生物科学实验导论CAI

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isbn号码:9787894892522
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具体描述

《现代分子生物学:原理与技术》 本书特色: 本书旨在为学习分子生物学的学生提供一个全面、深入且与时俱进的知识框架。我们聚焦于驱动当前生命科学研究和生物技术发展的核心概念和尖端技术,确保读者不仅掌握基础理论,更能理解其实际应用潜力。不同于侧重于实验操作流程的入门教材,《现代分子生物学:原理与技术》 强调对复杂生命过程的机制性理解,以及如何利用这些知识解决实际科学问题。 第一部分:基因组的结构与调控 本部分将引导读者深入探索生命蓝图——基因组的组织方式和动态调控机制。 第一章 基因组学基础:从宏观到微观 本章首先回顾了染色体结构与真核生物和原核生物基因组的组织差异。重点讲解了基因组测序技术的发展历程,从桑格测序到新一代高通量测序(NGS)技术,如Illumina、PacBio和Oxford Nanopore的工作原理、优缺点及数据分析流程的初步介绍。此外,本章详述了非编码DNA区域的重要性,探讨了卫星DNA、重复序列、转座子及其对基因组稳定性和进化的影响。我们深入剖析了基因组组装的挑战与策略,以及如何通过比较基因组学揭示物种间的进化关系和功能保守性。 第二章 表观遗传学与基因表达的调控 本章超越了传统的DNA序列决定论,聚焦于在不改变DNA序列的前提下,基因表达是如何被精细调控的。详细阐述了DNA甲基化(包括CpG岛、全基因组甲基化模式及其在发育和疾病中的作用)、组蛋白修饰(如乙酰化、甲基化、磷酸化)的“组蛋白密码”及其对染色质可及性的影响。我们介绍了核小体定位、染色质重塑复合物(如SWI/SNF)的工作机制,以及染色质免疫沉淀技术(ChIP)及其衍生技术(ChIP-seq)在解析转录因子结合位点中的应用。此外,对长链非编码RNA(lncRNA)和环状RNA(circRNA)等新型调控因子的功能进行了深入探讨。 第三章 转录:从启动子到成熟RNA 本章专注于生命信息从DNA向RNA转录的核心过程。详细解析了RNA聚合酶(Pol I、II、III)的结构与催化机制,以及在原核生物和真核生物中启动子识别、转录起始、延伸和终止的具体步骤。重点讲解了真核生物中转录调控的复杂性,包括转录因子(TFs)的激活域和抑制域、协同激活机制,以及转录与染色质结构之间的瞬时耦合。我们还深入讨论了RNA加工过程,包括mRNA的5'端加帽、3'端加聚腺苷酸化、以及至关重要的RNA剪接(Splicing)。本章专门辟出一节介绍可变剪接(Alternative Splicing)的调控网络及其对蛋白质多样性的贡献。 第二部分:蛋白质的合成、修饰与功能 本部分将目光投向生命活动的执行者——蛋白质,解析其合成、折叠、修饰和功能实现的全过程。 第四章 翻译:从密码子到多肽链 本章系统阐述了遗传密码的破译、tRNA的结构与氨酰-tRNA合成酶的特异性。重点解析了核糖体这一复杂的“分子机器”的结构、A/P/E位点的功能循环,以及肽键形成的催化机制。我们详细比较了原核生物和真核生物起始因子、延伸因子和释放因子的差异。此外,本章涵盖了翻译的调控层面,包括阅读开放阅读框(ORF)的选择、核糖体滑移以及在细胞因子缺乏或应激条件下对翻译的全局抑制与特定mRNA的选择性翻译。 第五章 蛋白质折叠、运输与质量控制 本章关注蛋白质如何从线性氨基酸链转变为具有特定三维结构的活性分子。详细讨论了自发折叠的能量学驱动力,以及分子伴侣(Chaperones)如Hsp70和GroEL/GroES系统在协助正确折叠和避免聚集体形成中的关键作用。我们深入讲解了蛋白质的细胞内定位机制,包括内质网(ER)的靶向序列、信号识别颗粒(SRP)介导的膜易位,以及线粒体和叶绿体的蛋白质输入通道。本章还探讨了内质网应激(UPR)和泛素-蛋白酶体系统(UPS)在细胞蛋白质质量控制和靶向降解中的核心地位。 第六章 蛋白质的翻译后修饰(PTMs)及其信号转导 PTMs是决定蛋白质功能、活性和寿命的“开关”。本章详尽分析了主要的PTMs,包括磷酸化(丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸激酶的信号级联)、泛素化(单泛素化与多泛素化链结构对功能的影响,如K48和K63连接)、乙酰化、羟基化和糖基化。本章的核心在于将这些修饰与细胞信号转导网络相结合,例如受体酪氨酸激酶(RTKs)的激活、MAPK通路、以及磷脂酰肌醇信号的调控。通过分析这些修饰的动态平衡,读者可以理解细胞如何对外部刺激作出快速且特异性的反应。 第三部分:基因工程与前沿技术 本部分侧重于现代分子生物学实验技术及其在生物技术中的应用。 第七章 基因克隆、表达与文库构建 本章是分子生物学实验的基石。详细介绍限制性内切酶、DNA连接酶和载体(质粒、病毒载体)的选择与设计原则。系统阐述了PCR技术(包括实时定量PCR, qPCR)的原理、优化及其在基因检测中的应用。深入探讨了构建基因文库(基因组文库、cDNA文库)的方法和用途,以及筛选重组子的策略。本章专门介绍蛋白质表达系统(原核、酵母、哺乳动物细胞)的优缺点及其在生产重组蛋白中的适用性。 第八章 基因编辑技术:CRISPR/Cas9及后续发展 本章聚焦于革命性的基因编辑技术。详细解析了CRISPR/Cas9系统的细菌免疫起源、sgRNA的设计、Cas9的切割机制。深入探讨了其在原核和真核生物中实现精准基因敲除、敲入和定点突变的操作流程与挑战。此外,本章涵盖了CRISPR技术的衍生和升级,如碱基编辑器(Base Editors)、先导编辑(Prime Editing)的工作原理,以及它们如何克服Cas9的脱靶效应和引入双链断裂(DSB)的限制。 第九章 蛋白质组学、代谢组学与系统生物学概述 本章展望了多组学时代的分析方法。重点讲解了二维凝胶电泳(2D-PAGE)和串联质谱(MS/MS)在蛋白质鉴定和定量中的应用。讨论了蛋白质相互作用组(PPI)的研究方法,如酵母双杂交(Y2H)、共免疫沉淀(Co-IP)。最后,本章引入了系统生物学的概念,解释了如何整合基因组、转录组、蛋白质组和代谢组数据,利用计算模型来理解复杂的细胞网络和疾病通路,为未来的精准医学奠定理论基础。 总结: 《现代分子生物学:原理与技术》超越了对实验步骤的简单罗列,致力于构建一个相互关联的知识体系,使读者能够从分子层面深入理解生命现象的复杂性、精妙性和可塑性。本书是研究生、高年级本科生以及生物技术领域研究人员的理想参考书。

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这本书的封面设计简洁大方,色彩搭配给人一种沉稳而专业的印象,一看就知道是正儿八经的学术教材。初翻目录,便能感受到编者在内容组织上的匠心独运。它没有采用传统的、按部就班的章节划分,而是将实验项目按照从基础到进阶的逻辑严密地串联起来,仿佛为初学者规划了一条清晰的上升路径。每一章的引言部分都深入浅出地阐述了该实验背后的核心科学原理,这种“知其所以然”的教学方法,极大地激发了我对实验操作的兴趣,不再仅仅满足于机械地重复步骤。特别是对于一些涉及复杂仪器操作的部分,配图的清晰度和细节的标注都做得非常到位,即便是首次接触这些设备的人也能迅速上手,极大地降低了实验初期的挫败感。我特别欣赏它在理论知识与实际操作之间的平衡把握,使得学习过程既充实又充满探索的乐趣。

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这本书的行文风格,坦率地说,比我预期的要“鲜活”不少。它不像很多理工科书籍那样,充斥着晦涩难懂的术语和过于冗长的论述,而是带着一种对科学探索者应有态度的鼓励。作者在描述实验过程中遇到的常见陷阱和误差来源时,那种近乎“过来人”的口吻,让人倍感亲切和真实。书中不仅仅罗列了“该做什么”,更细致地剖析了“为什么这么做”以及“如果那样做会怎样”,这种前瞻性的指导对于培养批判性思维至关重要。我尤其喜欢其中穿插的一些历史小典故和科研前沿的简短案例,它们像调味料一样,让原本可能略显枯燥的实验步骤变得生动有趣,使得学习过程不再是单纯的知识灌输,而更像是一场追溯科学发现脉络的旅程。

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这本书的排版设计,体现了一种现代的审美和对读者体验的尊重。大开本的尺寸使得图表和流程图能够得到充分的展示空间,阅读时无需频繁地放大缩小或来回翻页,极大减轻了阅读负担。墨水的质量和纸张的选择也相当考究,即便是长时间阅读,眼睛也不会感到明显的疲劳。更值得称赞的是,其索引和术语表的编排极为细致和系统化,当你需要快速查阅某个特定概念或操作细节时,总能迅速定位,这对于需要高效率查阅资料的科研工作者来说,无疑是一个巨大的加分项。这种对细节的打磨,让整本书从物理形态上就散发着专业且严谨的气息。

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我发现这本书最独特的价值在于其“拓展思维”的部分。在完成每一个核心实验后,作者都会设置一个名为“进阶思考”或“探索延伸”的板块。这些板块提出的问题往往具有开放性和挑战性,它们引导读者跳出既定的实验框架,去思考如何优化现有流程、如何设计对照实验来排除干扰因素,甚至是如何将现有技术应用于全新的研究领域。这种超越基础教学范畴的引导,真正地将读者从一个“实验执行者”培养成一个潜在的“问题解决者”。它教会我们的不只是操作技能,更重要的是科学研究中那种永不停歇的好奇心和质疑精神,这是任何技术手册都无法替代的宝贵财富。

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从实用性的角度来看,这本书的实验设计展现了极高的可操作性和时效性。它所选取的实验材料和试剂,大多都是当前主流实验室容易获取的资源,这为我们课后或自习时的模拟操作提供了极大的便利,避免了因材料稀缺而导致的“纸上谈兵”。此外,书中对于数据记录和分析的标准范式给出了非常明确的指导,这在很大程度上弥补了我们在课堂上往往只注重“做完实验”而忽略了“如何规范呈现结果”的短板。对于统计学在生物学实验中的应用,本书也给予了足够的篇幅,用直观的图表和案例来解释如何判断实验结果的显著性,这无疑是提升实验报告质量的关键。它真正做到了将理论指导与实践规范紧密结合。

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