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出版者:Humana Press

作者:

出品人:

页数:0

译者:

出版时间:1996-03-01

价格:USD 99.50

装帧:Paperback

isbn号码:9780896033191

丛书系列:

图书标签:

• 酵母
• 分子生物学
• 细胞生物学
• 生物技术
• 实验方案
• 基因工程
• 蛋白质表达
• 发酵
• 微生物学
• 生物化学

《酵母实验指南》 本书是一本详尽的操作手册，旨在为研究人员提供一套全面、系统且易于遵循的酵母相关实验技术。从基础的酵母菌株培养、维持，到复杂的基因组操作、蛋白质互作分析，本书几乎涵盖了现代分子生物学和细胞生物学研究中涉及酵母的各类常用技术。其内容组织严谨，步骤清晰，力求最大程度地减少实验误差，提高实验效率和结果的可重复性。 第一部分：基础操作与菌株管理 本部分奠定了进行所有后续实验的基础。我们将从酵母的分类、生理特性以及其在科学研究中的广泛应用入手，帮助读者建立起对酵母的基本认知。随后，我们将详细介绍各种酵母培养基的配制方法，包括但不限于YPD、SD、SC等常用培养基，并阐述不同培养基在特定实验条件下的适用性。菌株的正确保存、复苏和传代是确保实验顺利进行的关键。本书将提供多种可靠的菌株保存技术，如甘油保存法、斜面保存法等，并指导读者如何进行活菌计数，以获得精确的实验起始量。此外，对于常见酵母菌株的基因型鉴定和筛选方法，本书也将进行详细阐述，帮助研究者快速准确地获取所需的实验材料。 第二部分：分子遗传学操作 本部分聚焦于在酵母中进行基因层面的操作。我们将从基本的DNA提取、PCR扩增技术开始，深入讲解如何在酵母中高效地提取高质量的基因组DNA和RNA，以及如何设计和优化PCR反应以获得目标片段。随后，本书将详细介绍各种基因操纵技术，包括基因敲除、基因敲入、基因突变导入以及基因过表达等。每种技术都将附有详细的实验流程图和图示，并讨论不同方法的优缺点以及在特定研究背景下的选择策略。例如，对于基因敲除，我们将介绍同源重组介导的基因敲除方法，包括如何设计同源臂、选择标记基因以及验证敲除效率。对于基因导入，我们将详述各种载体的选择与构建，以及转化效率的优化。此外，本书还将涵盖酵母的转化技术，包括但不限于电转化、锂化合物转化等，并提供优化转化条件的建议。最后，我们将重点讲解如何进行基因型鉴定和表型分析，以确认基因操作的成功与否，并初步评估其功能影响。 第三部分：蛋白质生物学研究 本部分侧重于利用酵母系统研究蛋白质的功能与相互作用。我们将从酵母中高效提取蛋白质的方法入手，涵盖细胞裂解、蛋白质沉淀和纯化等关键步骤。随后，本书将详细介绍多种研究蛋白质功能的技术，如Western Blotting用于检测特定蛋白质的表达水平和修饰状态，免疫沉淀（IP）用于研究蛋白质之间的相互作用，以及酵母双杂交（Y2H）系统用于大规模筛选蛋白质互作网络。对于Y2H技术，我们将详细介绍诱饵和猎物载体的设计、转化策略、重排选择以及结果的验证。此外，本书还将介绍蛋白质定位研究，如利用荧光蛋白标记技术（GFP、RFP等）追踪蛋白质在细胞内的亚细胞定位，以及使用显微成像技术进行观察和分析。为了更深入地理解蛋白质的功能，本书还将探讨一些定量的蛋白质研究方法，如ELISA（酶联免疫吸附测定）在酵母体系中的应用，以及定量PCR（qPCR）在分析基因表达水平变化方面的辅助作用。 第四部分：细胞生物学与系统生物学应用 本部分将视角拓展到酵母细胞整体的生物学功能研究。我们将详细介绍酵母细胞周期的调控与分析，包括不同周期时相的鉴定方法，以及相关基因和蛋白的表达变化。对于细胞凋亡和应激反应的研究，本书将提供相应的实验方案，如TUNEL染色、活性氧检测等。此外，本书还将介绍酵母在研究细胞器（如线粒体、内质体）功能、膜运输以及信号转导通路中的应用。为了应对日益复杂的生物学问题，本书还将引入酵母在系统生物学研究中的应用，例如利用酵母构建和分析基因调控网络，研究代谢通路，以及在高通量筛选中应用酵母作为模型系统。最后，我们还将讨论利用酵母进行药物筛选和毒理学研究的原理与方法，以及如何设计相应的实验方案。 第五部分：数据分析与结果解读 任何实验的成功都离不开准确的数据分析和恰当的结果解读。本部分将提供一些关于酵母实验数据分析的基础指导。我们将简要介绍常用统计学方法的应用，如t检验、ANOVA（方差分析）等，以评估实验结果的统计学显著性。对于高通量实验产生的数据，如Y2H筛选结果或基因表达谱数据，本书将提供初步的数据处理和可视化建议，并指出可供进一步深入分析的工具和资源。此外，本书还将强调实验结果的重复性验证的重要性，并提供一些设计合理实验以确认结果的策略。最后，我们将引导读者如何将实验结果置于更广阔的生物学背景下进行解读，并提出后续研究的可能方向。 本书的编写秉承实践为导向的原则，力求语言通俗易懂，避免过于专业化和晦涩的表述。每项技术都力求从原理、材料、步骤、注意事项以及结果分析等多个维度进行详尽阐述，旨在帮助各类水平的研究者，无论是初学者还是经验丰富的科研人员，都能快速掌握并灵活运用这些酵母实验技术，从而在各自的研究领域取得突破。

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不得不提的是，这本书的文献引用和历史回顾部分做得非常严谨和详尽，体现了作者深厚的学术底蕴。它不仅仅是罗列了当下的“最佳实践”，更是追溯了许多经典实验方法的起源和演变过程。例如，对筛选新型敲除突变株的经典方法的迭代历史，作者梳理得一清二楚，让我们明白现在的技术是如何一步步从早期的艰难摸索中发展而来的。这种历史的纵深感，让读者对现有技术的认识不再是“理所当然”，而是充满了敬意和更深的理解。阅读这些章节时，我感觉自己仿佛在参与一场穿越时空的学术沙龙，听着不同年代的先驱们阐述他们的发现和争论。对于撰写综述或准备博士资格考试的我来说，这本书提供了一个完美的时间轴和观点碰撞点。它教会我的不仅仅是如何做实验，更是如何思考科学问题，如何在一个学科的历史长河中定位自己的研究。

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作为一名日常与发酵罐打交道的工程师，我最看重的永远是实用性，而这本书在这方面表现得远超预期。它简直就是一本“实战手册”，将实验室操作的精髓提炼得淋漓尽致。我尤其欣赏它对不同规模发酵工艺的参数优化给出的建议。比如，针对特定菌株在不同pH值和溶解氧梯度下的历史数据分析，作者给出的经验值和理论指导非常具有参考价值。我按照书中推荐的几种控温策略调整了我们生产批次中的一个关键阶段，结果出乎意料地稳定，发酵周期缩短了近15%。更难得的是，书中没有回避那些“失败”的案例和常见的陷阱。它详细列举了污染控制的“黑名单”操作，以及在补料策略失误时如何快速纠正，这种近乎“血泪教训”的总结，比任何成功案例的罗列都要宝贵得多。它不是那种只谈美好结果的书，而是那种真正能带你走出困境的“救命稻草”。我打算把这本书常年放在工作台边，随时翻阅，感觉就像身边多了一位经验丰富、从不吝啬经验的老前辈在指导。

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这本书的排版和语言风格极其考究，读起来是一种享受。虽然内容专业，但作者在遣词造句上力求精准而优雅，避免了那种令人生畏的晦涩感。图表制作水平极高，每一个示意图都清晰地突出了核心信息，线条的粗细、颜色的搭配都经过深思熟虑，比起许多“只管展示数据”的教材，这本书更像是精心设计的艺术品。我个人非常欣赏它在介绍不同基因编辑技术时所采用的对比分析结构，将每种方法的优缺点、适用范围放在并列的表格中进行比较，一目了然，极大地提升了信息接收效率。而且，书中的术语表做得非常完善，即便遇到不常见的缩写，也能快速在附录中找到准确的解释，这对于多学科交叉的研究人员来说，简直是福音。总而言之，这是一本集学术深度、实践指导和审美愉悦于一体的杰作，值得每一位相关领域的同仁拥有并反复研读。

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这本书在数据分析和高级应用方面的深度，着实让我耳目一新。我原本以为它会停留在传统的微生物学范畴，但阅读后发现，它巧妙地融入了最新的生物信息学和系统生物学工具。作者对于基因表达谱分析在理解压力响应中的应用讨论得非常透彻，特别是关于转录因子调控网络动态变化的建模部分，虽然涉及高等数学，但讲解的逻辑链条非常清晰，让人能跟上作者的思路，而不是被公式吓退。印象最深的是关于代谢流分析（MFA）在筛选高产菌株中的应用案例，书中不仅介绍了理论模型，还附带了如何解读复杂流图的关键指标，这一点对于想从“试错法”转向“理性设计”的科研人员来说，简直是金矿。这本书的编排非常有层次感，从基础的分子生物学工具，逐步递进到高通量数据整合分析，确保了即便是对计算不甚熟悉的生物学家，也能从中受益匪浅，真正体会到前沿科技的魅力。

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哇，这本书拿到手里沉甸甸的，光是厚度就让人对内容的广度和深度充满期待。封面设计简洁大气，一看就是那种能沉下心来啃读的专业书籍。我最喜欢的是它对基础理论的梳理，简直是一本详尽的“酵母生物学百科全书”。它不像有些教科书那样干巴巴地堆砌公式和定义，而是用非常生动和逻辑清晰的方式，把复杂的代谢途径、遗传调控机制娓娓道来。特别是关于不同环境下酵母生长速率和产物生成机制的章节，作者似乎对这个领域的每一个细微差别都有着深刻的洞察力。我记得有个地方详细阐述了不同氮源和碳源配比对细胞周期影响的微小差异，那段描述真是妙极了，让人感觉自己仿佛真的能“看”到细胞内部正在发生着什么。对于初学者来说，这无疑是一张坚实的理论基石；而对于资深研究人员，它提供了一个绝佳的回顾和拓宽视野的平台，很多被日常实验琐事忽略掉的底层逻辑，都能在这里重新被点亮。这本书的价值，就在于它构建了一个从宏观到微观，从基础到前沿的完整知识体系，读起来非常过瘾，让人忍不住想立刻去实验室验证书中的每一个论断。

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