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出版者:Academic Press

作者:

出品人:

页数:0

译者:

出版时间:2009-10-29

价格:USD 99.95

装帧:Paperback

isbn号码:9780123751492

丛书系列:

图书标签:

• 细胞生物学
• 细胞实验
• 生物学
• 实验技术
• 细胞分析
• 生物化学
• 分子生物学
• 研究方法
• 实验室
• 生命科学

《细胞生物学实验手册》 本书是一本全面介绍细胞生物学领域核心实验技术的实用指南。它旨在为广大研究人员、研究生以及对细胞生物学实验充满兴趣的学习者提供详尽的操作步骤、原理阐释和结果分析方法。本书内容涵盖了从细胞培养、显微成像到分子生物学技术在细胞研究中的应用等多个方面，力求为读者构建一个扎实的实验基础。 核心内容概述： 第一部分：细胞培养与处理 无菌操作与细胞培养基准备： 详细阐述了在无菌条件下进行操作的重要性，并提供了常见细胞培养基的配制方法和质量控制要点。内容将涵盖不同类型细胞（如贴壁细胞、悬浮细胞、原代细胞、细胞系）的培养要求，包括温度、湿度、二氧化碳浓度以及培养基的成分选择。 细胞传代与冻存复苏： 深入讲解了如何安全有效地进行细胞传代，以维持细胞的活性和生长状态。同时，详述了细胞冻存的原理、步骤以及复苏的最佳实践，以最大程度地保存细胞的生物学特性。 细胞计数与活性检测： 介绍多种常用的细胞计数方法，如血细胞计数板法、自动细胞计数仪法，并详细阐述了检测细胞活性的方法，如台盼蓝染色法、MTT/WST法等，以评估细胞的生长状态和受损程度。 细胞分离与纯化： 涵盖了从组织中分离细胞的技术，如酶解法、机械法，以及利用密度梯度离心、荧光激活细胞分选（FACS）等方法进行细胞亚群的分离和纯化。 第二部分：细胞成像与显微观察 光学显微镜技术： 详细介绍各种类型光学显微镜（如明场、相差、微分干涉、荧光显微镜）的工作原理、成像特点及适用范围。重点讲解了细胞形态、结构以及动态过程的观察技巧。 荧光标记与免疫荧光染色： 阐述了利用荧光染料标记细胞内特定分子（如蛋白质、核酸）的原理和技术。详细介绍了免疫荧光染色的一系列步骤，包括抗原修复、一抗二抗孵育、封片和信号检测，以实现对细胞内特定蛋白定位和表达的检测。 共聚焦显微镜与活细胞成像： 深入讲解共聚焦显微镜在提高图像分辨率、减少背景干扰方面的优势，以及活细胞成像技术在观察细胞生理活动、分子动力学过程中的应用。内容将涵盖时间序列成像、三维重构等技术。 电子显微镜基础： 简要介绍透射电子显微镜（TEM）和扫描电子显微镜（SEM）的基本原理和在观察细胞超微结构方面的应用，为读者提供更深层次的细胞结构信息。 第三部分：细胞信号转导与功能分析 酶联免疫吸附测定（ELISA）： 详细介绍ELISA在定量检测细胞培养上清液或裂解液中特定蛋白、激素、细胞因子等生物活性物质中的应用。内容将涵盖不同ELISA类型的操作流程和结果解读。 Western Blotting（蛋白质印迹）： 全面阐述Western Blotting技术在检测细胞内特定蛋白质表达水平、分子量和翻译后修饰方面的原理和操作细节。包括样品制备、SDS-PAGE电泳、转膜、封闭、一抗二抗孵育、显影等关键步骤。 流式细胞术（Flow Cytometry）： 详细介绍流式细胞术在细胞表面和胞内标志物分析、细胞周期检测、细胞凋亡分析、细胞分群等方面的应用。内容将涵盖仪器原理、抗体选择、实验设计及数据分析。 细胞凋亡检测： 详细介绍多种常用的细胞凋亡检测方法，如Annexin V-FITC/PI双染法、TUNEL法、Caspase活性检测等，并阐述其背后的生化机制。 细胞周期分析： 介绍利用流式细胞术结合DNA染料（如PI）分析细胞周期各时期的技术，以及影响细胞周期的因素及其检测方法。 基因沉默与过表达技术： 概述siRNA/shRNA介导的基因沉默技术和载体介导的基因过表达技术在研究基因功能中的应用，并提供相关的实验设计思路。 第四部分：分子生物学技术在细胞研究中的应用 DNA/RNA提取与定量： 详细介绍从细胞中提取高质量DNA和RNA的方法，以及利用紫外分光光度计、核酸荧光染料等进行定量和质量检测的技巧。 RT-PCR与qPCR（实时定量PCR）： 阐述RT-PCR技术用于检测RNA水平的基因表达，以及qPCR技术在精确量化mRNA表达中的应用。内容将涵盖引物设计、反应体系优化和数据分析。 基因克隆与表达载体构建： 简要介绍基因克隆的基本原理和常用方法，以及构建用于细胞功能研究的表达载体的策略。 本书特色： 操作指导性强： 每项实验都附有详细的步骤、注意事项和潜在问题排除方法，确保读者能够独立完成实验。 原理阐释清晰： 对各项技术背后的生物学原理进行深入浅出的解释，帮助读者理解“为什么”这样做。 结果分析与解读： 提供典型实验结果示例，并指导读者如何进行数据分析和结果解读，提高实验的科学性。 涵盖广泛： 囊括了当前细胞生物学研究中最常用、最核心的实验技术，为读者提供一个全面的技术平台。 图文并茂： 适当配以清晰的实验流程图、显微图像和数据图表，便于读者理解和学习。 本书的目标是成为细胞生物学领域研究者们的得力助手，帮助他们高效、准确地开展各类细胞实验，从而在探索生命奥秘的道路上取得更大进展。

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**图书评价四** 这本书在理论深度与广度上的平衡拿捏得极其巧妙。它既没有为了追求深度而变得晦涩难懂，让初学者望而却步；也没有为了追求广度而流于表面，让专业人士感到不屑一顾。它似乎找到了一种奇特的化学反应点，能够同时满足不同知识背景的读者。例如，它在介绍某个复杂信号通路时，会先用简洁的比喻勾勒出宏观图景，随后再层层递进，引入分子机制的细节，最后再巧妙地将这些机制与最新的生物技术应用联系起来。这种“由宏观到微观，再由理论到应用”的递进逻辑，极大地增强了知识的连贯性和内在的逻辑张力，让人在阅读过程中不断产生“原来如此”的豁然开朗之感。

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**图书评价二** 我是在一个非常偶然的机会下接触到这本书的，当时我正在为我的研究生课题寻找一些关于新型细胞分析方法的参考资料。这本书的目录结构清晰得令人惊叹，每一章的标题都精准地指向了某一类核心的技术领域，这使得我能快速定位到我需要的特定信息，极大地提高了我的研究效率。它并没有陷入冗长而空洞的理论叙述，而是直奔主题，用一种近乎手术刀般精确的笔触，剖析了从基础的细胞培养到高级的成像技术等一系列关键环节。对于我这种需要快速将理论转化为实验操作的实践者来说，这种高效的信息组织方式简直是福音，省去了我大量在浩瀚文献中大海捞针的时间。

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**图书评价五** 我尤其欣赏这本书在跨学科视野上的拓展。生命科学领域日新月异，单靠传统的生物学知识已经远远不够。这本书大胆地融入了大量的物理学和工程学的视角来阐释细胞行为，比如，它用流体力学解释了细胞在微流控芯片中的运动模式，或者用光学原理深入分析了不同显微镜技术的成像局限性。这种跨界融合，使得我对“细胞”这个研究对象的理解不再局限于传统的生物化学框架内，而是将其视为一个复杂的、受多种物理规律制约的动态系统。这为我自己的研究思路带来了极大的启发，让我开始思考如何利用更前沿的物理工具来解决生物学上的难题，无疑拓宽了我的学术边界。

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**图书评价三** 这本书的作者显然是一位在实验室一线摸爬滚打了多年的资深专家。从行文的语气中，我能感受到一种罕见的、带着温度的实在感，而不是那种高高在上的学术腔调。书中对实验中可能遇到的“陷阱”和“灰色地带”描述得尤为生动和到位，比如在处理某些敏感细胞系时需要注意的温湿度微调，或是特定标记物染色失败后排查的步骤优先级。这些细节的处理，体现了作者对实际操作中那些恼人细节的深刻理解，这些往往是那些只在理论层面构建知识体系的教材所无法涵盖的。读起来，就像是有一位经验丰富、脾气极好的导师，在我身边一步步指导我完成实验，让人倍感踏实和安心。

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**图书评价一** 这本书的装帧设计简直是一场视觉的盛宴，封面那深邃的蓝色调搭配着精致的细胞结构插图，让人一眼就被那种科学的严谨与艺术的美感所吸引。内页的纸张质地也非常考究，触感温润，即便是长时间阅读也不会感到疲劳。装帧工艺的精湛程度，足以让它在任何书架上都熠熠生辉，仿佛它本身就是一件值得珍藏的艺术品。更值得称赞的是，它的排版布局极为合理，字体大小和行间距的拿捏恰到好处，使得复杂的概念和图表在视觉上得到了极佳的平衡，阅读起来毫不费力，简直是一种享受。这本书的物理存在感，远超一般教科书的范畴，它不仅仅是知识的载体，更是一种对生命科学探索精神的致敬。

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