Praparat. Gelchoromato - Grahie an Sephadex Lh-20

Praparat. Gelchoromato - Grahie an Sephadex Lh-20 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:Wiley-VCH
作者:H. Henke
出品人:
页数:0
译者:
出版时间:1999-10-18
价格:0
装帧:Hardcover
isbn号码:9783527297054
丛书系列:
图书标签:
  • 色谱法
  • 凝胶过滤
  • Sephadex LH-20
  • 生物化学
  • 分离技术
  • 蛋白质
  • 多肽
  • 药物分析
  • 层析
  • 实验方法
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具体描述

《色谱纯化:Sephadex LH-20 凝胶色谱法在化学分离中的应用》 内容概要 本书是一本专注于色谱分离技术的专著,深入探讨了Sephadex LH-20凝胶色谱法在各类化学物质纯化中的应用。从基础理论到实际操作,再到案例分析,本书旨在为化学、生物化学、药学、天然产物化学等领域的科研人员和技术人员提供一套系统、全面的Sephadex LH-20凝胶色谱操作指南和理论框架。 第一部分:色谱纯化理论基础 色谱法的基本原理: 分离机理: 详细阐述了色谱法基于组分在固定相和流动相之间分配系数差异而实现分离的根本原理。介绍吸附、分配、离子交换、尺寸排阻等多种分离模式,并着重解释Sephadex LH-20所采用的尺寸排阻原理。 色谱参数: 讲解了影响色谱分离效果的关键参数,包括: 保留时间 (tR): 指示特定组分通过色谱柱所需的时间,是鉴定和定量分析的基础。 死时间 (t0): 流动相完全通过色谱柱所需的时间,是计算其他色谱参数的基准。 峰容量 (n): 衡量色谱柱分离效率的指标,峰容量越大,分离能力越强。 分离度 (Rs): 评价相邻两组分分离程度的指标,Rs值越高,分离效果越好。 理论塔板数 (N): 反映固定相均匀性和流动相扩散程度的指标,N值越高,柱效越高。 半峰高处塔板高度 (H): N的倒数,H值越小,柱效越高。 分配系数 (K): 组分在固定相与流动相之间平衡时的分配比例,是决定分离效果的核心因素。 色谱分离过程的动力学: 阐述了传质、传热、扩散等因素对色谱峰展宽的影响,以及范第姆特方程(Van Deemter equation)在解释和优化色谱柱效中的作用。 Sephadex LH-20 凝胶色谱法详解: Sephadex LH-20 的特性: 化学结构与性质: 详细介绍Sephadex LH-20是以交联的葡聚糖(dextran)为基础,并引入疏水性基团(羟丙基)而制备的多孔凝胶。阐述其亲水性骨架与疏水性侧链的协同作用,赋予其独特的吸附与尺寸排阻双重性质。 颗粒尺寸与孔径分布: 讨论Sephadex LH-20不同规格(如LH-20, LH-60等,虽然本书主要聚焦LH-20,但可提及相关系列)的颗粒尺寸范围、平均孔径以及孔径分布对分离性能的影响。 溶胀特性: 详述Sephadex LH-20在不同溶剂(水、有机溶剂、混合溶剂)中的溶胀行为,以及溶胀度与分离范围的关系。 物理稳定性与化学稳定性: 评估Sephadex LH-20在不同pH、温度和有机溶剂条件下的稳定性,指导用户选择合适的溶剂体系。 尺寸排阻色谱 (SEC) 原理在 Sephadex LH-20 中的应用: 分子筛效应: 详细解释Sephadex LH-20的孔隙结构如何根据分子大小实现分离。大分子无法进入大部分孔道,优先流出;小分子则可以进入孔道,在柱中停留时间更长,后流出。 分子量分离范围: 明确Sephadex LH-20在不同溶剂体系下可有效分离的分子量范围,通常适用于分离中低分子量的化合物。 吸附作用在 Sephadex LH-20 中的补充贡献: 疏水相互作用: 解释Sephadex LH-20表面的疏水基团如何与样品中的疏水性组分发生短暂的疏水相互作用,从而在尺寸排阻的基础上增加一层分离维度。这种作用通常在有机溶剂中更为显著,可以帮助分离具有相似大小但疏水性不同的分子。 氢键作用: 提及Sephadex LH-20的羟基可能与样品中的极性基团发生氢键作用,尽管这种作用相对较弱,但仍可能对分离产生细微影响。 Sephadex LH-20 作为“混合模式”色谱填料的独特性: 强调Sephadex LH-20并非纯粹的尺寸排阻填料,其吸附能力使其在分离天然产物、多肽、核酸片段以及小分子药物等复杂混合物时,比单纯的SEC填料更具优势。 第二部分:Sephadex LH-20 凝胶色谱法的实际操作 色谱柱的准备与装填: 填料的预处理: 详细说明Sephadex LH-20在使用前需要进行的溶胀处理,包括选择合适的溶剂、溶胀时间、去除未溶胀颗粒等步骤。 色谱柱的选择: 推荐不同尺寸和材质的色谱柱(玻璃柱、不锈钢柱)及其适用场景。 装填技术: 分步指导用户如何将溶胀好的Sephadex LH-20填料均匀、无气泡地装填入柱管。强调“湿法装填”技术的重要性,以获得高效率的色谱柱。 柱床的平衡与稳定: 讲解如何用流动相充分冲洗色谱柱,直到柱床稳定、基线平稳,为样品分析做好准备。 流动相的选择与优化: 流动相的组成: 讨论常用的流动相体系,包括水、乙醇、甲醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯等单溶剂或混合溶剂。 溶剂选择原则: 依据目标化合物的极性、溶解度以及Sephadex LH-20的溶胀特性,指导用户选择合适的流动相。例如,对于极性较强的化合物,可能需要较高的水相比例;对于疏水性化合物,则可能需要更高的有机溶剂比例。 流动相的优化策略: 介绍如何通过调整溶剂比例、添加少量调节剂(如酸、碱、盐)来优化分离效果,实现目标化合物的良好分离。 样品的前处理与上样: 样品溶解: 强调选择合适的溶剂溶解样品,确保样品完全溶解且与流动相兼容,避免析出或沉淀。 样品浓度: 讨论合适的样品浓度,过高或过低的浓度都会影响分离效果。 样品体积: 指导用户根据色谱柱尺寸和分离需求,确定合适的样品加载体积,避免过载。 上样方式: 介绍注射器进样、样品环进样等常用上样方式,并强调操作的准确性和避免气泡的产生。 色谱运行与检测: 流速的控制: 讨论流速对分离效率和分析时间的影响。一般而言,较低的流速有利于提高分离度,但会延长分析时间。 温度的控制: 阐述温度对Sephadex LH-20溶胀度和分离行为的影响,建议在恒定的温度下进行分离。 检测器的选择: 介绍常用的检测器,如紫外-可见吸收检测器 (UV-Vis detector)、示差折光检测器 (RID) 等,并分析其适用性。 馏分收集: 讲解如何根据洗脱曲线(峰形、保留时间)和实时检测信号,准确收集目标组分的馏分。 数据分析与结果解读: 洗脱曲线的分析: 学习解读UV-Vis检测器产生的洗脱曲线,识别出各个组分的洗脱峰。 定性与定量分析: 结合保留时间、峰高等色谱参数,以及与标准品比较,进行化合物的定性分析。通过峰面积或峰高,进行定量分析。 谱图解析: 结合其他谱学信息(如质谱、核磁共振谱)对分离得到的组分进行结构确证。 第三部分:Sephadex LH-20 凝胶色谱法的应用实例 本书将提供一系列来自不同领域的典型应用案例,展示Sephadex LH-20凝胶色谱法在实际研究中的强大能力。 天然产物化学: 植物提取物的分离: 介绍如何利用Sephadex LH-20分离植物中具有复杂结构的黄酮类、萜类、酚类化合物,以及生物碱等。举例说明如何通过调整溶剂体系,有效分离具有相似结构但极性或疏水性微小差异的化合物。 海洋生物活性物质的纯化: 展示Sephadex LH-20在海洋微生物或无脊椎动物提取物中分离具有潜在药用价值的小分子活性物质的成功案例。 真菌次级代谢产物的研究: 阐述Sephadex LH-20在鉴定和纯化真菌产生的新型抗生素、免疫抑制剂等方面的应用。 药学与药物化学: 药物分子的纯化: 介绍Sephadex LH-20在合成药物中间体或最终药物分子的纯化过程中,去除杂质、提高产品纯度的应用。 药物代谢产物的分离: 展示如何利用Sephadex LH-20分离体内药物代谢产物,以研究药物的代谢途径和药代动力学。 中药成分的有效分离: 探讨Sephadex LH-20在复杂中药体系中,分离具有特定药理活性的单一成分或有效成分组合的应用。 生物化学与分子生物学: 蛋白质与多肽的分离: 尽管Sephadex LH-20主要适用于小分子,但在特定条件下,也可用于分离较小的蛋白质片段、肽段或短链核酸。阐述其在蛋白质水解产物分析中的作用。 寡糖和多糖的分级: 介绍Sephadex LH-20在分离不同分子量范围的寡糖和多糖方面的应用,例如在碳水化合物化学研究中的价值。 其他相关领域: 环境化学: 分离和检测环境样品中的有机污染物。 食品科学: 分离食品中的添加剂、色素、风味物质等。 第四部分:Sephadex LH-20 凝胶色谱法的故障排除与维护 常见问题及解决方案: 峰展宽或拖尾: 分析原因(如样品过载、柱床不均匀、流动相选择不当、柱子老化等)并提供相应的解决办法。 分离度下降: 探讨可能的原因(如填料老化、柱子污染、操作参数不当等)并给出处理建议。 基线不稳: 分析可能原因(如流动相问题、温度波动、检测器故障等)并提供排除方法。 柱子堵塞: 给出柱子堵塞的预防措施和清洗方法。 色谱柱的维护与再生: 日常清洗: 介绍色谱柱的日常清洗步骤,以去除残留的样品和杂质,延长柱子寿命。 深度清洗与再生: 阐述使用特定溶剂体系对色谱柱进行深度清洗和再生,恢复其分离性能。 柱子存储: 指导用户正确的色谱柱存储方法,防止柱子老化或损坏。 结论 《色谱纯化:Sephadex LH-20 凝胶色谱法在化学分离中的应用》一书,通过对Sephadex LH-20凝胶色谱法进行全面而深入的阐述,不仅为读者提供了坚实的理论基础,更通过详实的实践指导和丰富的应用案例,帮助读者掌握这项关键的分离技术,从而在各自的研究领域取得突破。本书是所有从事化学分离工作的研究人员和技术人员不可或缺的参考工具。

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我的阅读感受可以用“酣畅淋漓”来形容。这本书的对话部分尤其精彩,简直可以拿来当做教科书般的范例。那些台词,不是简单的信息传递,而是角色性格和他们之间权力关系的精准展现。很多时候,角色们没有把话说透,但仅仅是通过语气、停顿和那些未说出口的潜台词,你就已经完全明白了他们内心翻江倒海的情绪。作者对白描的运用也达到了化境,寥寥数语就能勾勒出一个场景的氛围,无论是喧嚣的街头还是寂静的深夜,那种画面感都极其强烈,仿佛我正站在那里,呼吸着那个环境中的空气。它成功地将读者从旁观者的位置拉到了体验者的角度,让情感的共鸣变得自然而然、水到渠成。这种沉浸式的写作手法,极大地增强了故事的张力,让读者在不知不觉中,就被故事的情绪所裹挟着向前奔跑。读完后,我感觉自己的情感词汇量都得到了极大的扩充,对人与人之间微妙的交流方式有了更深的理解。

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坦白说,我刚拿到这本书的时候,并没有抱太大的期望,毕竟市面上同类的作品实在太多了,很难有让人眼前一亮的。然而,这本书彻底颠覆了我的固有印象。它的文字风格非常大胆和前卫,不同于那种矫揉造作的华丽辞藻堆砌,而是用一种近乎冷峻的笔触,勾勒出复杂的人性图景。我尤其欣赏作者在处理叙事视角上的技巧,时不时地跳跃和穿插,让读者始终保持一种探索和解谜的状态,永远在试图拼凑出事件的全貌。这种处理方式,极大地增加了阅读的挑战性,但也带来了无与伦比的成就感——每当成功解读了作者埋下的伏笔时,那种满足感是无可替代的。更难能可贵的是,尽管主题可能略显沉重,但作者总能在绝望中找到一丝微弱却坚韧的光亮,使得整部作品在深刻之余,又不至于让人完全沉溺于阴郁。它像一剂强心针,在你感到迷茫时,给予你重新审视和坚定的力量。这本书绝对不是那种可以轻松“扫读”的作品,它要求你全身心地投入,用你的思考去参与到故事的构建中。

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这本书真是让我爱不释手,那种深入骨髓的吸引力,让你一旦翻开就难以放下。作者的叙事功力简直是炉火纯青,每一个字都像精心雕琢的宝石,散发着独特的光芒。故事的脉络清晰却又充满变数,每一次情节的转折都出乎意料,却又在回味之后觉得合乎情理,仿佛一切都在作者的掌控之中,只是在等待着合适的时机揭晓谜底。人物的塑造更是达到了令人拍案叫绝的地步,他们不再是扁平的符号,而是活生生、有血有肉的个体,他们的挣扎、他们的喜悦、他们的痛苦,都真切地印刻在读者的心头。我甚至能感受到主角内心的纠结与挣扎,仿佛自己就是那个身处困境中的人,替他们感到焦灼,也为他们的每一次小小的胜利而欢欣鼓舞。这本书的节奏把握得恰到好处,时而紧张到让人屏住呼吸,时而又舒缓得让人有时间去细细品味那些细腻的情感描写。读完之后,那种意犹未尽的感觉久久不能散去,它在我脑海中留下的回响,是如此的悠长而深刻,让我开始反思生活中的许多方面。我强烈推荐给所有热爱深度阅读、追求文学享受的同好们,相信这本书会给你们带来一次非同凡响的阅读体验。

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这本书带给我的震撼是持久而深远的,它成功地触及了我内心深处那些关于存在和意义的终极追问。它没有提供简单的答案,反而提出了更尖锐、更复杂的问题,迫使我们直面自身的局限和世界的荒谬。作者在探讨宏大主题时,处理得极其克制和精准,从不流于空泛的说教,而是通过具体人物的命运和选择来展现哲思。我特别喜欢它对“选择”这个主题的处理,展示了每一个决定背后沉重的代价和无法挽回的后果。这种对人性复杂性的深刻洞察,让我对书中的每一个角色都产生了复杂的情感——既同情他们的遭遇,又理解他们行为的必然性。这本书无疑是一次对心智的磨砺,它要求读者付出努力去理解那些晦涩的隐喻和象征,但最终的回报是巨大的。它不是一本轻松的消遣读物,而更像是一次精神上的朝圣之旅,走完之后,你会带着一种被洗礼过后的清明感。

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这本书的结构精巧得像一座复杂的机械装置,每一个齿轮、每一个弹簧都严丝合缝地咬合在一起,驱动着整个故事向前运转。我花了相当长的时间来理解作者是如何将如此庞杂的线索编织得如此天衣无缝的。它不仅仅是在讲述一个故事,更像是在构建一个完整的世界观,充满了自洽的逻辑和内在的法则。读这本书,与其说是阅读,不如说更像是一场智力上的探险。我不得不时常停下来,回去翻阅前几章,重新梳理人物关系和时间线索,因为作者埋藏的信息点实在太密集了。这种细致入微的布局,体现了作者非凡的耐心和对细节的极致追求。对于那些喜欢深度分析、热衷于寻找隐藏意义的读者来说,这本书无疑是天堂。它绝不会轻易满足你对外在情节的期待,而是更侧重于内在精神世界的挖掘和哲学层面的探讨。每一次重读,我都能发现一些之前错过的微妙暗示,这使得它的重读价值极高,每一次都能带来新的感悟。

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