靶向新基因的分子克隆策略---理论与方法

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出版者:军事医学科学出版社
作者:张学敏 王宜强
出品人:
页数:0
译者:
出版时间:1999-07-01
价格:45.0
装帧:
isbn号码:9787801211705
丛书系列:
图书标签:
  • 克隆
  • 新基因
  • pcr
  • 分子克隆
  • 基因工程
  • 生物技术
  • 遗传学
  • 生物化学
  • 新基因
  • 克隆策略
  • 实验方法
  • 理论研究
  • 生命科学
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具体描述

编辑推荐:本书介绍了有关寻找新基因的分子克隆主要策略和进展,包括理论和技术方法两部分,共七个章节:PCR程序与条件优化;PCR产物的克隆;突变、重组和体外选择;相邻未知DNA的克隆;文库构建与筛选;cDNA分析、克隆在差异和减法技术中的应用;基因家族成员的克隆。理论部分清晰明了,针对性较强,涉及分子克隆的主要方面,帮助读者掌握针对不同基因的分子克隆策略;技术方法部分的内容系统详实,易于操作。本书最

好的,这是一份关于《靶向新基因的分子克隆策略---理论与方法》一书的图书简介,内容详实,且不包含原书的具体内容: --- 书名:分子生物学前沿技术:基因编辑与表达调控新范式 作者:[作者姓名/单位] 出版社:[出版社名称] 出版年份:[出版年份] ISBN:[ISBN号] --- 内容简介: 在当代生命科学研究中,对基因功能进行深入解析是推动生物医学发展与精准治疗策略构建的核心环节。本书《分子生物学前沿技术:基因编辑与表达调控新范式》系统梳理了近年来在分子生物学领域,特别是在基因调控、蛋白质工程以及细胞重编程等方面取得的突破性进展。本书聚焦于那些推动研究范式转变的前沿技术和理论框架,旨在为广大科研工作者、生物技术工程师及高年级学生提供一本兼具深度与广度的参考手册。 本书结构严谨,内容涵盖了从基础理论到尖端应用的多个层面。开篇部分首先回顾了分子生物学经典实验技术的演进历程,为理解更复杂的新兴技术奠定了坚实的理论基础。随后,本书将重点投向了基因组学与转录组学的高分辨率解析方法。例如,书中详细讨论了新一代测序技术(NGS)在全基因组重测序、转录本多样性分析中的应用,特别关注了如何通过生物信息学手段,从海量数据中筛选出具有潜在调控价值的非编码区元件和新型转录起始位点。这部分内容强调了数据驱动型研究在新发现中的决定性作用。 本书的第二大核心板块集中探讨了先进的蛋白质结构解析与功能重构技术。随着冷冻电子显微镜(Cryo-EM)技术的成熟,生物大分子结构研究进入了原子分辨率时代。书中不仅介绍了利用Cryo-EM解析复杂蛋白质机器工作状态的最新案例,还深入探讨了基于人工智能(AI)的蛋白质结构预测模型(如AlphaFold的后续发展)如何加速药物靶点识别的进程。此外,针对蛋白质功能重构,本书细致阐述了体外定向进化与片段化抗体设计的策略,这些技术为开发新型生物制剂和诊断工具提供了可行路径。 第三部分是本书的重头戏,聚焦于细胞命运可塑性与体内精准干预的策略。随着对表观遗传学调控机制理解的加深,如何稳定、高效地改变细胞的生理状态成为研究热点。本书详细分析了不同类型的表观遗传修饰(如DNA甲基化、组蛋白乙酰化)的动态变化过程及其对基因表达的长期影响。在技术层面,书中探讨了新型转染试剂和病毒载体系统的优化,特别是如何克服组织屏障和靶向特异性的挑战,实现体内精准递送。对于细胞治疗领域,本书还收录了最新的多能干细胞诱导分化流程的标准化与规模化方案,为临床转化提供了理论支撑。 第四部分则着眼于系统生物学与合成生物学的前沿交叉。随着对细胞网络复杂性的认识加深,研究人员开始尝试设计全新的生物功能单元。本书介绍了如何运用计算模型来模拟复杂的信号通路,预测基因网络扰动后的稳态变化。在合成生物学方面,书中详尽描述了基于模块化设计的合成基因回路,包括自杀开关、多层级逻辑门电路的构建原理及其在疾病监测和生物传感中的应用潜力。这部分内容对于培养学生构建“可编程”生物系统的能力至关重要。 总而言之,《分子生物学前沿技术:基因编辑与表达调控新范式》并非简单地罗列实验步骤,而是着力于阐述这些前沿技术背后的核心科学思想、方法论的局限性与未来发展趋势。全书图文并茂,案例选择具有代表性和前瞻性,旨在帮助读者在快速迭代的生命科学领域中,构建起一个全面、深刻且具有批判性思维的知识体系。它不仅是实验室技术人员的案头常备书,更是生命科学、生物工程、药物研发等领域研究生的重要参考读物。 ---

作者简介

目录信息

第一章 PCR程序与条件优化
第二章 PCR产物的克隆
第三章 突变、重组和体外选择
第四章 相邻未知DNA的克隆
第五章 文库构建与筛选
第六章 PCR在差异显示和减法技术中的应用
第七章 基因家族成员的克隆
附录1 DNA片段末端内切酶切割效率
附录2 不同物种对密码子使用的偏向性比较
· · · · · · (收起)

读后感

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用户评价

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这本书的书名“靶向新基因的分子克隆策略---理论与方法”让我眼前一亮,因为它精准地契合了当前生物学研究的热点与挑战。随着基因组学和转录组学技术的爆炸式发展,我们发现并鉴定出大量“新基因”,但如何高效、准确地对这些新基因进行分子克隆,并为后续的功能研究奠定基础,却是一个普遍存在的难题。我迫切地希望这本书能够提供一套系统性的解决方案。我期待书中能够详细阐述从“靶向”新基因开始,到最终构建出功能性克隆载体的完整流程。在“靶向”方面,是否会介绍如何利用生物信息学工具从海量数据中筛选有潜力的候选新基因?如何进行基因结构预测,例如找到启动子、编码区、终止子等关键元件?在分子克隆方面,我希望看到对各种主流克隆技术的深入介绍,并重点讨论其在克隆“新基因”时的优劣势和适用性,例如Gibson Assembly、Golden Gate Assembly、TA cloning、Gateway cloning等。更重要的是,针对“新基因”可能存在的序列不确定性、高GC含量、或特殊二级结构等问题,书中是否能提供一些具有创新性的克隆策略和技术诀窍?这本书如果能成为指导我们进行高效新基因分子克隆的“宝典”,那将极大促进我们在未知基因功能研究上的突破。

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我对这本书的期待,很大程度上源于它所承诺的“理论与方法”的结合。在分子生物学领域,理论知识是指导实践的灯塔,而实用的方法则是将理论转化为成果的关键。许多书籍可能只侧重于理论的阐述,或者仅仅罗列操作步骤,但如果能将两者有机地结合起来,形成一套完整的、具有逻辑性的理论指导下的方法论,那将是极具价值的。我希望这本书能够详细解释为什么某种克隆策略是有效的,其背后的分子机理是什么,在不同条件下选择不同方法的原因是什么。例如,在克隆新基因时,可能需要考虑启动子的强弱、基因的表达模式、目标细胞的类型等等,而这些都需要深厚的理论知识作为支撑。同时,我也希望能看到书中提供各种成熟且经过验证的分子克隆方法,比如限制性内切酶/连接酶法、TA克隆、Gateway克隆、Gibson组装等,并详细对比它们的优缺点、适用范围以及操作注意事项。特别是在面对“新基因”这种未知性较强的对象时,可能需要根据其潜在的序列特点(如GC含量、是否存在特殊酶切位点等)来选择最合适的方法。这本书如果能提供这些层面的深入解析,将极大地提升读者的解决实际问题的能力,使我们能够自信地应对各种复杂的分子克隆挑战,从而更有效地推进我们对新基因功能的探索。

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这本书,尽管我还没来得及细读,但光是书名就足以让我燃起巨大的阅读热情。“靶向新基因的分子克隆策略——理论与方法”,这几个字精准地击中了当前生命科学研究的核心痛点。在基因组学、转录组学、蛋白质组学飞速发展的今天,识别和功能注释新基因的工作量是前所未有的。然而,仅仅知道一个新基因的存在是远远不够的,我们更需要的是深入理解它的功能,而分子克隆无疑是实现这一目标最直接、最有效,也是最基础的手段之一。这本书显然不是泛泛而谈,它承诺提供“策略”和“方法”,这意味着它将深入探讨如何高效、精准地锁定目标新基因,并将其插入到合适的载体中,为后续的功能验证奠定坚实的基础。我尤其期待书中能够详细阐述在面对海量基因组数据时,如何设计合理的分子克隆策略,例如如何考虑启动子、增强子、UTR序列的选取,如何平衡载体的稳定性与表达效率,以及如何针对不同研究目的(如过表达、敲低、基因编辑等)优化克隆流程。这本书的出现,对于所有致力于基因功能研究的科研人员,无论是博士生、博士后还是资深研究员,都将是宝贵的资源,能够帮助我们避免在摸索中浪费宝贵的时间和精力,从而加速科研进程。我预感这本书会成为我实验室抽屉里必备的参考书之一,在未来无数次的分子克隆实验中,都能从中获得灵感和指导。

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这本书的书名“靶向新基因的分子克隆策略---理论与方法”精准地击中了当前生命科学研究的一个重要方向。随着高通量测序技术的飞速发展,我们对基因组的认识正以前所未有的速度扩展,发现大量“新基因”已成为常态。然而,这些新基因的功能解析往往是研究的难点和瓶颈,而分子克隆则是深入研究其功能最直接、最关键的手段。我期望这本书能够系统地梳理和介绍针对这些“新基因”的分子克隆策略。这不仅仅是简单的实验技术指导,更是一种解决问题的思维方式。我希望书中能够详细阐述如何从海量数据中“靶向”出有价值的新基因,例如如何利用生物信息学工具进行基因预测、序列比对、功能注释等。在克隆方面,我期待书中能提供各种成熟且高效的克隆方法,并重点讨论如何在面对序列不确定性、高GC含量、启动子识别困难等“新基因”特有的挑战时,选择和优化克隆策略。例如,是否会有针对非编码RNA的特异性克隆方法?如何设计引物才能最大程度地提高克隆成功率?书中对于载体构建、表达调控等方面的详细论述,将对我非常有帮助,能够指导我更有效地进行后续的基因功能验证实验,从而加速科研进程。

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作为一名长期在一线从事分子生物学实验的研究者,我对“分子克隆策略”这个话题有着天然的敏感性。我们都知道,分子克隆看似简单,但其中的细节和考量却非常多,直接关系到实验的成败和后续研究的效率。这本书的出现,无疑为我们提供了一个系统梳理和提升分子克隆技能的机会。我特别看重书中可能提到的“策略”部分,这不仅仅是简单的技术操作,更是一种思维模式的构建。例如,在克隆一个复杂或潜在不稳定的基因时,如何选择合适的载体系统,如何设计最优化的插入片段,如何考虑启动子的选择以保证在特定细胞类型或条件下获得理想的表达水平,这些都需要深思熟虑的策略。我期待书中能分享一些“秘诀”或者“最佳实践”,例如关于如何处理GC含量高的基因,如何避免酶切位点与载体发生交叉反应,或者如何在同一载体中进行多基因的共表达克隆。此外,针对“新基因”的克隆,可能还会面临序列信息不全、预测功能不明确等挑战,书中是否能提供一些应对这些情况的特殊策略,例如基于同源序列的保守区域设计引物,或者利用特定技术(如长读长测序辅助基因合成)来克服序列不确定性,这些都将是令我兴奋的内容。

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我对这本书的期待,很大程度上集中在它所能提供的“理论与方法”的深度和实用性上。在分子生物学领域,理论指导是必不可少的,但如果缺乏实操性的方法,理论就无法落地。我希望这本书能够详细阐述“靶向新基因”这一过程的理论基础,例如,在新基因鉴定过程中,需要考虑哪些生物信息学分析方法,如何从海量的测序数据中筛选出具有研究价值的新基因。接着,在分子克隆阶段,我希望看到对各种主流克隆技术的深入剖析,不仅仅是操作步骤的罗列,更要解释其背后的原理、优势、劣势以及适用场景。例如,在克隆一个具有复杂调控元件的新基因时,是使用限制性内切酶/连接酶法,还是更高效的Gibson Assembly或者Golden Gate Assembly?书中是否会针对不同类型的新基因(如长非编码RNA、新型蛋白编码基因)提供不同的克隆策略?我尤其感兴趣的是,当新基因序列信息不完整或存在大量未知区域时,该如何进行有效的分子克隆?这本书如果能提供一系列的“解决方案”,帮助我们规避常见的实验陷阱,提高克隆的成功率,那么它将成为每一位分子生物学研究者的案头必备。

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这本书的书名让我充满了好奇,因为“分子克隆”是一个核心技能,但“靶向新基因”却指向了科研的前沿。在我的研究经历中,常常会遇到一些新发现的转录本或者蛋白质,但它们的具体功能和调控机制仍然是未知的。而要深入研究这些“新”基因,分子克隆是必不可少的入门步骤。这本书如果能够提供一套系统、可操作的“策略”,来指导我们如何高效、准确地克隆这些新基因,那将是莫大的福音。我期待书中能够详细阐述从初步鉴定到最终成功克隆的整个流程,包括如何利用生物信息学工具预测基因的开放阅读框(ORF)、启动子、信号肽等关键区域,如何设计具有特异性的PCR引物,以及如何选择合适的克隆方法(如 Gibson Assembly, Golden Gate Assembly, Gateway cloning 等)来构建表达载体。更重要的是,对于“新基因”而言,可能其序列信息并不完整,或者存在特殊的结构,这本书是否能提供一些针对这些挑战的解决方案,例如如何利用基因合成技术来获得完整的基因序列,或者如何处理基因中的高GC含量区域,如何规避潜在的次生结构等等。总而言之,我希望这本书能成为一本实用的“分子克隆百科全书”,帮助我们突破新基因研究的瓶颈。

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我对这本书的兴趣,源于它对“策略”二字的强调。在生命科学研究中,尤其是在分子克隆这样技术性要求很强的领域,有效的策略能够事半功倍。面对“新基因”这一相对未知的研究对象,其序列可能不完整,其功能区域(如启动子、编码区)的定位也可能充满挑战。因此,一套能够指导我们如何“靶向”并克隆这些新基因的“策略”至关重要。我希望这本书能够提供系统性的指导,从基因的初步筛选,到生物信息学分析,再到分子克隆方法的选择与优化,形成一个完整的思路框架。例如,在选择克隆方法时,书中是否会考虑不同载体系统(如真核表达载体、原核表达载体、病毒载体)的适用性?如何设计能够稳定表达并有效验证新基因功能的载体?对于新基因,我们可能需要同时克隆其不同变异体,或者进行基因编辑,书中是否会提供相应的多克隆策略或基因编辑相关的分子克隆方法?我期待这本书能够不仅仅停留在技术的层面,而是上升到策略和思维的高度,帮助读者建立起一套独立思考和解决问题的能力,从而在面对各种复杂的分子克隆任务时,都能游刃有余。

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我对这本书的期待,很大程度上源于“策略”二字所蕴含的深度。在分子生物学研究中,分子克隆并非简单的技术操作,而是一项需要周密计划和策略的系统工程,尤其是在面对“新基因”这个未知变量时。我希望这本书能够超越单纯的技术罗列,深入探讨如何制定“靶向新基因”的分子克隆策略。这可能包括如何基于基因组学、转录组学数据进行前期的基因筛选和信息挖掘,如何利用生物信息学工具预测潜在的启动子、增强子、编码区等调控元件,以及如何根据这些信息来设计克隆方案。在具体克隆方法方面,我希望书中能详细比较各种常用技术(如限制性酶切-连接、TA克隆、Gateway克隆、Gibson组装等)的优缺点,并重点分析它们在克隆“新基因”时的适用性,比如如何选择合适的载体、如何优化引物设计、如何处理基因的高GC含量或特殊序列区域。对于“新基因”而言,可能其序列信息并不完整,或者存在未知的调控元件,这本书是否能提供一些应对这些挑战的创新性策略,例如利用基因合成技术、长读长测序辅助设计,或者结合CRISPR-Cas9等技术进行基因敲入的分子克隆思路?我期待这本书能够帮助我们建立起一套灵活、高效、具有前瞻性的分子克隆思维模式,从而在探索新基因功能的道路上走得更远、更稳。

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这本书的书名,尤其是“靶向新基因”这几个字,让我联想到目前基因组学研究中遇到的一个普遍难题:海量的非编码区新基因的鉴定与功能解析。我们已经有了大量的全基因组测序数据,也从中发现了许多先前未知的转录本或潜在编码区,但如何才能在浩瀚的数据中“靶向”出那些真正具有生物学意义的新基因,并针对性地进行分子克隆,这本身就是一项系统性的工程。我非常期待书中能够提供一些关于如何进行“靶向”的策略。这可能包括如何从大量的转录组数据中筛选出有潜力的候选新基因,如何利用生物信息学工具预测其可能的编码区、启动子、以及其他调控元件,甚至是如何结合表观遗传学数据来辅助定位。一旦确定了目标新基因,接下来就是高效的分子克隆。我希望书中能详细介绍针对这些“新”基因的克隆方法,比如如何设计引物,如何在没有成熟参考序列的情况下进行基因的合成或扩增,以及如何构建能够稳定表达这些新基因的载体。这本书如果能帮助我们建立起从海量数据到单一个体新基因的精确“靶向”和高效“克隆”的完整流程,那将是前所未有的贡献,能够极大地推动我们对基因组的认知边界。

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