分子生物学实验方法与技巧

分子生物学实验方法与技巧 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:中山大学
作者:申煌煊 编
出品人:
页数:379
译者:
出版时间:2010-6
价格:49.50元
装帧:
isbn号码:9787306036780
丛书系列:
图书标签:
  • 食品
  • 科研
  • 生物学
  • 参考书
  • PH.D
  • 分子生物学
  • 实验方法
  • 实验技巧
  • 生物技术
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  • DNA提取
  • 蛋白质分析
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具体描述

不同于传统的相关图书,《分子生物学实验方法与技巧》主要介绍编写者们在近20年内进行分子生物学相关实验时,具体所采用的实验方案和技巧,是实用型实验方案的汇集。《分子生物学实验方法与技巧》不求“新”:不追逐目前国际上的研究热点;也不求“全”:不是分子生物学的必备手册;只求“通”和“透”:每个实验均分为概述、实验方案(一套或根据其他条件而定的多套方案)、材料试剂(器皿和试剂等)、相关知识(背景知识、关键因素、时间安排、预期结果、参考文献)等四个方面的内容,力求将每一个实验讲透。无论对于经验丰富的研究者还是初学者,《分子生物学实验方法与技巧》都能给予一定的启迪。

《生命密码:解析DNA的奥秘与分子世界的互动》 在这本引人入胜的书籍中,我们将一同踏上探索生命最基本组成单位——分子的奇妙旅程。我们不再拘泥于实验操作的繁复细节,而是将焦点放在“为何”与“如何”的背后,深入剖析分子生物学所揭示的生命运作的宏大图景。 本书将从一个全新的视角,带领读者领略 DNA 如何储存和传递生命信息,解锁基因表达的精妙调控机制,以及蛋白质如何作为细胞的“勤劳工人”,执行着至关重要的生命活动。我们将深入探究基因组学的前沿进展,理解疾病的分子根源,并展望基因编辑等革命性技术如何重塑我们的未来。 第一部分:生命的蓝图——DNA的结构与功能 DNA的优雅设计: 跳过碱基配对的细节,我们聚焦于 DNA 双螺旋结构为何如此稳定且高效,它如何巧妙地存储着如此庞大的遗传信息。我们将探讨 DNA 复制的精确性,以及这种机制如何确保生命的代代相传。 基因的语言: 了解基因不仅仅是 DNA 片段,更是生命的指令。我们将解析基因是如何被“读取”和“翻译”的,从 DNA 到 RNA,再到蛋白质,这一过程的每一步都充满了精密的调控。我们将深入理解密码子如何构成蛋白质的氨基酸序列,以及这一序列如何决定蛋白质的独特功能。 表观遗传学的调控: 除了 DNA 本身的序列,基因的表达还受到“表观遗传”的微妙影响。我们将揭示 DNA 甲基化、组蛋白修饰等机制如何不改变 DNA 序列,却能深刻影响基因的开启与关闭,从而调控细胞的分化和功能。这就像是给同一本乐谱,通过不同的演奏方式,奏出截然不同的旋律。 第二部分:生命的信使与执行者——RNA与蛋白质 RNA的多重角色: RNA 不仅是 DNA 信息的传递者,更在基因调控、催化反应等多个领域扮演着至关重要的角色。我们将认识 mRNA、tRNA、rRNA,以及那些在基因沉默、RNA 编辑等方面发挥关键作用的小非编码 RNA。 蛋白质的万花筒: 蛋白质是生命活动的直接执行者。本书将深入剖析蛋白质的折叠过程,以及这种复杂的三维结构如何决定其催化活性、信号传导能力、结构支撑作用等。我们将探讨酶的催化机制,感受分子机器的精妙运作。 蛋白质的相互作用网络: 细胞内的生命活动并非孤立进行,而是由庞大的蛋白质相互作用网络驱动。我们将了解蛋白质如何通过结合、识别来协同工作,构建出复杂的信号通路,驱动细胞内的各种过程。 第三部分:解码生命——基因组学与疾病 基因组的完整图景: 随着基因组测序技术的飞速发展,我们得以窥见生命体的全部遗传信息。我们将探讨基因组测序如何帮助我们理解物种的进化,以及个体间的遗传差异。 基因与疾病的关联: 许多疾病的根源在于基因的突变或异常表达。我们将学习如何通过分析基因组数据,识别致病基因,理解癌症、遗传病等疾病的分子机制,为诊断和治疗提供新思路。 个性化医疗的曙光: 基于个体基因组信息的分析,能够实现更精准的疾病风险评估和治疗方案设计。我们将探讨个性化医疗如何利用分子生物学的知识,为每个人量身定制健康管理策略。 第四部分:生命科学的未来——技术革新与伦理思考 基因编辑的魔力: CRISPR-Cas9 等革命性的基因编辑技术,为我们提供了精确修改基因组的强大工具。我们将深入探讨基因编辑的原理,以及其在治疗遗传病、改良农作物、甚至改造生物体等方面的巨大潜力。 合成生物学的新篇章: 合成生物学试图通过设计和构建新的生物部件、设备和系统,甚至重构生物体,来解决现实世界的问题。我们将了解如何利用分子生物学的原理,创造出具有新功能的生命系统。 伦理的边界与责任: 随着分子生物学技术的飞速发展,我们也面临着重要的伦理挑战。本书将引导读者思考基因编辑的伦理界限,生物安全问题,以及如何在科技进步的同时,守护人类的价值观。 《生命密码:解析DNA的奥秘与分子世界的互动》 是一次关于生命本质的深度探索,它将激发你对生物科学的无限好奇,让你看见隐藏在日常生命现象背后的精妙分子逻辑。本书并非一本操作手册,而是一扇窗户,引领你进入一个充满惊喜与可能性的分子宇宙。

作者简介

目录信息

第1章 实验前后的注意事项和行为准则第一部分 DNA相关的操作 第2章 质粒DNA的相关实验 第3章 聚合酶链式反应 第4章 限制性内切酶的特性及应用 第5章 基因组DNA的提取 第6章 分子探针及Southern杂交 第7章 基因组DNA的突变分析第二部分 RNA相关的操作 第8章 RNA的提取和cDNA合成 第9章 寻找差异表达基因方法——SSH法 第10章 全长基因的克隆——SMART技术 第11章 Northern Blot技术 第12章 siRNA的应用 第13章 RNA酶保护实验第三部分 蛋白质相关的操作 第14章 蛋白质分离、鉴定相关技术 第15章 染色质免疫沉淀技术(ChIP) 第16章 蛋白复合体的分离与鉴定 第17章 免疫沉淀 第18章 免疫荧光染色技术第四部分 细胞生物学相关的操作 第19章 外源基因在原核生物中的表达 第20章 外源基因在真核细胞中的表达 第21章 转基因植物 第22章 转基因动物技术 第23章 细胞凋亡的分子生物学检测方法附录 分子生物学实验室安全及注意事项
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读后感

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用户评价

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如果要用一个词来形容这本书,我会选择“贴心”。它不是那种高高在上、只讲理论的书,而是真正站在实验者的角度,去考虑我们可能会遇到的问题,去提供我们需要的帮助。我尤其欣赏书中对于“实验安全”的强调。在许多教科书里,安全问题往往只是寥寥数语带过,但这本书却用了相当大的篇幅,详细介绍了各种化学试剂、生物材料的操作规范,以及如何应对实验过程中可能发生的意外情况,比如化学品灼伤、生物污染等。这让我意识到,在追求科学探索的同时,保障自身和他人的安全是多么重要。我记得有一次,我在进行一个需要使用强酸的实验,虽然我之前也做过类似操作,但读了这本书后,我才更加重视防护措施,比如佩戴专门的防护眼镜、在通风橱中操作,并且准备好中和剂。书中对于“分子生物学常用仪器设备的使用与维护”也给出了非常实用的指导,比如离心机、超低温冰箱、PCR仪等,都详细介绍了它们的工作原理、日常维护方法以及常见故障的排除。这对于我们这些不直接负责设备维护的人来说,非常有帮助,至少能让我们在使用仪器时,更加得心应手,并且能及时发现设备存在的问题,避免更大的损失。这本书就像一位经验丰富的老前辈,把你带进分子生物学实验的世界,不仅教会你“怎么做”,更教你“怎么做得更好,怎么做得更安全”。

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这本书,我可以说是在无数个深夜,伴随着台灯的光辉,一字一句啃下来的。它带给我的,不仅仅是实验技能的提升,更是一种思维方式的启迪。我印象最深刻的是,它在讲解各种实验技术时,都非常注重“实验设计”的理念。比如,在进行基因表达分析时,它不仅仅教你如何设计引物、如何进行RT-PCR,更会强调如何选择合适的对照组、如何进行生物学重复和技术重复,以及如何统计学分析数据。这些对于保证实验结果的科学性和可靠性至关重要,而在此之前,我可能仅仅是按照别人的protocol去做,而没有深入思考过其中的逻辑。书中对“实验误差的来源与控制”也进行了非常详尽的分析,从试剂的纯度,到仪器的校准,再到操作的细节,都给出了非常具体的指导。我记得有一次,我的实验结果总是波动很大,无法重复。当时我非常沮丧,但当我翻到书里关于“实验重复性差的可能原因”那一章节时,我才意识到,原来我忽略了很多细节,比如我使用的移液器每次吸取液体的体积都有微小的差异,而这些微小的差异在累积起来,就导致了最终结果的巨大偏差。通过按照书中的建议,对移液器进行校准,并且严格控制操作过程中的变量,我的实验重复性得到了极大的改善。这本书让我明白了,科学研究的严谨性,体现在每一个细节之中,而分子生物学实验,更是对这种严谨性提出了极高的要求。

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这本书,我断断续续地读了有小半年了,真不是我夸张,每次翻开,都能从中挖出一些新的、以前从未注意到的细节。就拿PCR来说吧,虽然我接触这技术也有几年了,但书中对于模板DNA的提取优化、引物设计的考量、以及不同PCR类型(如RT-PCR, qPCR)的细微差别,都进行了非常深入的阐述。我记得有一次,我的一个实验项目出现了扩增效率低下的问题,急得我焦头烂额。当时翻到书里关于“PCR抑制剂的识别与排除”那一章节,虽然我以前也听说过,但书里详细列举了可能存在的几种抑制剂,比如酚类、某些盐类,甚至血液中的血红蛋白,并且给出了具体的去除策略,比如纯化柱的选择、洗涤液的优化、甚至考虑使用更高级的PCR试剂盒。我就是按照书里的建议,调整了DNA提取的后处理步骤,结果一次就解决了困扰我一周的问题。这种深入浅出的讲解,不仅仅是罗列步骤,更是从原理出发,告诉你为什么这样做,这样做的潜在风险又是什么,以及如何规避。对于我们做实验的人来说,这种“知其然,更知其所以然”的理解,实在是太宝贵了。而且,书中对于实验误差的分析也做得非常细致,从试剂的批次差异,到仪器校准的频率,甚至是操作人员的熟练度,都给予了充分的考虑,这让我意识到,原来一个看似简单的实验,背后隐藏着那么多需要严谨对待的细节。我尤其欣赏的是,书中会引用一些最新的研究成果,来佐证某些实验方法的优势或者局限性,这让我在学习过程中,始终能感受到学术的前沿动态,而不是停留在过时的知识点上。读这本书,就像是请了一位经验丰富、耐心细致的导师,在你身边随时指导,随时答疑解惑。

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说实话,当我拿到这本书的时候,我内心是有些忐忑的。因为分子生物学实验,对我来说,一直是一个充满挑战的领域。那些复杂的仪器、精密的试剂、以及稍有不慎就会前功尽弃的操作,都让我望而却步。然而,《分子生物学实验方法与技巧》这本书,却以一种非常友好的姿态,拉近了我与分子生物学实验的距离。它不仅仅是罗列枯燥的步骤,而是将每一个实验技术都拆解开来,用清晰的语言,配合图示,将复杂的原理和操作流程变得浅显易懂。我尤其喜欢书中对于“为什么”的解释,而不是仅仅告诉你“怎么做”。比如,在介绍细胞培养部分,它会详细解释培养基的成分构成,为什么需要添加血清,以及不同血清对细胞生长的影响。当我遇到细胞生长缓慢或者出现污染的问题时,这本书就成了我的“百科全书”,它会从培养基的pH值、温度、湿度,到培养箱的清洁度,再到血清批次的差异,一一给出可能的解释和解决方案。我记得有一次,我的细胞培养出现了一些奇怪的生长形态,我翻遍了书里关于“细胞形态异常”的章节,最终找到原因可能是培养基中某种生长因子浓度不足。及时调整后,细胞又恢复了正常的生长状态。这本书让我意识到,分子生物学实验的成功,并非依赖于一蹴而就的运气,而是建立在对每一个环节深入理解和严谨操作的基础之上。它不仅仅教会我如何完成实验,更重要的是,它教会我如何思考,如何去分析问题,以及如何去解决问题。

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坦白说,我拿到这本《分子生物学实验方法与技巧》纯属偶然,原本以为会是一本泛泛而谈、充斥着标准流程的教科书,没想到读起来却别有一番风味。最让我惊喜的是,它并没有一味地追求“大全”,而是聚焦于一些核心的、最常用的分子生物学技术,并且在讲解时,非常注重“技巧”二字。举个例子,书中关于DNA/RNA提取的部分,就详细对比了不同提取方法的优劣,比如离心柱法、酚-氯仿抽提法,甚至还提到了磁珠法的原理和适用场景。它不只是告诉你怎么做,更会分析为什么选择某种方法,比如离心柱法方便快捷,但可能对大片段DNA的回收率有影响;而酚-氯仿抽提法虽然耗时,但对于高纯度的DNA/RNA提取效果更佳,尤其适合后续需要进行精密分析的样本。书里还穿插了许多“过来人”的经验之谈,比如如何避免RNA降解,怎么提高RNA提取的产量,以及如何快速判断DNA/RNA的质量和浓度。我记得有一次,我在做RNA提取时,RNA产量总是偏低,而且A260/A280比值也不理想。按照书里的提示,我仔细检查了裂解液是否新鲜,RNase-free的枪头和离心管是否充足,以及在洗涤过程中是否充分洗脱了残留的盐分。通过这些细节的调整,我的RNA提取效果果然有了显著提升。书中对于蛋白质印迹(Western Blotting)的讲解也同样细致,不仅仅是抗体选择、孵育时间这些基本操作,还深入探讨了封闭液的选择对信号强度的影响,以及如何优化显影条件来减少背景噪音,提高检测灵敏度。这本书让我明白了,分子生物学实验的成功,往往就取决于这些看似微不足道的“技巧”和细节的把握。

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这本书,真的是我桌上最常翻阅的“工具书”。它最大的特点在于,它不是一次性的阅读材料,而是在你每一次遇到实验难题时,都能为你提供及时、有效的解决方案。我个人在进行基因表达调控的研究,经常需要用到各种克隆载体、表达质粒,以及进行转染实验。这本书里关于“载体构建与筛选”的部分,简直是我的“宝藏”。它详细介绍了不同类型克隆载体的选择原则,比如真核细胞表达载体、原核细胞表达载体,以及它们的启动子、选择标记等关键元件的功能。我曾经因为选择错误的载体,导致我的基因表达不理想,白白浪费了大量时间和精力。读了这本书之后,我才明白,原来不同的载体有不同的适用范围,选择合适的载体是成功克隆和表达的关键。而且,书中对于“瞬时转染与稳定细胞株的建立”的讲解也极其到位。它对比了多种转染方法,比如脂质体法、电穿孔法、病毒载体法,并且分析了它们各自的优缺点,以及适用场景。我记得有一次,我的瞬时转染效率非常低,几乎检测不到我的报告基因表达。按照书里的建议,我重新优化了转染试剂的用量、DNA与试剂的比例,以及细胞密度,最终成功地提高了转染效率。这本书让我体会到,分子生物学实验的每一个环节,都充满了细节和学问,而掌握这些细节,就是掌握了实验成功的钥匙。

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这本书,简直就是为我这种“小白”量身定制的。我第一次接触分子生物学实验,完全是个门外汉,连基本的实验器材都不熟悉。而这本书,就像一位耐心细致的老师,从最基础的仪器设备介绍起,到各种常用试剂的性质和用途,再到实验前的准备工作,都进行了非常详尽的讲解。我记得有一次,我需要配制一种特殊的缓冲液,手册上只给了简单的配方,但我对各种试剂的称量、溶解过程总是有不确定。当我翻到书中关于“溶液配制与储存”的章节时,它详细介绍了各种常用试剂的性质,比如酸碱度、溶解度,以及配制时的注意事项,比如溶解顺序、加热是否会影响溶解度等。这让我能够更准确、更稳定地配制溶液。书中对“无菌操作”的强调也让我印象深刻,它详细讲解了无菌技术的原理,以及如何通过各种措施,比如酒精灯火焰、超净台、紫外线消毒等,来维持实验环境的无菌状态。我曾经因为无菌操作不到位,导致细胞培养污染,不得不重新开始。读了这本书后,我才真正理解了无菌操作的重要性,并且掌握了正确的方法。这本书让我感觉,分子生物学实验并没有那么可怕,只要掌握了基本原理和操作技巧,并且保持严谨的态度,任何人都可以做好。它不仅仅是传授知识,更是传递一种科学的态度和精神。

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怎么说呢,这本书,更像是一本“实战指南”,而不是一本“理论百科”。它不像那些厚重的教科书,上来就讲一堆复杂的理论公式,而是直击分子生物学实验的核心操作,并且将这些操作的“前因后果”都交代得清清楚楚。我尤其喜欢书中关于“数据分析与结果解读”的部分。在很多情况下,我们实验做得再好,如果不能有效地分析数据,不能准确地解读结果,那也是徒劳。这本书在这方面给了我很大的启发。它不仅仅告诉你如何使用统计软件,更重要的是,它教会你如何选择合适的统计方法,如何判断数据的显著性,以及如何避免常见的统计误区。我记得有一次,我的实验数据出现了一些微妙的差异,我不知道该如何判断这些差异是否具有统计学意义。当我翻到书中关于“t检验、ANOVA等统计方法的应用”的章节时,我才明白了如何根据我的实验设计,选择合适的统计方法,并且对数据进行分析。此外,书中对于“论文写作中的实验部分”的撰写也给出了指导,这对于将实验成果转化为学术论文至关重要。它提醒我,在撰写实验方法部分时,应该尽量详细、清晰地描述每一个操作步骤,并且注明所使用的试剂、仪器以及关键的实验条件。这本书让我认识到,分子生物学实验的价值,不仅仅体现在实验本身,更体现在对实验结果的科学分析和有效传播。

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这本书,怎么说呢,它更像是一本“实用手册”而非“理论宝典”。我个人对理论性的东西有时候会觉得有点枯燥,而这本书恰恰满足了我对实践操作的渴望。它的结构安排非常清晰,每一章都聚焦于一个核心的实验技术,然后层层深入。比如,在讲解基因克隆部分,它不是简单地告诉你“酶切、连接、转化”,而是会详细介绍不同限制性内切酶的选择原则,连接酶的种类和活性,以及连接反应的优化策略,比如不同的连接比例、反应温度和时间。更让我受益匪浅的是,书中对于“常见问题及解决方法”的梳理,简直是实验过程中的“救命稻草”。我记得有一次,我尝试进行一个DNA连接实验,转化菌落数量非常少,而且很多是空的。按照书里描述的“转化效率低”的故障排除,我逐一检查了连接反应的效率、感受态细胞的活力、转化步骤的操作规范,最终发现是感受态细胞的活力下降了。通过更换新鲜的感受态细胞,问题迎刃而解。书中还对各种实验试剂的储存、配制、以及失效的判断都给出了非常实用的建议,这对于保障实验的稳定性和重复性至关重要。我曾经因为试剂保存不当,导致后续实验结果出现很大的偏差,吃了暗亏。读了这本书,我才意识到,原来这些“小细节”对整个实验的成败有着如此大的影响。而且,书中对于一些高通量实验技术的介绍,也让我开了眼界,比如单细胞测序、CRISPR/Cas9基因编辑等,虽然我目前还没有机会接触这些前沿技术,但通过书中的讲解,我对它们的基本原理和应用前景有了初步的认识,这为我今后的学习和研究方向提供了宝贵的参考。

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这本书,我只能说,它对我的实验生涯,起到了“启蒙”的作用。在接触它之前,我对分子生物学实验,一直有一种“神秘感”,觉得那些操作离我很遥远。但这本书,却用一种极其“接地气”的方式,将那些复杂的概念和技术,一一剖析开来,让我看到了一个更加清晰、更加易懂的分子生物学世界。最让我印象深刻的是,它在介绍“核酸纯化”技术时,不仅仅是告诉你如何使用市售的纯化试剂盒,更会深入讲解试剂盒背后的原理,比如硅基膜的吸附原理,以及洗涤液和洗脱液的成分构成和作用。这让我不仅仅是“按部按键”地操作,更能理解为什么这样做,这样做的目的是什么。我记得有一次,我的DNA纯化产物出现了一些杂质,导致后续酶切反应不完全。当我回顾书中的内容时,我才意识到,我可能在洗涤步骤中,没有充分去除盐类杂质,或者洗脱液的pH值不合适。通过调整操作,我得到了更高纯度的DNA。书中对“凝胶电泳”的讲解也同样出色,它不仅介绍了DNA和RNA电泳的原理,还详细阐述了如何根据DNA片段的大小选择合适的琼脂糖浓度,如何优化电泳缓冲液,以及如何解读电泳图谱。我曾经因为电泳条带模糊不清,而无法准确判断PCR产物,导致后续实验出现问题。读了这本书后,我才学会了如何通过优化电泳条件,获得清晰的电泳结果。这本书让我明白,分子生物学实验并非一门玄奥的学科,而是建立在扎实的原理和精细的操作之上。

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很好的分子生物学方面的实验参考书,作者用实际经验面面俱到的说明操作问题!

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