Apoptosis Techniques and Protocols pdf epub mobi txt 电子书下载 2026

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出版者:Humana Pr Inc

作者:Leblanc, Andrea C. (EDT)

出品人:

页数:272

译者:

出版时间:

价格:$ 129.95

装帧:HRD

isbn号码:9781588290120

丛书系列:

图书标签:

Apoptosis
Cell Death
Molecular Biology
Cellular Biology
Protocols
Laboratory Techniques
Biochemistry
Immunology
Cancer Research
Signal Transduction

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具体描述

In this revised and expanded second edition, seasoned experts describe in step-by-step detail their best state-of-the-art techniques for studying neuronal cell death. These readily reproducible methods solve a wide variety of research problems, including the detection of the key proteins involved in neuronal apoptosis (Bax protein, cytochrome c, and caspases), the direct assessment of the role of pro-apoptotic proteins in neurons by viral infections and microinjections, and the detection of pro-apoptotic proteins in situ. There are also hands-on methods for the study of apoptosis mechanisms in neuronal compartments, for studying synaptosis, and for establishing gene expression profiles in neurodegenerative brain tissues by using DNA microarrays.

《细胞凋亡技术与方案（Apoptosis Techniques and Protocols）》图书简介专注于前沿分子生物学与细胞病理学研究的权威指南《细胞凋亡技术与方案（Apoptosis Techniques and Protocols）》是一本面向生物医学研究人员、高级学生和实验室技术人员的权威性实验指南与理论参考手册。本书汇集了当前细胞凋亡研究领域最前沿、最可靠且经过严格验证的实验方法、操作规程以及数据解读策略。本书旨在提供一个全面、实用的平台，使用户能够高效地在体外和体内模型中准确地分析、调控和可视化细胞凋亡（程序性细胞死亡）的各个关键环节。第一部分：细胞凋亡基础与模型建立本书首先对细胞凋亡的分子机制进行了深入浅出的综述，涵盖了内在（线粒体介导）和外在（死亡受体介导）凋亡通路的核心蛋白、信号转导级联反应以及关键的效应分子。理论部分侧重于将复杂的生物学机制转化为可操作的实验设计。章节重点包括：凋亡通路的分子解析：详细阐述了Bcl-2家族蛋白的相互作用、Caspase的激活与级联反应、以及核酸内切酶的作用。细胞培养与模型系统：提供了优化原代细胞、永生化细胞系以及特定组织来源细胞（如神经元、淋巴细胞、肿瘤细胞）培养的详细方案，确保细胞在实验条件下保持生理活性和可重复性。特别关注了三维培养（如球状体、类器官）模型中凋亡的动态监测。诱导凋亡的策略：详尽列举了使用各种化学诱导剂（如Staurosporine, 氟化氢，TRAIL等）和物理方法（如辐射、热休克）诱导凋亡的剂量优化和时间点选择指南，强调了避免细胞坏死干扰的必要性。第二部分：凋亡检测的核心技术详解本部分是本书的核心，提供了从经典到尖端的全套凋亡定量和定性分析技术，确保研究人员能够根据实验目标选择最合适的检测手段。 A. 细胞形态学与细胞完整性分析：光学显微镜与电子显微镜观察：标准化了识别典型凋亡形态（如细胞皱缩、核固缩、形成凋亡小体）的图像采集和分析规范。膜完整性检测：详细介绍了碘化丙啶（PI）、吖啶橙（AO）/溴化乙锭（EB）染色技术，用于区分活细胞、早期凋亡、晚期凋亡和坏死细胞。胞质和核结构分析：提供了专门用于核固缩和染色质浓缩的荧光染色协议，并优化了免疫荧光染色中靶向特定凋亡蛋白（如Cleaved Caspase-3）的抗体选择和信号放大技术。 B. 生化标志物与酶活性测定： Caspase活性测定：提供了比色法、荧光法（使用底物如Ac-DEVD-pNA）和免疫印迹法对Caspase-3、-8、-9活性进行高灵敏度检测的详细步骤。强调了区分内源性和外源性通路激活的策略。 PARP酶切分析：标准化了检测关键凋亡底物PARP（聚腺苷二磷酸核糖聚合酶）被切割的Western Blot方案，这是衡量Caspase-3激活的间接但可靠的指标。线粒体功能障碍检测：详述了线粒体膜电位（MMP，使用JC-1或TMRE探针）的流式细胞术检测流程，以及细胞色素c释放到胞质的免疫沉淀和定量分析方法。 C. 细胞分选与流式细胞术高级应用： Annexin V/PI联合分析：提供了该经典双染方法的标准化操作流程，包括抗体孵育条件优化、补偿设置以及数据解读中的假阳性/假阴性排除技巧。多参数流式分析：介绍了结合凋亡标志物（如Fas/CD95）、周期蛋白和活性氧物种（ROS）检测的多色流式方案，用于解析凋亡发生时的细胞周期调控和氧化应激状态。第三部分：凋亡调控与干预技术本书超越了单纯的检测，深入探讨了如何利用分子生物学工具来操纵凋亡通路，为药物筛选和机制研究提供技术支持。章节重点包括：基因表达调控：提供了使用siRNA/shRNA技术特异性敲低或过表达关键凋亡调控因子（如Bax, Bcl-2, IAPs）的稳定转染和验证方案。重组蛋白与信号通路激活：详细说明了如何制备和使用重组死亡配体（如FasL, TNF-α）激活细胞表面受体，并优化了下游信号通路（如NF-κB, JNK）的激活检测。抗凋亡药物筛选：设计了高通量筛选（HTS）体系的实验方案，用于评估化合物对凋亡过程的抑制或促进作用，包括Z-/Bax比值的实时监测。体内实验策略：提供了将凋亡研究扩展到动物模型的方案，包括体内凋亡发生的组织学证据获取（如原位TUNEL染色）和功能性评估。目标读者与价值《细胞凋亡技术与方案》是细胞生物学、肿瘤学、神经科学、免疫学以及药物开发领域实验室的必备工具书。本书的价值在于其极强的实验可操作性、对潜在技术陷阱的预警，以及对数据结果的权威性解释框架，确保研究成果的稳健性和可重复性。本书内容聚焦于“如何做”和“如何确保结果正确”，是推动细胞凋亡研究从理论走向精确实验操作的桥梁。 ---