Membrane Protein Purification and Crystallization

Membrane Protein Purification and Crystallization pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:Academic Press
作者:Jagow, Gebhard Von (EDT)/ Von Jagow, Gebhard (EDT)/ Schagger, Hermann (EDT)/ Hunte, Carole (EDT)
出品人:
页数:316
译者:
出版时间:2003-1-5
价格:GBP 88.00
装帧:Paperback
isbn号码:9780123617767
丛书系列:
图书标签:
  • 生物化学
  • 生物
  • 膜蛋白
  • 蛋白质纯化
  • 蛋白质结晶
  • 生物化学
  • 分子生物学
  • 结构生物学
  • 蛋白质组学
  • 生物物理学
  • 实验技术
  • 膜生物学
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具体描述

This second edition of "Membrane Protein Purification and Crystallization, A Practical Guide" is written for bench scientists working in the fields of biochemistry, biology, and proteomic research. This guide presents isolation and crystallization techniques in a concise form, emphasizing the critical aspects unique to membrane proteins. It explains the principles of the methods and provides protocols of general use, permitting researchers and students new to this area to adapt these techniques to their particular needs. This edition is not only an update but is comprised mainly of new contributions. It is the first monograph compiling the essential approaches for membrane protein crystallization, and emphasizes recent progress in production and purification of recombinant membrane proteins. Among its key features, it: provides general guidelines and strategies for isolation and crystallization of membrane proteins; gives detailed protocols that have wide application, and low specialized equipment needs; emphasizes recent progress in production and purification of recombinant membrane proteins, especially of histidine-tagged and other affinity-epitope-tagged proteins; summarizes recent developments of Blue-Native PAGE, a high resolution separation technique, which is independent of the use of recombinant techniques, and is especially suited for proteomic analyses of membrane protein complexes; gives detailed protocols for membrane protein crystallization, and describes the production and use of antibody fragments for high resolution crystallization; and presents a comprehensive guide to 2D-crystallization of membrane proteins.

好的,这是为您准备的图书简介,完全基于您提供的书名之外的想象,旨在构建一个详尽且引人入胜的描述,同时避免提及任何与“膜蛋白纯化与结晶”相关的内容。 --- 书名:《星际废墟:失落文明的导航与重建》 内容简介 引言:跨越千年的回响 自“大寂静”以来,人类文明的足迹便如同破碎的玻璃碎片,散落在银河系的不同星区。我们仰望夜空,不再是寻找新的希望,而是试图破译那些遥远恒星系中,由一个已逝去、被称作“先驱者”的超级文明留下的遗迹。本书并非传统的历史编年史,而是深入“废墟”——那些被时间侵蚀的巨型空间站、荒芜的行星城市,以及漂浮在虚空中的数据核心——的实地考察报告与理论分析。它聚焦于一个核心问题:我们如何解读这些冰冷的、宏伟的结构,并从中提取出重建未来文明的蓝图? 第一部分:空间考古学的挑战 探索的起点是“静默之环”,一个横跨数个光年的巨型轨道结构。我们发现,先驱者的技术并非基于我们所理解的线性逻辑,而是建立在多维空间几何和“共振频率”之上。本章详细剖析了探险队首次进入一个处于休眠状态的“恒星熔炉”的惊险过程。如何绕过自动防御系统?如何解读那些不依赖任何可识别语言的能源管理界面? 我们引入了“拓扑熵”理论,来量化废墟的结构复杂性。一个保存完好的先驱者遗迹,其信息密度极高,但其解读难度也呈指数级增长。本书首次公开了一组从半人马座阿尔法星系边缘的“记忆方碑”中恢复出来的部分编码序列。这些序列似乎描述了先驱者文明的社会组织结构,揭示了他们对时间流逝的独特感知方式。 第二部分:失落的技术哲学 先驱者的科技远超我们当前的理解,但他们的核心哲学似乎关注的并非征服宇宙,而是与宇宙的“协调”。本书深入探讨了“场域构建”的概念,这是一种无需传统物理介质,仅凭意念或特定的数学结构便能影响物质和能量的学说。 通过对火星轨道上一个被称为“织网者”的巨型计算平台的逆向工程,我们揭示了先驱者如何利用量子纠缠网络实现跨星系瞬间通信。更令人震撼的是,他们似乎掌握了“概念固化”的技术,即将抽象的哲学思想转化为具有物理效应的结构。我们展示了如何通过模拟这种固化过程,成功地在一颗贫瘠的卫星上短暂地维持了一个稳定的人造微气候——一个微型的、可控的生态系统。 第三部分:文明的衰落与警示 任何伟大的文明都必然面临终结。本书的第三部分转向了对先驱者衰亡原因的探究。我们排除了传统的外星侵略或资源枯竭的可能。证据指向了一个内部的、更具灾难性的后果——对“无限可能性”的过度追求。 在木星的冰封卫星欧罗巴的深海之下,探险队发现了一个被严密隔离的“终结档案馆”。这里的记录显示,先驱者在试图掌握宇宙的“底层代码”时,无意中触发了一种被称为“存在稀释”的现象。他们的现实基础开始变得模糊不清,最终导致了大规模的系统性崩溃。这部分内容对当代人类社会提出了尖锐的质问:我们在追求知识的边界时,是否也站在了类似的悬崖边上? 第四部分:重建的伦理与路径 最后的篇章着眼于未来。我们能否安全地利用这些技术遗产?如何防止重蹈覆辙?本书提出了一套“渐进式整合模型”,主张在完全理解先驱者哲学之前,仅能对他们的技术进行有限度的、被严格约束的模仿。 我们详细描述了对一个失重城市“伊卡洛斯之心”的修复工作。这个城市的设计初衷是作为纯粹的知识储存库,但其能源核心的不稳定构成了巨大的威胁。本书记录了工程师和理论学家如何合作,用基于牛顿物理学的、相对“笨拙”的现代技术,去锚定一个依赖于高维物理的古代核心。这是一场跨越时代的合作,关乎智慧的继承与责任。 结语:回望废墟,眺望星辰 《星际废墟:失落文明的导航与重建》是一部融合了硬科幻探索、深层哲学思辨和实际工程挑战的巨著。它不仅仅是关于“他们留下了什么”,更是关于“我们该如何成为”。它邀请读者与我们一同,在那些冰冷的金属结构中,寻找人类文明得以延续的微弱但坚定的火种。这本书将彻底改变您对技术、历史以及我们自身在宇宙中位置的认知。它是一份给未来,写给每一个在寂静中倾听的人的指南。

作者简介

目录信息

读后感

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用户评价

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我一直对细胞膜上那些至关重要的分子机器——膜蛋白——充满敬畏。它们负责着细胞与外界的物质交换、信号传递以及能量转换等核心功能,是生命活动的基石。然而,研究膜蛋白并非易事,它们如同隐藏在脂质海洋中的孤岛,难以捕捉,更难稳定。因此,一本系统阐述膜蛋白纯化与结晶的书籍,对于我这样的研究者来说,无异于一份宝贵的“地图”。我期待书中能够详细解析各种膜蛋白的提取方法,从选择合适的细胞类型,到优化裂解和膜分离的流程,再到精巧地选择能够稳定蛋白且不破坏其功能的去垢剂。我尤其希望能了解到,如何通过不同的层析技术,如亲和层析、离子交换层析、疏水层析等,逐步提高目标膜蛋白的纯度。而结晶,更是将膜蛋白结构研究推向极致的关键。我热切地希望书中能够深入探讨各种结晶策略,包括如何优化蛋白浓度、添加剂种类、pH值以及温度等参数,甚至可能涉及一些利用高通量筛选技术或特殊结晶环境(如LCP)的先进方法。我希望这本书能够为我提供一套清晰的实验路线图,帮助我跨越膜蛋白研究的重重障碍,最终揭示这些生命“守门人”的精妙结构与工作原理。

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这本书的封面设计就足够吸引眼球,那种深邃的蓝与晶莹的紫交织在一起,仿佛蕴含着生命最深层的奥秘。我拿到这本书的时候,内心涌起一股强烈的求知欲,这不仅仅是对一项科学技术的探究,更像是对揭示生命运作机制的一扇窗户的开启。我一直对细胞膜上那些繁忙的“卫士”们——膜蛋白——充满了好奇。它们身处一个极端复杂且动态的环境中,却精准地执行着信号传递、物质运输等至关重要的功能。了解它们、研究它们,进而能够“驯服”它们,让它们乖乖地“站好”,以便我们能够仔细地观察它们的精妙结构,这简直就是一项充满挑战却又意义非凡的壮举。我期望这本书能够像一位经验丰富的向导,带领我深入这个迷人的研究领域,从最基础的概念讲起,逐步揭示那些令人称奇的实验步骤和技术原理。我尤其希望能了解到,在如此复杂的生物体系中,科学家们是如何克服重重困难,一步步地将那些难以捉摸的膜蛋白“捕获”出来,并最终让它们以完美的三维结构呈现在我们面前的。这种从混沌到有序的转化过程,本身就充满了哲学般的智慧与科学的浪漫,想想就令人激动不已。我对书中可能涉及到的各种精巧的生物化学分离技术、改良的表达系统、以及那些能够诱导蛋白形成稳定晶体的“魔术”配方都充满了期待。我希望这本书不仅仅是一本技术手册,更能激发我对于生命科学前沿的思考,以及对未来研究方向的探索。

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当我翻开这本书的扉页,一股严谨而专业的学术气息扑面而来。我一直认为,膜蛋白的研究是当前生命科学领域中最具挑战性也最令人兴奋的方向之一。它们是细胞与外界环境进行信息交流和物质交换的“桥梁”,掌握了膜蛋白的结构和功能,就如同掌握了理解细胞行为和疾病发生机制的关键。然而,膜蛋白的特殊性,比如它们嵌在脂质双层膜中,极难溶解和稳定,这使得它们的研究比可溶性蛋白要困难得多。因此,一本能够系统地阐述膜蛋白纯化和结晶过程的书籍,对于我这样的研究者来说,是弥足珍贵的。我希望这本书能够深入浅出地讲解各种常用的膜蛋白提取方法,比如使用不同种类的去垢剂,以及它们的优缺点;同时,对于后续的纯化步骤,如亲和层析、离子交换层析等,我也希望能够得到详细的指导,包括如何选择合适的介质、优化洗脱条件等。而结晶,更是其中最关键的一步,它如同将一个活生生的、不停运动的生命体定格,以供我们细致观察。书中对于如何筛选结晶条件,比如改变pH、离子强度、添加聚合物等,以及如何利用高通量筛选技术来加速这一过程,我都充满期待。我尤其希望能够看到一些成功的案例分析,了解科学家们是如何通过不懈的努力和巧妙的设计,最终获得高质量的膜蛋白晶体。这本书的价值,无疑在于它能够为我提供一份详实的“行动指南”,帮助我少走弯路,更有效地推进我的研究项目。

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这本书的标题直接击中了我对生命科学前沿探索的渴望。膜蛋白,这些在细胞膜上扮演着关键角色的分子,它们的结构和功能是理解生命活动的基础,但同时,它们的研究也充满着挑战,尤其是纯化和结晶过程。我希望这本书能够为我提供一份详尽的“操作手册”,从最基础的概念讲起,一步步地引领我深入到膜蛋白研究的复杂世界。我期待书中能够详细介绍各种提取膜蛋白的方法,包括如何有效地从细胞膜中溶解和分离蛋白,以及如何选择合适的去垢剂来保持其活性。接着,对于纯化过程,我希望能够了解到各种层析技术的原理和应用,如何通过多步纯化来获得高纯度的目标蛋白。而结晶,无疑是其中最关键也是最困难的一步。我希望书中能够深入探讨各种结晶策略,包括如何优化实验条件,如何筛选适宜的添加剂,以及如何克服膜蛋白易于聚集或变性的问题。我希望通过阅读这本书,能够掌握一套完整的、可操作的膜蛋白纯化和结晶技术,为我的科研工作提供强有力的支持,从而能够更深入地揭示膜蛋白的生命奥秘。

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当我看到这本书的名称时,我立刻联想到那些在细胞膜上默默工作的“勤劳的工匠”——膜蛋白。它们是细胞与外界沟通的“信号塔”,是物质运输的“管道”,是维持生命体正常运转的“精密仪器”。然而,要深入研究这些“工匠”的工作方式,就必须能够将它们从错综复杂的细胞膜环境中“请”出来,并且让它们“摆好姿势”供我们仔细观察,这无疑是一项极具挑战性的任务。我希望这本书能够成为我的“启蒙老师”,详细讲解如何有效地提取和纯化膜蛋白。我期待书中能够涵盖各种不同的提取方法,包括如何选择合适的细胞类型,如何优化细胞裂解和膜分离的步骤,以及如何精准地选择能够稳定和溶解膜蛋白的去垢剂。同时,对于纯化过程,我希望能够了解到各种层析技术的原理和应用,如何一步步地提高目标蛋白的纯度,直至达到结晶所需的标准。而结晶,作为膜蛋白结构解析的“终极目标”,我希望书中能够提供深入的指导,包括如何筛选结晶条件,如何优化蛋白质量,以及如何应对常见的结晶难题。我渴望通过这本书,获得一套系统性的知识和技能,能够帮助我攻克膜蛋白研究中的技术壁垒,更有效地探索生命的奥秘。

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在我看来,膜蛋白的研究是理解生命活动最前沿的领域之一。它们是细胞与外界沟通的“哨兵”,是维持生命体正常运转的“工程师”,其重要性不言而喻。然而,膜蛋白的特殊结构和性质,使得它们的研究充满了挑战。一本专注于膜蛋白纯化与结晶的书籍,对于任何一位从事相关研究的科学家来说,都是一份宝贵的资源。我希望这本书能够系统地梳理膜蛋白研究的历史和发展,让我对这个领域有一个宏观的认识。同时,我更期待书中能够深入讲解各种纯化技术,例如,如何选择合适的细胞来源,如何优化细胞裂解和膜提取的条件,以及如何利用各种层析技术(如亲和层析、疏水层析、离子交换层析等)来高效地获得高纯度的膜蛋白。而结晶,更是膜蛋白结构解析的“瓶颈”所在。我希望书中能够详细介绍各种结晶策略,包括如何筛选适宜的去垢剂、添加剂,以及如何优化结晶条件。此外,对于一些常见的棘手问题,比如蛋白不稳定、结晶困难等,我希望书中能够提供一些具有启发性的解决方案。我非常期待这本书能够成为我实验室的“圣经”,在我遇到困难时,能为我指点迷津,带领我走向成功。

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我一直对生物物理学领域有着浓厚的兴趣,而膜蛋白的结构解析无疑是这一领域的重镇。这本书的出现,仿佛为我打开了一扇通往未知世界的大门。我设想,书中会详细介绍各种用于膜蛋白纯化的技术,从最初的细胞裂解,到选择合适的去垢剂,再到使用各种层析方法逐步分离目标蛋白。我特别关心那些能够“温和”地将膜蛋白从细胞膜环境中“请”出来,又不至于破坏其天然构象的方法。毕竟,膜蛋白的活性往往与其所处的微环境息息相关。接着,书中应该会深入探讨膜蛋白结晶的挑战与策略。我知道,膜蛋白的疏水性使得它们在水相环境中极不稳定,因此,如何找到一个能够稳定蛋白、同时又能诱导其形成有序晶体的“理想”环境,是结晶成功的关键。我期待书中能够介绍各种改良的结晶方法,比如在脂质立方体相(LCP)中进行结晶,或者利用纳米盘技术来模拟天然的膜环境。此外,对于如何利用X射线衍射、冷冻电镜等技术来解析膜蛋白的结构,书中是否也会有所涉及,这也是我非常好奇的部分。总而言之,我希望这本书能够提供一套完整的、可操作的流程,帮助研究者们跨越膜蛋白研究的“高山”,最终获得具有重要科学意义的结构信息。

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这本书的封面设计就让我联想到那些在细胞膜上默默工作的“小精灵”们——膜蛋白。它们是细胞与外界交流的“信使”,是物质进出的“看守者”,是维持生命活动的“关键齿轮”。然而,它们身处一个极其严苛的环境中,如何才能把它们“请”出来,并且让它们乖乖地“站好”让我们仔细观察,这本身就是一项艰巨的任务。我希望这本书能够像一位经验丰富的生物化学家,从头开始,细致入微地讲解膜蛋白纯化的每一步。比如,如何选择合适的细胞系,如何有效地裂解细胞,以及如何选择最适合目标蛋白的去垢剂,这些都是非常关键的细节。我期待书中能够详细介绍各种纯化技术,比如不同种类的层析柱,如何优化洗脱条件,以及如何评估蛋白的纯度和活性。更重要的是,我猜想书中会花费大量篇幅来讨论膜蛋白的结晶。这无疑是整个过程中最困难的一步。我希望能够从中了解到,科学家们是如何克服膜蛋白的疏水性,如何在非天然环境中诱导它们形成稳定的晶体,以及如何利用各种技术来筛选结晶条件。我渴望从书中学习到那些实用的技巧和经验,能够帮助我在自己的研究中少走弯路,更有效地推进膜蛋白的结构解析。

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这本书的标题,"Membrane Protein Purification and Crystallization",本身就充满了科学探索的吸引力。我一直在思考,细胞膜上那些错综复杂的蛋白质网络,是如何协同工作,完成如此精密的生命任务的。然而,要深入了解它们,我们必须先能够“抓住”它们,并让它们“站定”让我们仔细观察。这本书,我猜想,就是为实现这一目标而存在的。我期望书中能详细介绍各种提取膜蛋白的策略,从选择合适的细胞系,到进行高效的细胞裂解,再到如何利用不同的去垢剂和溶剂来溶解膜蛋白,同时尽量保持其生物活性。接着,纯化过程,我猜想,会是书中一个重要的组成部分。从简单的层析技术,到更精密的亲和层析,如何一步步地分离出目标蛋白,同时避免蛋白质的变性或聚集,这其中一定蕴含着许多巧妙的实验设计和技术诀窍。而结晶,更是将膜蛋白结构解析推向极致的关键一步。我期待书中能深入探讨如何克服膜蛋白的疏水性,如何在非天然环境中诱导其形成有序的晶体。我希望书中能提供一些实用的建议,比如如何筛选各种添加剂、如何优化结晶条件,甚至包括一些成功与失败的案例分析,从中吸取经验。总之,我期待这本书能够为我提供一套系统性的指导,让我能够更有效地进行膜蛋白的纯化和结晶研究,最终揭示更多膜蛋白的奥秘。

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在我看来,膜蛋白研究是现代生物学中最具挑战性但又最富有前景的领域之一。它们在细胞的信号传导、物质运输、能量代谢等过程中扮演着至关重要的角色,是理解生命活动的关键。然而,由于其疏水性和膜内环境的复杂性,膜蛋白的纯化和结晶一直是一个巨大的技术难题。因此,一本能够系统地阐述这些方法的书籍,对于任何一位希望在该领域有所建树的研究者来说,都显得尤为珍贵。我期望这本书能够详尽地介绍各种用于膜蛋白提取和溶解的策略,包括不同种类去垢剂的选择、优化以及它们对蛋白构象的影响。同时,对于纯化步骤,我希望书中能够提供详细的指导,如何根据目标蛋白的特性选择合适的层析技术,如何优化洗脱条件以获得高纯度和高活性的蛋白。而结晶,作为获得高分辨率结构信息的必要前提,其难度可想而知。我期待书中能够深入探讨各种结晶策略,例如高通量筛选、纳米盘技术、脂质立方相结晶等,并提供一些实用的技巧和经验,帮助研究者们克服结晶的障碍。总而言之,我希望这本书能够为我提供一套完整的、可操作的指南,引领我深入探索膜蛋白世界的奥秘,为生命科学的研究贡献力量。

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