Fluorescent Proteins, Volume 85, Second Edition

Fluorescent Proteins, Volume 85, Second Edition pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:
作者:Kevin F. Sullivan
出品人:
页数:660
译者:
出版时间:2007-12
价格:1204.00 元
装帧:
isbn号码:9780123725585
丛书系列:
图书标签:
  • Fluorescent Proteins
  • Biochemistry
  • Biophysics
  • Molecular Biology
  • Biotechnology
  • Fluorescence
  • Proteins
  • Second Edition
  • Research
  • Laboratory Techniques
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This new edition of Fluorescent Proteins presents current applications of autofluorescent proteins in cell and molecular biology authored by researchers from many of the key laboratories in the field. Starting from a current review of the broad palette of fluorescent proteins available, several chapters focus on key autofluorescent protein variants, including spectral variants, photodynamic variants as well as chimeric FP approaches. Molecular applications are addressed in chapters that detail work with single molecules, approaches to generating protein fusions and biosensors as well as analysis of protein-protein interactions in vivo by FRET, fluorescence polarization and fluorescence cross corrlation techniques. A number of approaches to in vivo dynamics are presented, including FRAP, photoactivation, and 4-dimensional microscopy. Behavior of spindle components, membrane proteins, mRNA trafficking as well as analysis of cell types in tissues and in development are detailed and provide models for a wide variety of experimental approaches. In addition, several chapters deal directly with the computational issues involved in processing multidimensional image data and using fluorescent imaging to probe cellular behavior with quantitative modeling. This volume brings together the latest perspective and techniques on fluorescent proteins and will be an invaluable reference in a wide range of laboratories.

光耀生命:荧光蛋白的奥秘与应用 本卷《荧光蛋白》(第二版,卷85)深入探索了荧光蛋白这一革命性生物工具的最新进展,从其基础生物化学机制到前沿的生命科学应用,为读者提供一个全面而详实的视角。本书旨在凝聚该领域最具影响力的研究成果,并揭示荧光蛋白如何持续推动我们理解生命过程的边界。 第一部分:荧光蛋白的演变与机制 本部分追溯了荧光蛋白的发现史,从最初的绿色荧光蛋白(GFP)到如今琳琅满目的各种发色团及其衍生物。我们将深入探讨不同荧光蛋白的发色团结构、光物理性质,如激发和发射光谱、量子产率、光稳定性等,以及它们是如何受到环境因素(如pH、离子浓度、溶剂极性)影响的。此外,本卷还会详细介绍荧光蛋白的生物合成、折叠过程以及调控其荧光性质的分子机制,并探讨新型荧光蛋白的设计原理和策略,包括如何通过基因工程改造以实现特定波长、亮度、响应性和光稳定性。 第二部分:荧光蛋白的多样化工具箱 本部分将聚焦于荧光蛋白的广泛应用,展示其作为强大可视化工具的不可或缺性。我们将详细介绍各种工程化荧光蛋白,如: pH指示剂: 能够实时监测细胞内微环境pH值的变化,揭示细胞器功能、信号转导通路以及疾病状态下的pH失衡。 离子指示剂: 用于可视化钙离子、钠离子、钾离子等重要细胞内信号分子的动态变化,为研究细胞信号传导、神经活动和肌收缩等过程提供直接证据。 酶活性探针: 能够通过特异性识别和切割底物来报告酶活性的变化,为研究蛋白酶、激酶、磷酸酶等在细胞过程中的作用提供有力工具。 应力与张力传感器: 用于探测细胞骨架的机械应力和细胞膜张力的变化,帮助理解细胞在力学刺激下的行为和调控机制。 电压探针: 能够反映细胞膜电位的快速变化,对于研究神经元放电、心肌搏动等电生理过程至关重要。 光敏开关蛋白: 允许研究者通过光照来精确控制蛋白的活性或亚细胞定位,实现对复杂生物过程的光遗传学调控。 第三部分:荧光蛋白在生命科学研究中的应用 本部分将深入探讨荧光蛋白在各个生命科学领域的核心应用。 细胞生物学: 蛋白定位与动态研究: 通过将荧光蛋白与特定蛋白融合,能够实时追踪蛋白在细胞内的合成、转运、聚集以及降解,揭示蛋白的功能区域和相互作用网络。 细胞器成像: 标记特定的细胞器,如线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等,从而进行高分辨率的三维成像,研究细胞器的结构、功能和动态变化。 细胞周期与凋亡研究: 利用荧光蛋白标记关键周期蛋白或凋亡相关蛋白,实时监测细胞周期进程和细胞凋亡的发生,探索细胞命运调控机制。 细胞信号转导: 开发基于荧光共振能量转移(FRET)或荧光互补(BiFC)的探针,用于研究蛋白-蛋白相互作用、构象变化以及信号分子的激活状态。 神经科学: 神经元活动成像: 利用电压敏感荧光蛋白或钙离子指示剂,对大规模神经元网络的同步活动进行实时、高通量的记录,揭示大脑信息处理的机制。 突触可塑性研究: 追踪神经递质受体、突触蛋白的动态变化,研究突触的形成、修饰和功能可塑性。 神经发育与疾病模型: 在转基因动物模型中,利用荧光蛋白追踪神经元的生长、迁移和分化,以及研究神经退行性疾病的发病机制。 发育生物学: 胚胎发育可视化: 标记发育中的细胞谱系,追踪细胞迁移、分化和形态发生过程,解析器官形成的分子机制。 基因表达调控: 将荧光蛋白作为报告基因,监测特定基因的表达模式和调控网络,理解发育过程中的基因调控。 免疫学: 免疫细胞行为追踪: 标记免疫细胞,观察其迁移、相互作用和功能响应,研究免疫系统的动态调控。 抗原-抗体反应成像: 利用荧光标记抗体,可视化抗原的分布和免疫复合物的形成。 药物研发与诊断: 高通量筛选: 构建基于荧光蛋白的生物传感器,用于药物筛选,快速识别具有特定功能的化合物。 疾病诊断: 开发基于荧光蛋白的诊断试剂盒,用于检测生物标志物,辅助疾病的早期诊断和监测。 活体成像: 发展适用于活体动物研究的荧光蛋白,实现对疾病进展、治疗效果等进行非侵入式实时监测。 第四部分:挑战与未来展望 本部分将探讨当前荧光蛋白研究面临的挑战,例如提高信噪比、减少光毒性、实现更精细的时空分辨率、开发更多功能特异性探针等。同时,也将展望荧光蛋白技术的未来发展方向,包括: 超分辨率成像的整合: 结合超分辨率显微技术,实现对细胞内分子事件的纳米尺度可视化。 多色成像与分析: 开发更多独立且光谱区分度高的荧光蛋白,实现对多个分子或过程的同时追踪。 人工智能与大数据分析: 利用机器学习和人工智能技术,处理和分析海量的荧光成像数据,提取更深层次的生物学信息。 合成生物学中的应用: 将荧光蛋白作为构建复杂生物回路和人工细胞系统的关键元件。 《荧光蛋白》(第二版,卷85)将为生命科学研究者、生物工程师、医学研究者以及对这一迷人领域感兴趣的各界人士提供宝贵的参考。本书内容严谨、图文并茂,汇集了众多专家学者的智慧结晶,必将激发新的研究思路,并引领荧光蛋白技术的创新发展,进一步照亮我们探索生命奥秘的征程。

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读后感

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用户评价

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作为一名资深的化学合成方向的研究者,我本来对这本书抱有很高的期待,尤其希望它能在合成新型光敏材料的化学通路和纯化技术上有所突破。然而,事实是,这本书的侧重点明显偏向生物学应用和基础光谱学理论,而对于化学合成层面的细节讨论少得可怜。关于如何提高特定荧光团的量子产率、如何设计更稳定的保护基团以适应复杂的生物环境,这些关键的化学问题几乎是一笔带过。书中提到的几种合成路线,都显得非常陈旧,缺乏对近五年发展起来的“点击化学”等高效合成方法的关注。我期望看到的是对各种“正交”荧光体系的深入对比分析,包括它们的稳定性、光漂白阈值以及如何通过化学修饰来微调发射光谱,但这些内容要么缺失,要么被一笔带过,显得非常敷衍。这本书似乎是基于十多年前的知识体系构建的,对于当今追求高效、精准合成的化学家来说,它提供的价值非常有限,更像是一本给生物学家“扫盲”的教材,而非给专业人士提供前沿参考的工具书。

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这套书的定价实在让人摸不着头脑,封面的设计透着一股浓浓的九十年代科技期刊味,灰蒙蒙的背景配上略显粗糙的图表,让我不禁怀疑自己是不是买到了某个古早的学术会议合集。翻开目录,里面的章节标题像是用一种晦涩难懂的行话堆砌而成,对于一个刚接触这个领域的“门外汉”来说,简直就是一场灾难。我原本期待能看到一些关于如何选择合适的荧光探针、优化细胞成像参数的实用指南,结果呢?里面充斥着大量关于蛋白质结构域相互作用的理论推导和复杂的生化反应机理,仿佛作者完全不考虑读者群体的多样性。而且,书中的引文格式混乱不堪,有的地方引用了最新的文献,有的地方却停留在十年前的水平,让人对这本“第二版”的更新程度产生了严重的质疑。特别是关于新型小分子染料的那一章节,内容深度远远超出了我的理解能力,感觉更像是一篇博士毕业论文的节选,而不是一本面向广大科研人员的参考书。阅读体验极其不佳,我不得不频繁地在不同的生物信息学数据库间来回切换,试图理解那些抽象的描述,这极大地消耗了我的耐心和时间。这本书与其说是提供知识,不如说是在考验读者的专业背景和毅力。

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这本书的结构安排,从读者的角度来看,简直是反直觉的。它似乎是将所有内容一股脑地塞进了有限的篇幅里,缺乏一个清晰的、循序渐进的教学路径。比如,在深入探讨具体的荧光蛋白家族(如TD-mTomato系列)之前,它花费了大量的篇幅去讨论细胞膜电位的测量方法,这对于那些主要关注蛋白质本身特性而非特定应用的读者来说,显得冗余且分散注意力。正常的逻辑应该是先介绍材料的特性,再讨论其应用场景。结果是,读完前半部分,我完全没有建立起对核心对象的系统认知,感觉像是被拉着去参观了一个毫无重点的博物馆。而且,全书的索引做得极其简陋,很多关键的专业名词和技术术语在索引中找不到对应的页码,这使得查找特定信息时效率极低,不得不依靠大量的页边空白处手写笔记来弥补这一缺陷。总而言之,这本书更像是一个为特定领域的小圈子专家准备的内部资料汇编,而非一本面向广大科研群体的、具有普适价值的权威著作。

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这本书的排版和装帧质量,坦白说,配不上它高昂的售价。纸张的质量很一般,油墨的味道在翻阅时尤为明显,让人不禁担心长期阅读对健康是否有影响。更要命的是,书中的插图——那些本应是展示复杂三维结构和光谱曲线的关键图像——印刷得模糊不清,色彩失真严重。特别是那些需要精确分辨不同光谱峰位置的图表,由于分辨率不足,看起来就像一团互相重叠的色块,完全无法进行有效的分析和比对。我甚至不得不去网上搜索作者引用的那些原始论文,重新下载高清图片来辅助理解书中的论点,这完全违背了购买一本实体参考书的初衷。此外,书中的术语使用非常不一致,同一个概念在不同的章节中会用截然不同的缩写或术语来指代,这使得阅读体验极其碎片化,每隔几页就需要停下来查阅前面出现的定义,严重打断了思维的流畅性。这哪里像是一本经过严格编辑的第二版,更像是一份匆忙拼凑起来的草稿。

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我花了整整一个下午试图啃下关于光物理性质的那一节,结果收获甚微。作者似乎对“生动有趣的解释”这件事嗤之以鼻,所有的论述都像是用最干燥、最学术的语言直接翻译过来的。想象一下,你在一本号称是“基础”的参考书里,却要面对长达数页的、关于激发态衰变路径的数学模型,并且完全没有配图辅助理解,那种感觉简直就像被困在一个充满公式的迷宫里出不来。更令人费解的是,书中对“应用案例”的描述也异常简略,基本上只是草草提了一下某个技术可以用来做什么,然后立刻跳回到分子层面的细节探讨。比如,当提到某个GFP变体在活细胞成像中的优势时,作者只是用了一句话概括,却没有提供任何实际操作的步骤或可以复现的代码示例。这对于那些希望快速将理论知识转化为实验操作的生物技术人员来说,简直是资源的浪费。整本书的叙事逻辑是断裂的,感觉更像是一个知识点的堆砌,缺乏一个清晰的主线将所有内容串联起来,读起来非常吃力,很难形成一个系统的认知框架。

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