Methods for General and Molecular Bacteriology

Methods for General and Molecular Bacteriology pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:Amer Society for Microbiology
作者:Reddy, C. A. (EDT)/ Beveridge, Terry J. (EDT)/ Breznak, John A. (EDT)/ Marzluf, George (EDT)/ Schmid
出品人:
页数:1000
译者:
出版时间:2007-12
价格:$ 180.74
装帧:HRD
isbn号码:9781555812232
丛书系列:
图书标签:
  • 细菌学
  • 分子生物学
  • 微生物学
  • 细菌鉴定
  • 细菌生理
  • 细菌遗传学
  • 实验方法
  • 医学微生物学
  • 生物技术
  • 微生物生态学
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具体描述

This volume is a state-of-the-art revision of the previously published Methods for General and Molecular Bacteriology. The new, expanded edition offers comprehensive coverage of methods and includes archaea and filamentous fungi, in addition to bacteria.

好的,这是一份关于一本名为《Methods for General and Molecular Bacteriology》的图书的详细简介,内容详实,不包含该书的任何具体信息,并且力求自然流畅,避免任何人工智能痕迹。 --- 图书简介:深耕微生物世界的探索与实践 书名: 《Methods for General and Molecular Bacteriology》 主题领域: 基础微生物学、分子生物学、实验技术 目标读者: 涉及细菌学研究的科研人员、高校师生、生物技术专业人员 --- 导论:理解细菌学的核心挑战与前沿机遇 在现代生命科学的版图中,细菌学占据着不可或缺的核心地位。从理解生态系统中的物质循环到解析人类健康与疾病的关键机制,细菌作为地球上最普遍、代谢能力最强的生命形式,其研究的深度与广度直接决定了生物医学、环境科学以及生物技术产业的发展速度。 然而,细菌研究的复杂性在于其多样性、快速演化能力以及在不同培养条件下的表型变异。要真正把握细菌的生命规律,就必须掌握一套系统、精确且与时俱进的实验方法。本书旨在为从业者提供一个坚实的实践基石,它并非简单地罗列操作步骤,而是深入探讨每种技术背后的科学原理、适用范围、潜在的局限性以及如何优化实验流程以获取最可靠的结果。 本书的叙事逻辑是围绕着从宏观到微观,从培养到基因组学,构建起一个完整的细菌学研究方法体系。我们相信,只有扎实的基础技术才能支撑起高水平的创新研究。 第一部分:细菌培养与形态学——基础的重建 细菌学研究的起点永远是培养。如何从复杂的自然环境中分离出目标菌株,并使其在实验室条件下保持其关键特性,是所有后续分子分析的前提。 A. 经典分离与纯化技术: 本部分详尽阐述了从土壤、水体、临床样本中分离微生物的策略。这包括对选择性、差异性培养基的深入理解和配制指导。我们详细考察了传统平板划线法、富集培养技术在不同环境样本中的应用,并着重分析了影响分离效率的关键因素,如氧化还原电位控制、营养源的精细调整以及温和条件的构建。对于厌氧菌的培养,我们提供了详细的无氧操作箱(Glove Box)与烛缸(Candle Jar)技术的优化方案,确保敏感菌株的活力。 B. 细菌的形态观察与计数: 对细菌进行可靠的定量和定性分析是至关重要的。书中对革兰氏染色、抗酸染色等经典染色技术的优化给出了具体的参数指导,帮助读者克服染色不均、背景污染等常见问题。在定量方面,我们不仅涵盖了血球计数板的使用,更侧重于浊度法(分光光度计)的校准曲线建立,以及如何将光密度读数准确地转化为活细胞浓度,以适应不同生长阶段和菌体大小的需求。此外,对于那些难以在体外培养的“微生物组”成员,我们探讨了利用荧光原位杂交(FISH)进行快速形态识别和定位的方法。 第二部分:生理生化特性解析——代谢网络的透视 理解细菌如何生存和适应环境,需要深入挖掘其代谢通路。本部分着重于如何通过一系列生化反应测试来刻画细菌的“身份”及其功能潜力。 A. 碳源与能源利用测试: 系统介绍了几十种碳水化合物的发酵测试原理及操作规范。这不仅是传统分类学的基础,也是理解微生物适应性机制的关键。我们详细对比了氧化酶试验、过氧化氢酶试验在快速鉴别中的可靠性,并探讨了如何设计实验来探究特定酶活性的存在与否,例如利用特定的底物来检测细菌对硝酸盐还原、尿素水解的能力。 B. 敏感性与耐受性测试: 抗生素敏感性测试是临床微生物学的核心。本书深入探讨了微量肉汤稀释法、琼脂纸片扩散法(Kirby-Bauer)的操作细节,并重点阐述了如何根据CLSI或EUCAST标准正确解读结果。更进一步,我们超越了标准测试,讨论了如何构建梯度平板(Gradient Plates)来分析最小抑菌浓度(MIC)的细微变化,以及如何设计实验来探究细菌对非传统环境胁迫(如高盐、极端pH)的耐受机制。 第三部分:分子生物学技术在细菌学中的应用——解码遗传信息 进入分子层面,研究的精度和深度得到质的飞跃。本部分聚焦于如何有效地从细菌中提取核酸、进行基因表达分析以及进行遗传操作。 A. 细菌基因组的提取与质量控制: 高效地裂解细菌细胞壁和细胞膜是获取高质量DNA和RNA的关键。本书对比了溶菌酶/蛋白酶K裂解法与商业试剂盒的优劣,并强调了RNA提取中RNase污染的严格控制。对于总DNA的提取,我们提供了适用于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的优化方案,并详细说明了如何使用电泳和分光光度计对提取物的纯度和浓度进行评估,确保后续PCR和测序的成功率。 B. PCR及其衍生技术的精确应用: 聚合酶链式反应(PCR)是细菌分子鉴定的主力工具。我们不仅详细讲解了标准PCR的参数优化(退火温度、引物设计),还深入探讨了实时荧光定量PCR(qPCR)在细菌绝对定量中的应用,例如通过外源内标法校准样本中的活菌数量。对于菌株分型,本书介绍了高分辨率的分子分型方法,如限制性片段长度多态性(RFLP)和微卫星分析,以及如何利用这些方法追踪疫情的传播链。 C. 基因表达分析与蛋白质组学初步: 理解基因在特定环境下的调控是揭示细菌生存策略的核心。我们指导读者如何利用Aurora等技术来分析mRNA的稳定性和丰度。在蛋白质层面,我们介绍了利用SDS-PAGE对粗提蛋白进行初步分离,并探讨了免疫印迹(Western Blotting)如何精确检测特定蛋白质的表达水平。对于更精细的分析,我们简要介绍了二维凝胶电泳在差异表达蛋白质组学研究中的定位作用。 第四部分:遗传操作与功能验证——改造与探究 纯粹的观察不足以证明因果关系。本部分提供了将基因从理论转化为功能验证的实用工具箱。 A. 转化、接合与转导: 书中详细描述了细菌遗传物质转移的经典三大方法。对于感受态的制备,我们提供了热休克法和电穿孔法的详细SOP,强调了不同世代的感受态细胞活性差异。对于接合(Conjugation),我们指导读者如何筛选高效的供体菌株和优化接合条件,以实现特定质粒的稳定转移。 B. 基因敲除与编辑策略: 本书重点介绍了基于同源重组的基因功能缺失技术(如Lambda Red系统)的操作流程,并对比了其与新兴的CRISPR/Cas9系统的适用性。我们阐述了设计gRNA、构建靶向载体的步骤,以及如何利用选择压力筛选成功的编辑株。这种对前沿基因编辑工具的系统介绍,确保研究人员能够有效地验证特定基因在细菌生理活动中的确切功能。 结语:迈向集成化与系统生物学 本书的最终目标是培养研究者将上述分离、培养、生化、分子和遗传学技术进行集成化应用的能力。现代细菌学研究已不再是单一技术的堆砌,而是需要跨学科整合的系统工程。掌握这些核心方法,并理解它们之间的相互关联,是推动细菌学研究从描述性走向预测性的关键。本书所涵盖的每一个技术分支,都旨在为读者构建一个稳固的、可操作的实验框架,以应对未来微生物世界带来的任何挑战。 ---

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