生物医学机能实验与研究

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出版者:
作者:肖德生
出品人:
页数:491
译者:
出版时间:2003-4
价格:40.00元
装帧:
isbn号码:9787117054706
丛书系列:
图书标签:
  • 生物医学工程
  • 生理学
  • 实验教学
  • 医学研究
  • 生命科学
  • 仪器设备
  • 数据分析
  • 科研方法
  • 医学实验
  • 生物传感器
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具体描述

《实验室技术精要:从基础到前沿》 本书是一本面向生命科学、医学及相关领域研究人员和学生的实验技术指南,旨在系统性地梳理和讲解当前实验室常用的关键技术方法,帮助读者建立扎实的实验操作基础,并为深入开展科学研究奠定坚实的技术保障。本书内容涵盖了从基础的样品制备、溶液配制,到核心的分子生物学技术、细胞培养与分析,再到日益重要的成像技术和生物信息学初步应用,力求全面而详实地展现现代生物医学研究的实验图景。 第一部分:实验准备与基础操作 本部分将首先强调实验室安全的重要性,详细介绍各类安全防护措施、化学品管理和废弃物处理规范,确保读者在安全的环境下开展实验。随后,本书将系统阐述实验设计的基本原则,包括对照组的设置、样本量的计算、变量的控制等,强调严谨的实验设计是获得可靠结果的前提。 在溶液配制方面,本书将从原理出发,讲解如何准确计算和配制各种浓度的缓冲液、试剂等,并介绍常用的量具和称量工具的使用方法,例如刻度移液管、移液枪、分析天平的操作技巧,以及如何进行准确的体积和质量测量。同时,还将详细介绍不同类型蒸馏水的选择和使用,以及如何避免溶液污染。 样品制备是后续实验的基石。本书将深入讲解动植物组织、微生物、体液(血液、尿液、血清等)等不同类型样品的采集、保存和预处理方法。例如,针对不同组织,会介绍匀浆、裂解、酶消化等技术;对于微生物,会讲解梯度稀释、涂布、浓缩等方法;对于体液,则会涵盖离心、沉淀、过滤等分离技术,以及如何防止样品降解和污染。 第二部分:分子生物学核心技术 分子生物学技术是现代生命科学研究的基石,本书将聚焦于其中最核心、最常用的技术。 核酸提取与纯化: 详细介绍不同试剂盒和手动提取方法,涵盖基因组DNA、质粒DNA、RNA(总RNA、mRNA、miRNA)的提取。讲解关键步骤如裂解、蛋白酶K消化、酚-氯仿抽提、硅胶柱吸附等原理及操作要点,并讨论影响提取效率和纯度的因素,如样本类型、保存条件、裂解时间等。同时,会介绍核酸的定量(如Nanodrop、Qubit)和质检(如琼脂糖凝胶电泳)方法。 PCR及其衍生技术: 深入剖析聚合酶链式反应(PCR)的原理,包括DNA聚合酶、引物、dNTPs、缓冲液的作用。详细讲解普通PCR、定量PCR(qPCR,包括SYBR Green法和TaqMan探针法)、逆转录PCR(RT-PCR)、以及多重PCR等技术。指导读者如何设计引物、优化PCR反应条件(如退火温度、循环次数、Mg2+浓度),并分析PCR结果的判读与常见问题排除。 基因克隆与表达: 介绍基因克隆的基本流程,包括限制性内切酶消化、连接酶催化、载体构建等。讲解不同类型的表达载体(原核、真核)的选择及其特点。详细介绍转化(感受态细胞制备、热激或电转化)和筛选(抗生素筛选、蓝白斑筛选)技术。同时,将简要介绍基因编辑技术(如CRISPR-Cas9)的基本原理和应用前景。 蛋白质研究技术: 详细讲解蛋白质提取与裂解方法,强调不同细胞和组织中蛋白质的溶解性差异。重点介绍SDS-PAGE凝胶电泳的分离原理、胶的制备、电泳过程的控制以及结果的分析。深入讲解Western Blotting技术,包括抗原的转移(湿转、半干转)、封闭、一抗和二抗的孵育、显色检测等关键步骤,并指导如何选择合适的抗体和优化条件。此外,还将介绍ELISA(酶联免疫吸附测定)的基本原理和操作流程,用于定量检测蛋白质。 第三部分:细胞生物学与成像技术 本部分将聚焦于细胞培养、分析以及现代成像技术的应用。 细胞培养与传代: 详细介绍无菌操作技术,包括超净工作台的使用、器皿的灭菌、培养基的配制与过滤。讲解不同类型细胞(贴壁细胞、悬浮细胞)的培养方法,包括培养基的选择(DMEM、RPMI等)、血清的添加、CO2培养箱的使用。详细指导细胞的传代(消化、计数、接种)和冻存复苏技术,并强调如何监测细胞的生长状态和避免污染。 细胞活性与凋亡检测: 介绍常用的细胞活性检测方法,如MTT、CCK-8等,讲解其原理和操作流程。深入讲解细胞凋亡的检测技术,包括Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术、TUNEL染色、Caspase活性检测等,并指导结果的判读。 显微成像技术: 介绍各种显微镜的基本原理和应用,包括光学显微镜(明场、相差、荧光)、共聚焦显微镜。详细讲解荧光显微镜的操作要点,包括荧光染料的选择、激发与发射波长、滤光片组的使用。介绍图像的采集、处理与分析,如细胞计数、形态学分析、荧光强度定量等。 第四部分:生物信息学初步与数据分析 随着组学技术的蓬勃发展,生物信息学工具在实验研究中的应用日益重要。本书将提供生物信息学的基础入门。 常用数据库介绍: 介绍NCBI(GenBank, PubMed)、EBI(Ensembl)等重要生物数据库的结构和使用方法,指导读者如何进行序列搜索、文献检索。 基本序列分析: 讲解DNA和蛋白质序列的基本比对(BLAST)、序列同源性分析、引物设计工具的使用。 实验数据初步处理: 简要介绍基因芯片、二代测序(NGS)等高通量实验数据的初步分析思路,包括数据质量控制、比对、表达量计算等基本概念。 本书力求通过图文并茂的方式,清晰地呈现每一个实验步骤的细节和关键点,并辅以常见的实验问题及解决方案,帮助读者在实际操作中少走弯路,快速掌握实验技能。通过对本书的学习,读者将能够独立设计并完成大部分基础和中等难度的生物医学实验,为未来更深入、更具创新性的科学研究打下坚实的基础。

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读后感

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用户评价

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这本书的内容深度和广度,简直让人难以置信,完全超出了我原本的预期。我原本以为它会集中于某个特定的技术领域,比如高通量测序或者生物成像,但读完前几章我就发现,它构建了一个宏大的知识体系框架,从基础的分子生物学原理,一直延伸到了前沿的系统生物学应用和数据分析方法论。书中对于实验设计原则的探讨尤其深刻,它没有仅仅停留在“怎么做”的层面,而是深入剖析了“为什么必须这么做”背后的统计学和生物学逻辑。我记得有一部分详细论述了对照组设置的重要性,那种严谨的态度让我反思了自己过去的一些实验疏漏。更难能可贵的是,它似乎总是走在行业前沿,一些我近期才在顶会论文中看到的创新性实验范式,竟然已经被它系统地梳理和评价了。这本书更像是一个经验丰富、博学多识的导师,用一种近乎平等的姿态与读者交流,引导我们去质疑、去探索未知。它不仅仅是一本操作手册,更是一部关于科学思维训练的教材。

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这本书的装帧设计实在太棒了,光是拿到手里就能感受到那种沉甸甸的专业气息。封面那种深邃的蓝调和精妙的几何图形搭配,一下子就抓住了我的眼球。我当时正赶着一个关于细胞信号通路的项目,对实验细节非常头疼,所以毫不犹豫地就翻开了。里面的排版清晰得令人赞叹,字体选择既不花哨也不过于刻板,阅读体验非常舒适。我特别欣赏它在图表处理上的用心,那些复杂的分子结构图和流程示意图,每一个细节都标注得清清楚楚,即便是初次接触这些概念的人,也能很快抓住核心逻辑。特别是关于蛋白质相互作用网络的那一章,原本晦涩难懂的理论,通过它精美的插图呈现出来,瞬间就变得直观多了。翻阅过程中,我感觉作者团队对读者的学习路径考虑得极其周到,知识点之间的过渡非常自然,不像有些教科书那样生硬地堆砌信息。如果说有什么小小的遗憾,可能就是某些高级算法的伪代码部分,对于我这种更偏向湿实验的背景来说,还需要多花点时间去消化,但总体来说,作为一本工具书和参考手册,它的视觉呈现和逻辑组织能力绝对是顶级的享受。

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我是一个跨学科背景的研究者,我的主要挑战是如何将我的计算模型与实际的生物学测量对接起来。市面上很多书籍要么过于偏向编程,要么只关注生物学现象,很少有能够完美平衡两者,并提供有效连接点的。这本书在这方面做得非常出色。它用一种非常清晰的数学语言描述了信号转导的动力学模型,紧接着就提供了相应的体外验证实验的详细方案,并且明确指出了模型参数在实验中如何被提取和校准。我最欣赏它在“数据解释与报告”部分的处理方式,它不仅教你如何得到数据,更教你如何像一个真正严谨的科学家那样去解释这些数据,如何识别潜在的假阳性或假阴性,以及如何用最有力的数据来支持或反驳你的假设。这种对科学严谨性的强调,让我感觉自己不仅仅是在学习实验技术,更是在重塑自己的研究范式。这本书就像一座桥梁,有效地弥合了我的计算世界和物理世界的鸿沟。

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说实话,我最初对这种“机能实验”的定义有些模糊,担心内容会过于偏向理论推导而缺乏实际操作性。然而,当我翻到那些关于新型生物传感器构建和功能验证的章节时,我的疑虑彻底打消了。这本书在描述具体实验流程时,那种细致入微的程度,简直就像作者在我身边手把手教学一样。比如,它对特定缓冲液配制的微小调整对酶活性的影响进行了详尽的对比分析,这种“细节决定成败”的经验总结,是任何标准SOP(标准操作规程)都难以涵盖的。我立刻对照着书中的建议,调整了我正在进行的一个关键反应体系,结果,重复性显著提高了,产率也稳定在了更高的水平。这种即时可见的、可量化的改进效果,极大地增强了我继续深入研读下去的动力。这本书的价值在于,它将那些隐藏在无数次失败实验背后的“潜规则”和“经验之谈”都挖掘了出来,并以科学的方式呈现给读者,真正体现了理论指导实践的强大力量。

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从一个学生的角度来看,这本书的结构设计简直是学习者的福音。它似乎是按照一个完整的科研训练周期来组织的:从最初的假设提出和文献调研,到实验方案设计、实施、数据获取,再到最后的结果分析和论文撰写技巧。我尤其喜欢它在每个章节末尾设置的“批判性思考题”。这些问题往往不是简单的事实回顾,而是需要综合运用本章乃至前几章知识进行深入分析和辩论的开放性难题。这迫使我不能只是被动地接收信息,而是必须主动地参与到知识的构建过程中去。在准备一次重要的学术研讨会时,我发现书中的“常见实验陷阱与规避策略”部分简直是“救命稻草”,那些我过去因为经验不足而犯下的错误,它都一一列举并提供了成熟的解决方案。这本书的价值,已经超越了教材本身,它正在塑造我成为一个更加独立、更加有能力的科研工作者,其影响是深远而持续的。

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