Molecular Biology, Volume 10B (Methods in Plant Biochemistry) pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

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出版者:Academic Press

作者:Bryant, J. 编

出品人:

页数:126

译者:

出版时间:1996-10-16

价格:USD 95.95

装帧:Hardcover

isbn号码:9780124610217

丛书系列:Methods in Molecular Biology

图书标签:

• Molecular Biology
• Plant Biochemistry
• Methods
• Biochemistry
• Plant Molecular Biology
• Molecular Biology Techniques
• Biotechnology
• Plant Physiology
• Genetics
• Research Methods

植物生物化学方法，第十卷 B：分子生物学 导言 《植物生物化学方法》系列旨在为研究植物生物化学的科学家们提供全面、实用的技术指南。该系列每一卷都聚焦于植物生物化学研究中的一个特定领域，深入介绍最新的实验技术、分析方法以及数据解读策略。本文介绍的《植物生物化学方法，第十卷 B：分子生物学》正是该系列中承上启下的关键卷册，它将分子生物学的前沿进展与植物科学的独特需求相结合，为读者提供了探索植物基因组、转录组、蛋白质组以及代谢组的强大工具箱。 本卷卷宗的编纂，汇集了全球范围内在该领域具有深厚造诣的科研人员的智慧和实践经验。其内容覆盖了从基因克隆、表达调控到蛋白质功能分析、信号转导机制解析等一系列核心分子生物学技术在植物科学中的应用。本书不仅强调理论知识的阐述，更注重实验操作的细节指导，力求让不同经验水平的研究者都能从中受益。 核心内容概述 《植物生物化学方法，第十卷 B：分子生物学》的编写遵循严谨的科学逻辑，并兼顾了内容的时效性和前瞻性。其主要章节围绕以下几个核心主题展开： 第一部分：基因组学与转录组学研究 基因组DNA的提取与纯化： 本章详细介绍了从不同植物组织（如叶片、根、种子、愈伤组织等）中高效提取高质量基因组DNA的方法，包括各种试剂盒和经典方法的优缺点、操作注意事项以及结果的初步质量评估。重点关注了如何克服植物细胞壁的坚韧性和次生代谢产物的干扰。 RNA的提取与纯化： 深入探讨了从植物细胞和组织中提取全RNA、mRNA的方法。涵盖了不同RNA提取试剂（如Trizol、CTAB法等）的选择与优化，以及如何去除基因组DNA污染、抑制RNA酶活性等关键步骤。特别强调了对 RNA 降解敏感的植物材料的处理技巧。 基因克隆与构建： 介绍了各种基因克隆技术，包括限制性内切酶消化、连接反应、PCR克隆等。重点阐述了载体（如质粒、噬菌体、酵母人工染色体等）的选择原则，以及如何构建用于基因表达、基因沉默、基因标记等目的的重组质粒。 基因表达水平的定量分析： 实时荧光定量PCR (RT-qPCR)： 详细阐述了 RT-qPCR 的实验设计、引物设计、RNA质量控制、cDNA合成、扩增条件优化、内参基因选择与验证等关键环节。提供了对实验数据进行相对定量和绝对定量的详细步骤和注意事项，以及常见问题的排查。 RNA测序 (RNA-Seq)： 深入介绍了 RNA-Seq 的实验流程，包括文库构建、高通量测序、数据预处理、比对、基因表达量计算、差异表达基因分析、功能富集分析等。讨论了不同测序平台和生物信息学分析策略的选择，以及数据质量控制和结果解读。 基因组DNA甲基化分析： 介绍了亚硫酸氢盐测序 (Bisulfite Sequencing) 等技术，用于检测植物基因组DNA的甲基化状态，以及其对基因表达的调控作用。 第二部分：蛋白质组学与蛋白质功能研究 植物蛋白质的提取与分离： 详细介绍了从植物组织中提取细胞总蛋白、亚细胞组分蛋白以及特定蛋白质的方法。涵盖了利用不同缓冲液、裂解剂、去污剂以及离心、沉淀等技术实现有效分离。讨论了去除酚类物质、糖类等干扰物的策略。 二维凝胶电泳 (2-DE) 与差异蛋白质组学： 深入讲解了 2-DE 的原理、操作步骤、样品制备、胶体染色、图像分析以及如何与质谱联用进行蛋白质鉴定。重点阐述了如何通过 2-DE 结合代谢组学或转录组学数据，挖掘差异表达的蛋白质，揭示植物响应环境变化或发育过程中的分子机制。 质谱 (MS) 技术在蛋白质鉴定中的应用： 详细介绍了液相色谱-串联质谱 (LC-MS/MS) 等技术在植物蛋白质鉴定和定量中的应用。包括样品准备、质谱数据采集、数据库搜索、蛋白质定量方法（如SILAC, TMT等）以及结果的验证。 蛋白质互作网络的构建： 介绍了酵母双杂交 (Y2H)、体外共免疫沉淀 (Co-IP)、双向电泳-质谱联用 (2D-PAGE/MS) 等技术，用于研究植物蛋白质之间的相互作用。重点关注了如何设计实验、优化条件以及验证互作的特异性和可靠性。 蛋白质功能研究技术： 涵盖了利用体外酶活性测定、免疫印迹 (Western Blotting)、免疫组织化学 (Immunohistochemistry) 等技术，研究蛋白质在细胞内的定位、活性以及其在特定生理过程中的作用。 第三部分：植物基因功能分析与调控机制 基因沉默技术（RNAi）： 详细介绍了利用 RNAi 技术（包括 shRNA, miRNA 等）在植物中实现基因沉默的策略。涵盖了载体构建、转化方法、基因沉默效果的评估以及实验设计的注意事项。 基因过表达与功能增强： 介绍了如何构建过表达载体，将目标基因导入植物，从而研究其过表达后的表型变化。重点讨论了启动子的选择、转化体系的优化以及过表达水平的检测。 基因编辑技术（CRISPR/Cas9）： 详细阐述了 CRISPR/Cas9 技术在植物基因组编辑中的应用，包括靶向设计、sgRNA 的合成、转化方法以及基因编辑效率的评估。重点讨论了如何利用该技术进行基因敲除、基因敲入和位点突变，以解析基因功能。 启动子分析与转录因子研究： 介绍了启动子-报告基因融合实验，用于鉴定和分析植物基因的启动子元件及其调控元件。阐述了如何利用 ChIP-PCR (Chromatin Immunoprecipitation Polymerase Chain Reaction) 等技术研究转录因子与 DNA 的结合。 信号转导通路研究： 介绍了植物激素信号转导、光信号转导、胁迫信号转导等关键通路的研究方法。涵盖了利用分子标记、基因表达分析、蛋白质互作等技术，解析信号分子在通路中的作用。 第四部分：植物分子生物学常用实验技术 植物细胞转化技术： 详细介绍了农杆菌介导的转化、基因枪转化、原生质体转化等多种植物细胞转化方法。重点关注了不同植物材料和基因载体的选择，以及优化转化效率的关键步骤。 显微注射与基因导入： 介绍了在单细胞层面进行基因导入和验证的方法，适用于一些难以通过传统方法转化的植物材料。 原位杂交技术： 深入讲解了 RNA 原位杂交和 DNA 原位杂交技术，用于研究基因在植物组织和细胞中的表达模式和定位。 荧光显微镜技术在植物分子生物学中的应用： 介绍了共聚焦显微镜、荧光标记技术（如 GFP, RFP 等）在观察细胞器动态、蛋白质定位、信号分子转运等方面的应用。 数据分析与可视化： 提供了关于如何对分子生物学实验数据进行统计分析、图表绘制以及结果展示的指导。涵盖了常用的统计软件和可视化工具。 特色与价值 《植物生物化学方法，第十卷 B：分子生物学》的最大特色在于其高度的实践性。本书中的每一个实验方法都经过了反复验证，并提供了详细的操作步骤、注意事项以及可能遇到的问题及解决方案。此外，本书还特别强调了跨学科的研究视角，鼓励读者将分子生物学技术与植物生理学、遗传学、生物化学等多学科知识相结合，以更全面地理解植物生命活动的复杂性。 本书的另一个重要价值在于其前瞻性。随着基因组学、高通量测序、基因编辑等技术的飞速发展，植物分子生物学研究正迎来新的革命。《植物生物化学方法，第十卷 B：分子生物学》及时地将这些最新的技术和理念纳入其中，为读者提供了掌握未来研究方向的有力工具。 适用读者 本书适合于所有从事植物科学研究的科研人员、研究生以及对植物分子生物学感兴趣的本科生。包括但不限于： 植物遗传育种研究者 植物生理生态学研究者 植物病理学研究者 农学、林学、园艺学等相关专业的学生和教师 致力于基因工程、生物技术领域的科研人员 结语 《植物生物化学方法，第十卷 B：分子生物学》不仅仅是一本实验手册，更是植物分子生物学领域的一座知识宝库。它为读者提供了探索植物生命奥秘所需的关键技术和深入见解，必将有力地推动植物科学研究的不断进步，为解决全球粮食安全、环境保护以及生物能源等重大挑战贡献智慧和力量。通过掌握书中介绍的各项技术，研究者们将能够更深入地解析植物的遗传基础、调控机制以及对环境的响应，从而在分子层面实现对植物的精准改造和高效利用。

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