Methods of Microwave Fixation for Microscopy pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

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出版者:Lubrecht & Cramer, Limited

作者:G. R. Login

出品人:

页数:127

译者:

出版时间:1994-2

价格:USD 80.00

装帧:Paperback

isbn号码:9781560813811

丛书系列:

图书标签:

• Microscopy
• Microwave Fixation
• Histology
• Electron Microscopy
• Sample Preparation
• Biological Techniques
• Fixation Methods
• Microscopy Techniques
• Cell Biology
• Image Analysis

好的，以下是一部关于 “现代分子生物学技术与应用” 的图书简介，此书内容与您提到的“Methods of Microwave Fixation for Microscopy”完全无关。 --- 现代分子生物学技术与应用：从基础原理到前沿实践 本书简介 在二十一世纪的生命科学研究中，分子生物学已不再仅仅是一个学科分支，而是构成了现代生物学、生物医学、生物技术乃至环境科学的基石。随着基因组学、蛋白质组学和细胞生物学研究的深入，对精确、高效、高通量的技术手段的需求日益迫切。《现代分子生物学技术与应用》正是为满足这一需求而编写的权威性专著。本书旨在系统梳理并深入剖析当代分子生物学领域中最为关键和前沿的技术平台，为科研工作者、高年级本科生及研究生提供一个全面、实践导向的学习资源。 本书摒弃了对单一、特定技术（如微波固定）的偏颇介绍，而是将重点放在构建一个涵盖分子生物学研究全流程的技术体系上。全书结构严谨，内容涵盖从核酸和蛋白质的提取、修饰、检测到复杂的细胞功能分析等多个维度。 第一部分：分子操作与检测基础 本部分首先奠定了进行所有分子生物学实验的基石——样本制备与核心检测技术。 第一章：生物大分子的高效分离与纯化 详细阐述了从组织、细胞乃至环境样本中提取高质量DNA、RNA和蛋白质的关键步骤。重点介绍了次氯酸铯密度梯度离心、离子交换层析、疏水作用层析以及亲和层析等经典与现代分离技术。特别强调了在处理微量或降解严重样本时，如何优化缓冲液体系和去除内源性抑制剂，以确保后续实验的成功率。我们深入分析了快速核酸提取方法的适用性，并对比了不同蛋白质组分捕获策略的优劣。 第二章：聚合酶链式反应（PCR）及其衍生技术的精细调控 PCR是分子生物学研究的“瑞士军刀”。本章不仅回顾了标准PCR的原理，更侧重于高阶应用的探讨。内容包括：实时荧光定量PCR（qPCR）的动力学分析、绝对与相对定量方法的选择；高保真PCR酶的应用及错配频率控制；以及用于复杂基因组分析的长片段PCR（Long-Range PCR）和差示显示系统（DDIS）技术。此外，还详尽介绍了数字PCR（dPCR）在罕见突变检测中的绝对优势与操作规范。 第三章：凝胶电泳与毛细管电泳的定量分析 电泳技术依然是评估分子大小和纯度的金标准。本章区分了非变性与变性电泳的应用场景，并重点讲解了脉冲场电泳（PFGE）在处理大片段DNA时的技术要点。对于蛋白质分析，则详细介绍了SDS-PAGE、2D电泳（二维电泳）的原理，并引入了毛细管电泳（CE）在序列分析和片段分析中的高分辨率应用。 第二部分：基因组学与转录组学的深度解析 随着高通量测序时代的到来，对整个基因组和转录组的整体分析能力成为了前沿课题的必备技能。 第四章：新一代测序技术（NGS）的平台原理 本书将NGS技术视为一个完整的技术栈进行介绍，而非单一的仪器操作指南。内容覆盖Illumina SBS（边合成边测序）、Ion Torrent半导体测序和PacBio SMRT（单分子实时）测序的底层化学原理和光学检测机制。详细比较了它们在读长、准确性、以及成本效益上的差异，并指导读者根据研究目标（如全基因组重测序、外显子组测序或宏基因组分析）选择最合适的平台。 第五章：转录组分析：从RNA提取到生物信息学解读 本章关注RNA的稳定性和逆转录过程的效率优化。重点讲解了Poly(A)富集法、rRNA去除法和全长RNA测序（Full-length RNA sequencing）的差异。在转录组数据分析部分，本书侧重于差异表达基因（DEG）的筛选标准、功能富集分析（GO/KEGG）的统计学意义，以及lncRNA和circRNA的鉴定流程。 第六章：表观遗传学：DNA甲基化与组蛋白修饰的捕获 表观遗传学研究要求更精细的技术来解析基因表达的调控层面。本书详细介绍了亚硫酸氢盐测序（Bisulfite Sequencing）的文库制备与数据校正流程，用于解析全基因组甲基化图谱。此外，免疫沉淀技术（ChIP）被深入探讨，包括ChIP-seq和ChIP-qPCR的实验设计，以及如何使用ChIP-Exo等高分辨率技术来精确定位蛋白质-DNA相互作用位点。 第三部分：蛋白质组学与细胞功能研究 理解生命活动的核心在于蛋白质的功能及其相互作用网络。本部分聚焦于蛋白质的鉴定、定量以及在活细胞环境中的动态观察。 第七章：质谱技术在蛋白质组学中的应用 本书将液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）作为蛋白质组学分析的核心技术进行介绍。内容涵盖了从样本酶解（胰酶、赖氨酸-C）到肽段分离、离子化（ESI、MALDI）的整个流程。重点讲解了定性分析（数据库搜索）与定量分析（TMT、iTRAQ标记策略和非标记定量技术）的实践步骤和数据质量控制。此外，也前瞻性地介绍了空间蛋白质组学（Spatial Proteomics）的初步技术框架。 第八章：蛋白质相互作用网络的解析 蛋白质很少单独工作。本章系统梳理了鉴定蛋白质复合物与相互作用对的技术手段。酵母双杂交（Y2H）的构建与筛选，Co-IP（共免疫沉淀）的优化策略（包括使用交联剂），以及BioID/AP-MS（生物素化标记-亲和纯化-质谱联用）等邻位标记技术，被详细阐述其在体内和体外系统中的应用边界。 第九章：细胞示踪与活细胞成像技术 为了观察分子在细胞内的动态过程，先进的成像技术至关重要。本章不涉及传统固定切片方法，而是专注于活细胞成像。内容包括：荧光蛋白（GFP/RFP等）的稳定表达系统、FRET（荧光共振能量转移）用于分子间距离测定、FRAP（荧光漂白后恢复）用于分子动态性分析，以及先进的延时摄影和光片显微镜（Light-Sheet Microscopy）在三维组织观察中的应用。 第四部分：系统生物学与生物信息学整合 现代分子生物学研究的终点在于数据整合与系统理解。 第十章：生物信息学数据处理与可视化 高质量的实验数据需要强大的计算能力进行解析。本章提供了一个从原始数据（如FASTQ文件）到可解释结果的路线图。内容包括：数据质量控制（FastQC）、序列比对（BWA/Bowtie2）、变异检测（GATK流程），以及R/Python在数据标准化、批次效应校正和复杂可视化（如热图、通路图）中的实际代码示例与应用案例。 结论：面向未来的分子生物学研究范式 本书总结了技术融合的趋势，强调了“多组学整合”（Multi-omics Integration）在揭示复杂生命现象中的核心地位。它不仅仅是一本技术手册，更是引导读者建立起系统、前沿的分子生物学研究思维框架的指导性工具。 --- 适用读者： 生命科学、生物技术、医学研究领域的硕士和博士研究生。 高校教师及实验室技术人员。 希望快速了解和掌握现代分子生物学核心技术的科研工作者。

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我对于作者在讨论“固定”这个核心概念时的视角感到非常不解和受限。这本书似乎将“固定”的定义狭隘地局限在了单纯的化学交联或蛋白质变性上，而完全忽略了现代细胞生物学对超微结构保持的极高要求。例如，对于需要保持膜脂双分子层完整性的研究，这本书中提到的微波处理参数和时间设置，简直是匪夷所思的“暴力美学”。它强调的是通过快速加热来瞬间凝固组织，却很少深入探讨这种快速热梯度变化对细胞内水分迁移和细胞骨架精细结构可能造成的伪影。我期待能看到关于不同固定液（如戊二醛、多聚甲醛）与微波能量结合的协同效应分析，或者至少是针对不同细胞类型（如神经元、上皮细胞）的优化参数矩阵。但这本书里充斥的更多是关于介电常数和热力学平衡的纯理论探讨，这些在计算机模拟软件中已经得到了更直观、更细致的展示。读完前几章，我得到的结论是，作者似乎更热衷于证明“微波能加热”这一基本物理现象，而不是探索“如何利用微波实现高保真度的生物样品固定”。这使得这本书在应用科学领域显得力不从心，更像是一本上个世纪的物理学讲义的拙劣重述。

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从成本效益的角度来看，这本书的定价与它提供的实际价值严重不符。考虑到其内容的时效性和深度，它更适合作为大学图书馆的参考资料，供那些对微波历史感兴趣的学生偶尔翻阅，而非作为实验室的必备工具书。书中虽然提到了微波固定的优势——速度快、对某些抗原的保留效果好——但对于如何解决由此带来的副作用（例如，潜在的DNA损伤、蛋白质空间构象的改变），探讨得极其肤浅。我本期待看到的是关于优化辐射功率和停留时间的复杂回归分析模型，以便快速建立起“特定组织/特定目标分子”的最佳处理窗口。然而，书中提供的建议大多是“尝试10秒到30秒之间的某个值”，这种模糊性在需要高精度生物学测量的今天，是完全站不住脚的。因此，对于那些希望通过学习这本书来提升实验可靠性和重现性的同行来说，我必须诚恳地建议，将购买这本书的预算投入到更现代的、专注于冷冻技术或快速冷冻替代方案的专著上，那里的信息密度和实用性显然要高出数个数量级。

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这本书的“参考文献”部分也暴露了其固步自封的学术视野。翻阅到书的末尾，我发现引用的文献大多集中在1990年代之前，那些奠定了微波加热理论基础的经典著作自然无可厚非，但缺乏对近二十年来，特别是近十年在纳米技术、冷冻电镜（Cryo-EM）预处理等领域出现的，与快速固定技术相关的突破性进展的引用。这让整本书读起来像是一部停滞在过去的工具书。我尤其关注的是，书中对于“固定均匀性”的讨论，竟然完全没有提及使用微波辅助的灌流固定系统（Perfusion Systems）。现代显微镜技术对样品的3D结构保持要求极高，均匀的渗透和快速的反应是关键。这本书里的方法，无论是浸泡法还是简单的局部加热，都充满了引入热点和梯度不均的风险。读者如果严格按照书中的步骤操作，很可能得到一堆内部结构千奇百怪、无法进行定量分析的样本。它给出的解决方案过于依赖经验式的“摸索”，而非基于现代仪器分析反馈的优化流程，这对于需要发表高水平论文的研究者来说，是无法接受的。

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语言风格的枯燥乏味是这本书最令人难以忍受的特点之一。作者的行文逻辑似乎是“假设读者已经掌握了所有背景知识，现在我们来详细阐述这个次要的细节”。每个章节的过渡都显得生硬且缺乏必要的导读性陈述。在介绍实验步骤时，描述性的语言极少，取而代之的是大量的、缺乏上下文解释的缩写和术语堆砌。例如，书中多次提到“RT-GCD”和“E-Field Patterning”，但从未用清晰的语言解释它们在具体操作中的实际物理意义或如何通过常规设备进行监控。这导致读者在尝试复现实验时，需要不断地查阅其他来源的基础文献来“解码”作者想表达的意思，大大降低了学习效率。这本书与其说是一本指导手册，不如说更像是一份技术规格说明书，冷漠地陈述着一系列操作步骤，完全没有顾及到读者的学习曲线和对知识点之间的逻辑连接的需求。对于需要快速掌握这项技术并应用于日常实验的新手来说，这本书无疑是一堵高耸的学术高墙，令人望而却步。

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这本书的装帧设计简直是灾难，封面那低饱和度的蓝绿色调，配上一种我完全无法辨认的、像是上世纪八十年代教科书里才会用的衬线字体，让人一眼望去就觉得这本厚重的家伙里塞满了晦涩难懂的理论。我本是冲着“微波技术”这个前沿概念来的，期望能看到一些关于快速、高效样品制备的创新思路，毕竟在我的研究领域，时间就是一切。然而，翻开内页，首先映入眼帘的是冗长而缺乏重点的引言，作者似乎花了大篇幅去追溯电磁波在生物组织中相互作用的历史渊源，这部分内容对于已经熟知基础物理学的研究人员来说，简直是时间的浪费。书中对于具体仪器操作的描述也显得极其保守和过时，仿佛所有实验都必须在温度控制极其粗糙的老式微波炉中进行一般，完全没有提及任何现代化的、配备有实时监控和反馈系统的专业设备的应用指南。如果目标读者是刚接触显微镜技术的新手，这书或许能提供一个极度理论化的背景，但对于追求效率和精确度的专业人士而言，它更像是一份博物馆的展品说明，而非实用的操作手册。更糟糕的是，排版上大量使用未加粗的段落标题和密集的公式推导，让人在快速检索关键信息时，眼睛会感到极度的疲劳和困惑，阅读体验可以说是相当糟糕。

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