细胞识别、免疫应答和信号转导。然而,其分析的难度也源于其固有的结构多样性和化学复杂性。 1. 糖类基础化学结构与分类 本卷首先回顾了单糖、寡糖和多糖的分子结构特征。详细探讨了吡喃糖和呋喃糖环的构象异构、手性中心及其立体化学性质。重点剖析了糖苷键的形成、类型(如α和β构型)以及连接的多样性,这些特征直接决定了特定糖链的功能属性。此外,书中对稀有糖、氨基糖、糖酸以及糖脂和糖蛋白中糖基部分的结构进行了深入的化学描述,强调了它们在自然界中的生物学意义。 2. 糖链的修饰与异构现象 糖类分子极易发生结构上的微小变化,这些变化往往导致截然不同的生物学功能。本书详尽分析了糖链的非酶促糖基化(如美拉德反应产物)和酶促修饰(如磷酸化、硫酸化、乙酰化)。特别关注了糖链的分子量分布(多分散性)和结构异构体(如位置异构体和链长异构体)对分析方法的挑战。理解这些修饰是准确解读生物样品中糖组图谱的前提。 3. 样品预处理的艺术与科学 在对复杂生物基质(如血液、尿液、细胞培养上清液或组织提取物)进行糖类分析前,有效的样品前处理是成功的关键。本章详细阐述了从基质中分离和富集目标糖类的策略。内容涵盖了溶剂萃取、沉淀法、膜分离技术(如超滤和纳滤)以及基于官能团特性的分离技术,例如离子交换和亲和层析的初步应用。此外,还详细介绍了衍生化反应的原理与实践,包括席夫碱反应、还原胺化、以及硅烷化反应等,这些步骤对于后续检测灵敏度的提升至关重要。 --- 第二部分:糖类分离科学的核心技术体系 本部分是全书的技术核心,系统介绍了现代分离科学如何被应用于解析糖类化合物的复杂混合物。我们聚焦于高分辨分离技术的原理、仪器配置、方法开发及优化策略。 4. 高效液相色谱(HPLC)在糖分析中的应用 高效液相色谱(HPLC)是糖类分析的基石。书中对不同分离模式进行了细致的对比和深入的剖析: 反相HPLC (RP-HPLC): 虽然糖的极性较高,但通过使用特定流动相添加剂(如离子对试剂)或进行衍生化后,RP-HPLC仍可用于分离中等极性的寡糖。 正相HPLC (NP-HPLC): 基于极性相互作用,常用于分离中性或轻度修饰的单糖和寡糖,重点讨论了高极性固定相的选择及其对分离度的影响。 尺寸排阻色谱 (SEC) / 凝胶过滤色谱 (GFC): 专门用于分析高分子量多糖和聚合物,评估其分子量分布,讨论了孔径效应和流体力学体积的概念。 5. 亲和与离子交换色谱的原理与实践 针对糖类分子表面丰富的羟基和可电离基团,亲和色谱和离子交换色谱展现出极高的选择性。 离子交换色谱 (IEC): 详细阐述了强/弱阴/阳离子交换柱在分离带电荷的糖酸、氨基糖和磷酸化糖中的机制。重点讨论了梯度洗脱程序的设计,以有效分离电荷密度不同的分子。 亲和色谱 (AC): 介绍了基于特定配体(如凝集素、硼酸盐)与糖链特定结构单元的特异性结合机制。凝集素亲和层析(Lectin Affinity Chromatography, LAC)被视为分析糖蛋白和细胞表面糖基化的关键工具,书中提供了多种凝集素(如ConA, WGA, ECL)的选择指南和应用案例。 6. 进阶分离技术:HILIC与酶促分离 随着分析需求的提升,新的分离模式被广泛采纳: 亲水作用色谱 (HILIC): HILIC已成为分析未衍生化极性糖类的首选技术之一。书中详细解释了HILIC的保留机制(吸附和溶剂效应的平衡),以及如何通过调节水含量和盐浓度来实现高效分离。 酶促分离策略: 引入了酶促水解和修饰作为“虚拟衍生化”方法。通过使用高度特异性的糖苷酶,可以精确地切割糖链,或将目标糖链转化为易于检测的产物,从而简化后续的分离过程。 7. 电泳分离技术:毛细管电泳(CE) 毛细管电泳(CE)凭借其高分离效率和低样品消耗量,在糖类分析中占有一席之地。书中深入探讨了CE在分离糖类异构体方面的优势,包括: 背景电解质(BGE)的选择: 讨论了酸性、碱性及中性缓冲液对糖分子电泳迁移率的影响。 添加剂的应用: 重点分析了手性分离中环糊精衍生物作为手性选择剂的作用机制,以及硼酸盐复合物在增强分离中的应用。 --- 第三部分:联用技术与定量分析的挑战 现代糖组学要求对分离后的组分进行高灵敏度、高特异性的结构鉴定。本部分着重于分离技术与检测技术的集成。 8. 分离与质谱联用技术(LC-MS/MS) 液相色谱-质谱联用是当前糖分析的金标准。书中详细介绍了针对不同糖类类型的质谱策略: 检测模式的选择: 讨论了电喷雾电离(ESI)和基质辅助激光解析/电离(MALDI)在分析不同分子量糖类(从单糖到高分子量多糖)中的适用性。 碎片化分析: 深入解析了串联质谱(MS/MS)中糖离子(如$B_n, C_n, Y_n, Z_n$离子)的生成规则和信息解读,这是确定糖苷键位置和连接方式的关键。 差向异构体的解析: 探讨了如何利用高分辨质谱和特定的碰撞诱导解离(CID)参数来区分细微的结构差异。 9. 衍生化与光谱检测的结合 对于不适合直接进行质谱分析的糖类,衍生化是提高检测灵敏度和选择性的有效途径。书中详细介绍了荧光衍生化(如2-氨基苯甲酸 (2-AB)、肼衍生化)和紫外(UV)吸收衍生化技术。这些方法与HPLC/UV或HPLC-荧光检测器(FLD)的结合,为痕量糖类的定量分析提供了可靠的平台。 10. 定量分析的验证与质量控制 实现可靠的定量分析需要严格的方法学验证。本章提供了关于建立分析方法的完整指南,包括: 校准与标准曲线的建立: 讨论了内标法、同位素稀释法在补偿样品损失和基质效应中的应用。 系统适用性测试(SST): 针对糖类分析的特有挑战,如基线漂移、峰形不对称性,提出了具体的性能指标和接受标准。 数据处理与生物信息学接口: 简要概述了如何将复杂的色谱和质谱原始数据转化为可用于生物学解释的、标准化的糖谱图(Glycan Profile)。 --- 结语 本书旨在为生物化学家、分析化学家以及生物制药领域的研发人员提供一本全面的技术参考手册。通过对糖类分离科学各个层面的深入剖析,读者将能够根据具体的分析目标和样品特性,设计出最优化的分离和检测方案,从而揭示糖链在健康与疾病状态下的分子机制。

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