实用免疫学实验技术 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

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出版者:湖北科学技术出版社

作者:吴雄文 编

出品人:

页数:291

译者:

出版时间:2002-1

价格:35.00元

装帧:简裝本

isbn号码:9787535228475

丛书系列:

图书标签:

• 免疫学
• 实验技术
• 生物技术
• 医学
• 生物科学
• 实验室
• 科研
• 方法
• 实用
• 操作

好的，这是一份关于一本名为《实用免疫学实验技术》的图书的详细简介，注意：这份简介将完全聚焦于该书所涵盖的“实用免疫学实验技术”领域，并力求详尽、专业，不涉及其他任何不相关的图书内容。 --- 实用免疫学实验技术：从基础原理到前沿应用的综合指南 导言：实验技术是免疫学研究的基石 免疫学是现代生命科学中最活跃、发展最迅速的领域之一。从基础的细胞信号通路研究，到疾病诊断、疫苗开发乃至肿瘤免疫治疗的前沿探索，无一不依赖于精确、可靠的实验技术。《实用免疫学实验技术》 正是为满足广大科研人员、研究生及临床检验人员对这些核心技术体系化、操作化需求的专业参考书。 本书摒弃了冗长晦涩的理论综述，聚焦于“实用”二字，旨在提供一套清晰、可复现的实验流程、故障排除指南以及技术选择的理论依据。我们深知，在实际的实验室工作中，技术的选择与优化往往决定了实验的成败和研究的深度。 第一部分：免疫学基础实验技术的构建与标准化 本部分为所有后续高级实验打下坚实的基础，强调从样本获取到基础检测的标准化操作。 1. 免疫学样本的获取、处理与保存 成功的实验始于合格的样本。本章详细阐述了不同来源（血液、组织、淋巴器官等）免疫细胞和生物体液样本的规范化采集、分离与处理技术。 外周血单核细胞（PBMC）的分离与纯化： 重点介绍了Ficoll密度梯度离心法的优化参数、流式细胞术级别细胞的洗涤要求，以及细胞活力检测的最佳时机。 组织匀浆与细胞悬液制备： 针对脾脏、淋巴结、胸腺等富含免疫细胞的器官，提供了机械法与酶消化法的结合策略，尤其关注如何最大程度降低细胞损伤和清除碎片干扰。 组织冷冻保存与石蜡包埋（FFPE）技术的适用性分析： 讨论了不同保存方法对后续免疫组化（IHC）和分子检测（如RNA完整性）的影响。 2. 经典细胞学与免疫学功能检测 本部分是理解细胞相互作用和免疫应答活性的核心技术群。 细胞培养与传代技术： 详细描述了各类免疫细胞（T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞等）的无菌培养条件、特异性补剂的配制，以及如何建立稳定、高活性的细胞系和原代培养体系。 细胞增殖与凋亡检测： 涵盖了经典的MTT/CCK-8法、BrdU掺入法、以及更精确的CFSE（羧基荧光素琥珀酰亚胺酯）稀释法，并对比了它们在不同免疫细胞亚群上的应用优劣。同时，详细介绍了Annexin V/PI双染法和Caspase活性检测的操作细则。 细胞因子和趋化因子检测： 重点讲解了酶联免疫吸附测定（ELISA）的Sandwich法全程细节，包括包被、封闭、标准曲线的线性范围校准；并介绍了Luminex多重分析平台的基本原理和数据解读。 第二部分：流式细胞术的深度应用与分析 流式细胞术（FACS）是现代免疫学研究的“显微镜”。本书将该技术提升到精细化操作层面。 3. 多参数流式细胞术的实验设计与抗体选择 抗体选择与染色策略： 深入分析了荧光素（Fluorochrome）的兼容性、补偿（Compensation）原理及其实际操作中的避坑指南。如何设计避免串扰（Spillover）的面板，尤其是针对罕见细胞亚群的染色方案。 细胞表面标志物和胞内细胞因子染色（ICCS）： 详细区分了固定、通透化处理对不同分子（如细胞表面受体、细胞骨架蛋白、胞内磷酸化蛋白）的影响，并提供了针对IFN-$gamma$、IL-2、FoxP3等关键分子的优化通透化方案。 细胞分选（Cell Sorting）的精度控制： 讨论了分选速度、鞘液压力与细胞回收率之间的平衡关系，以及如何通过设限定性（Gating Strategy）保证获得高纯度的目标细胞群体。 第三部分：分子生物学与免疫相互作用研究 从基因表达到蛋白功能，分子技术是解析免疫学机制的“工具箱”。 4. 免疫遗传学与基因表达分析 总RNA提取与cDNA合成优化： 针对低丰度细胞或含有大量抑制剂的样本（如组织），推荐使用特定的裂解液配方，并强调逆转录酶（RT）反应条件的优化，以保证cDNA的质量。 定量实时荧光PCR（qPCR）在免疫应答中的应用： 介绍了绝对定量和相对定量（$DeltaDelta$Ct法）的规范流程，重点展示了如何利用TaqMan探针技术对免疫相关基因（如MHC分子、免疫检查点分子）进行高灵敏度检测。 免疫基因组学技术综述（选读）： 简要介绍了scRNA-seq（单细胞RNA测序）在免疫细胞异质性分析中的地位，以及如何制备高质量的测序文库。 5. 免疫沉淀与互作研究技术 免疫共沉淀（Co-IP）与蛋白质组学关联： 详细阐述了抗体选择、裂解液配方（特别是去污剂的选择，如NP-40 vs Triton X-100）对蛋白质复合物捕获效率的影响。并结合Western Blot技术，展示如何确认目标蛋白的稳定互作。 蛋白质印迹法（Western Blotting）的精细化操作： 专注于低分子量免疫相关蛋白（如激酶、衔接蛋白）的分离电泳条件、转膜的效率控制，以及高灵敏度化学发光系统的应用。 第四部分：免疫技术在疾病模型与临床转化中的应用 本部分将理论技术与实际的生物医学研究场景相结合。 6. 动物模型的免疫学评价技术 体内功能性检测： 介绍了经典的迟发性超敏反应（DTH）模型的操作流程。 移植免疫与移植物抗宿主病（GVHD）评估： 重点讲解了如何通过外周血和靶器官的免疫细胞浸润情况，结合流式或组织学方法，定量评估免疫排斥或耐受状态。 7. 免疫技术在临床前转化中的挑战与应对 同源/异源细胞处理的生物安全性： 强调了生物安全等级（BSL）的要求及相关操作规范。 体外激活与效应分子诱导： 针对CAR-T等细胞治疗的研究，提供了体外刺激T细胞活化、记忆状态维持所需的特定细胞因子鸡尾酒配方及刺激时间点的选择建议。 总结：实验技术的迭代与质量控制 《实用免疫学实验技术》不仅是一本操作手册，更是一本质量控制指南。全书贯穿了“批次间一致性”、“试剂批次依赖性分析”、“阴性/阳性对照设计的严谨性”等核心理念，确保读者能够构建出符合国际标准的可信赖的免疫学实验体系。掌握这些技术，是迈向高水平免疫学研究的必经之路。

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