微生物学实验指导

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出版者:清华大学出版社
作者:陈金春
出品人:
页数:107
译者:
出版时间:2005-8
价格:15.00元
装帧:简裝本
isbn号码:9787302111825
丛书系列:
图书标签:
  • 生物
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具体描述

微生物学是综合性大学和师范院校生物系开设的一门非常重要的基础实验,掌握微生物学的一些实验方法和技术,在大脑中形成无菌概念是学生进行分子生物学和细胞生物学实验和研究的基础。在目前高校扩招、学时紧张的情况下,如何在有限学时内系统的完成微生物学实验的教学,是摆在全国高校微生物学实验老师面前的一大难题。我们在清华大学十几年微生物学实验教学经验的基础上,参考国内兄弟院校和国外有关教材编写了本实验教材,力求在各个实验里安排尽量多的微生物实验基本操作和微生物学知识点。

本书主要内容包括微生物个体和菌落形态观察,染色方法,计数,大小测量,培养基制备和灭菌,无菌操作,微生物检测和分离,生理生化反应,影响微生物生长的因素和细菌生长曲线测定,诱变育种和实验室发酵制备啤酒和酸奶,发酵罐使用等内容。整个实验课中贯穿了显微镜使用,无菌操作,菌种筛选、鉴定、选育和发酵应用这一主线。微生物学需掌握的基本操作在实验中得到反复训练,同时加深了同学们对所学微生物学基本概念的理解和掌握程度。实验设计贴近生活,可以大大提高同学们学习生物学的兴趣。

《植物生理学研究方法与技术》 图书简介 本书旨在为植物学、农学、林学以及生命科学相关领域的研究生、高年级本科生和科研工作者提供一套全面、深入且系统化的植物生理学实验方法与技术指导。在现代生命科学飞速发展的背景下,对植物生命过程的精细解析已成为揭示生命奥秘和应对全球挑战(如气候变化、粮食安全)的关键。本书正是顺应这一需求,力求成为一本兼具理论深度与操作实用性的参考手册。 全书内容覆盖了从基础的植物材料获取、处理,到复杂的分子生理学、代谢组学和环境生理学实验设计与实施的全过程。我们摒弃了简单罗列操作步骤的传统模式,而是侧重于解释每项技术背后的科学原理、实验误差的控制、数据解读的注意事项以及不同技术之间的有机结合与互补性。 第一部分:基础技术与样品制备 本部分奠定后续高级实验的基础。首先,详细阐述了植物材料的无菌操作技术,包括植物组织培养的无菌环境建立(超净工作台的正确操作与维护)、培养基的精确配制(pH值的控制与灭菌参数的优化)、以及不同植物组织(如愈伤组织、胚、芽尖)的诱导与继代培养技术。强调了环境因子(光照质量与强度、温度、湿度)对培养物生长的影响及其调控策略。 其次,深入介绍了植物细胞和亚细胞组分的有效分离技术。这包括原生质体的制备(酶的选择、渗透压的精确调节)、线粒体和叶绿体的分离纯化(差速离心与密度梯度离心法的优化),以及核酸和蛋白质提取的标准化流程。特别关注了提高提取物纯度和产率的“陷阱”与解决方案,如如何避免酚类物质对核酸的降解。 第二部分:光合作用与呼吸作用的生理生化分析 光合作用是植物生理学的核心领域。本部分系统梳理了光合速率的测量技术。详细介绍了采用开路和闭路式光合测定系统的操作规范,重点解析了如何进行气体交换参数(净光合速率 $P_n$、气孔导度 $g_s$、胞间 $ ext{CO}_2$ 浓度 $C_i$)的精确测定与校正。对于叶绿素荧光技术,本书不仅讲解了OJIP 瞬态曲线分析的基本原理,更深入探讨了如何利用 PAM(脉冲振幅调制)荧光仪对光合系统 II (PSII) 的最大量子产额 ($F_v/F_m$)、有效量子产额 ($Phi_{PSII}$) 等参数进行实时动态监测,并结合稳态荧光分析不同环境胁迫下的光保护机制。 在呼吸作用方面,本书探讨了底物水平的氧化还原分析,如细胞色素氧化酶和琥珀酸脱氢酶活性的测定。同时,结合氧电极法,详细说明了线粒体和完整细胞呼吸速率的测定,以及如何通过抑制剂滴加法确定电子传递链上关键酶的活性位点。 第三部分:信号转导与分子生理学技术 现代植物生理学离不开对信号分子的检测和信号转导通路的解析。本部分重点介绍激素(植物生长调节物质)的定量分析。涵盖了传统但仍在广泛使用的生物测定法(如黄化试验、根伸长试验)的标准化流程,以及高灵敏度的仪器分析方法,如高效液相色谱-串联质谱联用技术 (HPLC-MS/MS) 在内源性激素(如生长素、赤霉素、脱落酸)提取、纯化和准确定量中的应用细节。 在分子层面,本书详述了基因表达分析技术。除了经典的实时定量 PCR (RT-qPCR) 的引物设计、标准曲线建立和数据归一化处理,还重点介绍了基于RNA 测序 (RNA-Seq) 数据的差异表达分析流程,包括数据预处理、比对、定量和功能富集分析的生物信息学基础。同时,讲解了蛋白质免疫印迹 (Western Blot) 技术在验证特定蛋白表达水平和修饰状态中的关键步骤,如抗体选择、封闭条件的优化。 第四部分:环境生理学与胁迫响应 面对全球气候变化,植物对非生物胁迫的响应机制是研究热点。本部分详细指导了非生物胁迫模拟实验的设计与实施。 1. 水分胁迫 (干旱与盐渍胁迫):讲解了如何通过PEG溶液配制或控水培养精确控制水分势,并指导测量气孔导度和水分利用效率。对于渗透调节物质,如脯氨酸、可溶性糖的提取与比色定量方法被详细阐述。 2. 温度胁迫 (高温与低温):指导如何精确控制温室或培养箱的温度梯度,以及膜脂流动性(如使用荧光探针 DPH)的测定方法,以评估膜损伤程度。同时,介绍了热激蛋白 (HSP) 的表达分析。 3. 逆境生理指标测定:系统总结了衡量植物抗逆性的关键指标,如丙二醛 (MDA) 含量测定(评估脂质过氧化损伤)、活性氧 (ROS) 产生的测定(如超氧化物、过氧化氢的荧光探针检测)以及抗氧化酶系统(如 SOD, POD, CAT)的酶活测定。 第五部分:数据处理、统计学与实验设计 优秀的实验必须建立在严谨的设计和可靠的统计分析之上。本部分强调了生物学重复、技术重复的设置原则。详细介绍了方差分析 (ANOVA) 在比较多组间差异中的应用,包括单因素、双因素 ANOVA,以及事后检验(如 Tukey’s HSD)。对于涉及时间序列或梯度处理的数据,讲解了回归分析的应用。最后,提供了如何撰写高质量材料与方法部分的指导,确保实验的可重复性。 总结 《植物生理学研究方法与技术》力求提供一个从宏观到微观、从现象到机制的完整技术框架。本书的特点在于其对实验“细节”的关注,旨在帮助研究人员减少盲目摸索的时间,提高实验的准确性和可重复性,最终加速植物生理学领域的前沿探索。

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读后感

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用户评价

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这本书,我真是爱不释手,简直是为我这种对微观世界充满好奇心的人量身定做的。首先,它的内容组织简直是教科书级别的典范,逻辑清晰得让人惊叹。从微生物的形态结构到生理生化特性,再到它们在环境、工业和医学中的应用,脉络分明,层层递进,就像是有人牵着你的手,一步一步深入到那个奇妙的细菌、真菌和病毒的王国。我特别欣赏作者在介绍复杂概念时所采用的比喻和类比,那些原本晦涩难懂的分子机制,经过生动的阐释后,立刻变得形象起来,不再是冷冰冰的文字堆砌。比如,在描述细胞壁的合成过程时,书中引用了一个关于“建筑材料运输和安装”的比喻,一下子就抓住了核心,我甚至能“看见”那些酶是如何精确无误地将肽聚糖单体组装起来的。此外,这本书的排版也十分考究,大量的图表和高清的显微镜照片,质量之高让人赞叹,为理解那些细微的结构提供了极佳的视觉辅助,这比单纯依靠文字描述有效得多,让学习过程变得既高效又愉悦,完全没有传统教材那种枯燥乏味的感觉。

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我必须得提一下这本书在资源整合方面的独到之处。它似乎是一个精心策划的“学习生态系统”的入口。在每一章的末尾,它都没有简单地列出参考书目,而是提供了一系列经过筛选的、高质量的在线资源链接。这些链接指向了权威的微生物资源数据库、实验视频教程库,甚至还有一些顶尖学术期刊中与本章内容高度相关的综述文章。这对于我们这些需要不断追赶学科前沿的学习者来说,简直是如虎添翼。我利用书上提供的链接找到了几个关于噬菌体疗法的最新研究报告,这些信息非常新颖,足以支撑我撰写一篇小型报告。这本书不仅仅是一本静态的知识载体,更像是一个动态的知识门户,它教会你如何去“找”知识,如何去“验证”知识,这才是现代科学教育中最宝贵的能力之一。

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说实话,我拿到这套书的时候,原本是抱着“又是一本理论堆砌的参考书”的心理准备的,但很快我就被它扎实的实践指导部分彻底征服了。这本书的价值绝不仅仅停留在理论层面,它真正厉害的地方在于,它将理论知识与实际操作无缝对接起来,仿佛一位经验丰富的老教授就在你身边指导。每一步实验流程的描述都详尽到了令人发指的地步,从试剂的精确配比、灭菌方法的选择,到接种技术的要领,乃至污染发生时应如何处理,书中都做了详尽的预案和操作细节提示。我按照书中的指导进行了一次革兰氏染色实验,以往总是出现各种莫名其妙的失败,但这次,由于书中特别强调了“固定时间”和“滴加脱色剂的瞬间观察”,我竟然得到了教科书级别清晰的阳性菌和阴性菌的区分图像。这种即时的、可验证的成功,极大地增强了我对这门学科的信心,它不仅仅是知识的传递,更是一种动手能力的系统性训练。

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这本书的深度和广度,远超我预期的“指导”范畴。它没有满足于基础实验的重复,而是巧妙地引入了许多前沿的研究思路和技术方法。比如,在讲解微生物遗传学部分时,它不仅仅罗列了转化、接合、转导的基础原理,还进一步探讨了基因编辑技术(如CRISPR-Cas9系统)在微生物改造中的最新进展和伦理考量。这使得这本书不仅适合初学者打下坚实的基础,也为高年级学生或研究生进行课题设计提供了极具启发性的视角。我印象最深的是关于环境微生物组分析的那一章,书中详细介绍了宏基因组测序的基本流程和数据分析的初步思路,这在很多同类教材中是难以见到的。它让你意识到,微生物学早已不是在培养皿里玩“点滴”的游戏,而是已经迈入了大数据和系统生物学的宏大领域,极大地拓宽了我们对这个学科未来发展的想象空间。

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从阅读体验上来说,这本书的行文风格是极其严谨而又不失温度的。它不像某些学术著作那样高冷得让人望而却步,而是带着一种对初学者的体贴和耐心。作者在描述一些关键操作时的措辞,透露出一种“过来人”的关切。例如,在涉及使用高压灭菌锅时,书中用加粗的字体反复提醒了安全注意事项,并配上了专门的图示解释了压力释放的正确程序,这种对安全性的极端重视,体现了作者对实验者福祉的深切关怀。此外,书中穿插的“历史小故事”或“科学家简介”,比如关于巴斯德或科赫的那些逸闻趣事,极大地调剂了学习的单调性,使得阅读过程像是在探索一段充满人性光辉的科学史诗,而不是单纯地记忆知识点,这种人文精神的融入,让这本书读起来充满了人情味。

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