果蔬采后生理生化实验指导 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

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出版者:中国轻工业

作者:曹建康

出品人:

页数:176

译者:

出版时间:2007-9

价格:22.00元

装帧:

isbn号码:9787501960033

丛书系列:

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《现代分子生物学技术与应用》 本书导读： 在生命科学飞速发展的今天，分子生物学已成为理解生命本质、推动生物技术进步的核心驱动力。本书《现代分子生物学技术与应用》旨在为生命科学领域的科研工作者、高校师生以及生物技术产业从业者提供一本全面、深入且注重实践操作的参考手册。它不仅系统梳理了分子生物学领域经典且前沿的核心技术，更侧重于这些技术在实际科研、诊断和工业生产中的具体应用策略和操作要点。 第一部分：分子生物学基础与核心技术原理 本部分作为全书的理论基石，详细阐述了分子生物学领域必须掌握的基础知识体系。 第一章：核酸的结构、功能与分离纯化 本章首先回顾了DNA和RNA在分子水平上的结构特性及其在基因表达调控中的关键作用。随后，深入探讨了从不同生物材料（如植物组织、动物细胞、微生物菌体）中高效提取和纯化高质量总核酸（基因组DNA、质粒DNA、总RNA）的各种方法。重点对比了基于溶液法（如酚氯仿提取）、固相萃取法（如硅胶柱层析）在提取效率、纯度和适用范围上的差异。此外，还详细介绍了核酸的定量与定性分析技术，包括分光光度法、荧光定量法（如使用Nanodrop和Qubit系统）以及琼脂糖凝胶电泳的判读技巧。 第二章：聚合酶链式反应（PCR）及其变体 PCR技术是现代分子生物学的“魔剪”，本章对其原理进行了详尽的剖析，包括Taq酶的作用机制、退火温度的精确计算与优化、引物设计的策略与注意事项。随后，系统介绍了PCR的多种重要变体技术： 实时荧光定量PCR (RT-qPCR/qPCR)： 详细讲解了SYBR Green法和探针法（如TaqMan探针）的反应体系构建、标准曲线的绘制、内参基因的选择与校正，以及其在基因表达水平定量分析中的应用。 逆转录PCR (RT-PCR)： 着重阐述了cDNA的合成步骤，以及一步法和两步法RT-PCR的优劣势对比。 高保真PCR与长片段PCR： 讨论了提高DNA复制准确性的酶学改进和反应条件优化。 第三章：核酸的分子克隆技术 分子克隆是实现基因功能研究和蛋白质表达的基础。本章聚焦于重组DNA技术的构建流程： 限制性内切酶的应用： 酶切位点的选择、粘性末端与平末端的利用，以及酶切效率的评估。 载体的选择与构建： 详细介绍了表达载体、克隆载体、穿梭载体（如酵母双杂交载体）的关键元件（启动子、选择标记、复制起点）和设计原则。 连接技术： 重点讲解了传统粘性末端连接、平末端连接、以及基于同源重组（如Gibson Assembly）和限制性内切酶独立克隆（如TOPO克隆）等高效连接方法的原理和操作流程。 宿主菌转化与筛选： 阐述了感受态细胞的制备、热激法与电穿孔法在大肠杆菌和真核细胞中的应用，以及抗性筛选和蓝白斑筛选的原理。 第二部分：高通量测序与基因组学技术 随着二代测序技术（NGS）的普及，本部分侧重于处理大规模基因组数据和进行高通量实验的技术。 第四章：新一代测序（NGS）技术原理与流程 本章系统介绍了Illumina测序平台的核心技术——边合成边测序（Sequencing by Synthesis, SBS）的原理，以及其他主流平台（如PacBio、Oxford Nanopore）的长读长测序技术特点。详细解析了NGS文库的制备流程，包括DNA片段化、接头连接、文库扩增和质控标准（如使用Bioanalyzer）。 第五章：NGS在不同领域的应用 本章将理论与应用紧密结合： 全基因组测序（WGS）与重测序： 关注数据预处理（质控、比对）和变异检测（SNP、InDel）。 转录组学（RNA-Seq）： 探讨mRNA富集、cDNA文库构建以及用于差异表达基因分析的生物信息学流程。 表观遗传学测序（ChIP-Seq & ATAC-Seq）： 详细介绍染色质免疫共沉淀（ChIP）的技术细节，以及核小体开放性测序（ATAC-Seq）在分析基因组可及性方面的应用。 第六章：基因编辑技术：CRISPR/Cas系统 CRISPR/Cas9已成为生命科学研究的革命性工具。本章深入剖析了Cas9酶的作用机制、gRNA的设计原则与脱靶效应的控制。重点介绍利用CRISPR系统实现精确的基因敲除、敲入、定点突变的技术策略，以及其在动物模型构建和细胞系改造中的实际案例分析。 第三部分：蛋白质组学与功能分析技术 理解基因信息最终要落脚于蛋白质的功能实现，本部分聚焦于蛋白质的表达、分离和功能鉴定。 第七章：蛋白质的提取、分离与鉴定 本章涵盖了蛋白质研究的关键步骤： 提取与溶解： 针对不同组织和细胞器（如细胞膜蛋白、核蛋白）的优化裂解液配方和操作技巧。 电泳技术： 详细介绍SDS-PAGE分离原理，并讲解了等电点聚焦（IEF）和双向电泳（2D-PAGE）在蛋白质组学研究中的应用。 蛋白质印迹法（Western Blotting）： 详细指导了从一抗选择、二抗标记、显色到信号定量的全流程，强调了定量结果的可重复性。 第八章：蛋白质的相互作用研究 探索蛋白质网络是理解细胞信号通路的关键。本章详细介绍了研究蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）的主要技术： 酵母双杂交（Y2H）： 原理、实验设计和结果判读。 免疫共沉淀（Co-IP）与蛋白质谱分析： 如何利用抗体捕获复合物并结合质谱进行鉴定。 荧光互补实验（FRET/BRET）： 用于在活细胞内实时监测蛋白质相互作用的动态变化。 第九章：蛋白质表达与纯化 本章是生物制药和酶学研究的实践指南。重点讲解了： 原核表达系统（大肠杆菌）的优化： 密码子优化、诱导时机控制、低共溶诱导策略。 真核表达系统（昆虫细胞、哺乳动物细胞）的优势： 适用于复杂翻译后修饰蛋白的表达。 层析纯化技术： 详细阐述了亲和层析（如His-tag/GST-tag）、离子交换层析和分子筛层析的原理、介质选择和梯度洗脱优化，以获得高纯度的目标蛋白。 总结与展望 本书的编写风格严谨，注重实验的规范性和结果的可重复性。书中收录了大量实用的操作流程图、故障排除指南（Troubleshooting）以及数据分析的建议，确保读者能够将所学理论迅速转化为成功的实验操作。通过对这些现代分子生物学技术的掌握，读者将能独立设计和执行复杂的研究项目，为生命科学的深入探索奠定坚实的技术基础。

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我必须强调这本书在“操作性”上的深度和广度，这完全超出了我对一本“指导”书籍的预期。它真正做到了面向一线实验工作者的实用指南。书中对实验材料的预处理环节，比如不同成熟度果实的筛选标准、清洗剂的选择及其残留风险评估，都做了极为细致的描述，这些往往是很多教材会轻描淡写一带而过的地方，却恰恰是影响最终数据准确性的关键因素。更难能可贵的是，它针对实验中可能出现的“疑难杂症”设置了专门的排错章节。比如，如果测定结果出现明显的偏差，书中提供了系统的判断流程图：是试剂失效、仪器校准问题，还是样本本身已发生不可逆降解？这些基于大量实践经验的总结，比单纯的教科书理论要宝贵得多，简直是为我这个经常与突发状况打交道的实验员量身定做的“急救手册”。它教会我的不仅仅是如何操作，更是如何像一个经验丰富的老手一样思考和解决问题。

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这本书的排版和设计简直是一场视觉的盛宴！封面采用了那种带着微微磨砂质感的纸张，触感温润，拿在手里沉甸甸的，一看就知道是精心制作的。内页的纸张选择也非常考究，白色中带着一丝柔和的米黄，长时间阅读眼睛也不会感到疲劳。最让我印象深刻的是那些插图和图表的呈现方式，色彩的运用极其细腻，无论是复杂的生化反应路径图还是各种实验设备的结构示意图，都清晰锐利，标注的字体大小和位置都经过了细致的权衡，完全没有那种廉价教材的粗糙感。作者在版式设计上显然下足了功夫，留白恰到好处，使得原本密密麻麻的专业术语和步骤说明看起来井井有条，即便是初次接触这些内容的读者，也能在视觉上感到一种秩序美。装订工艺也十分扎实，书脊平整，翻页顺滑，感觉这是一本可以长久陪伴我的工具书，而不是那种读完一次就束之高阁的快消品。这种对细节的极致追求，让阅读本身变成了一种享受，极大地提升了学习的愉悦感，让人忍不住想立刻动手实践书中所述的每一个环节。

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这本书的行文逻辑严谨得像一台精密的瑞士钟表，每一个章节的推进都遵循着从宏观到微观的递进规律，过渡得天衣无缝。它不像有些指导手册那样，只是简单地罗列操作步骤，而是深入剖析了每一步背后的生物学原理和化学基础。举个例子，当我们处理果蔬样本进行酶活性测定时，作者不仅提供了详尽的试剂配比和反应时间，更在旁侧用一个独立的小框，简明扼要地解释了该酶系在采后衰老过程中扮演的核心角色，以及干扰因素可能来自哪些生化途径。这种“知其然，更知其所以然”的叙事方式，极大地满足了我对知识深度刨根问底的渴望。尤其赞赏的是，它在描述那些稍微晦涩难懂的理论概念时，采用了大量的比喻和类比，将抽象的分子机制具体化，使得即便是跨学科背景的实验人员也能迅速捕捉到核心要义，避免了陷入纯理论的泥潭。这种结构化的知识梳理，让整个实验流程的学习过程变得非常高效和踏实。

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这本书在对现代分析技术的整合上展现出了极强的时代前沿性，绝非一本过时的参考书可比。我惊喜地发现，书中不仅涵盖了传统的比色法和滴定技术，还相当深入地介绍了高精尖仪器的应用指导，例如如何规范地进行液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）在特定代谢物分析中的方法验证和数据解析。对于每一个涉及复杂仪器的实验流程，作者都非常负责任地提供了初步的SOP模板，并清晰地指出了在采后生理研究中，使用该技术可能遇到的特有挑战，比如样本基质效应的消除策略。这对于我们实验室正在升级换代实验平台时，提供了极具价值的理论支撑和操作参考。它没有停留在描述“原理是什么”，而是聚焦于“如何用最先进的手段，稳定可靠地获得可信数据”，这种面向未来的视野，让这本书的价值得到了几何级的提升，确保了我们的研究方法不会落后于学科发展的步伐。

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这本书的语言风格非常独特，它巧妙地平衡了学术的严谨性与人文化的关怀。作者的文字功底深厚，在讲解那些冗长而复杂的步骤时，总能适时地穿插一些历史背景或者研究者在发现该方法的过程中所经历的曲折，使得冰冷的科学流程瞬间有了温度和故事感。这使得阅读过程充满了一种探索的乐趣，而不是被动地接受指令。比如，在介绍维生素C降解动力学时，作者描绘了早期科学家们如何克服氧化难题的场景，这极大地激发了我对这类基础研究的敬畏之心。此外，书中的专业术语表述清晰，即便是第一次接触的读者，也能感受到作者试图将复杂的概念“翻译”成更容易理解的形式的努力。整体而言，这本指导书读起来，就像有一位经验丰富、学识渊博但又极其耐心的导师，在你身边，手把手地引导你完成每一个实验环节，让人感到无比的安心和受鼓舞。

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