Principles and Techniques of Biochemistry and Molecular Biology

Principles and Techniques of Biochemistry and Molecular Biology pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:Cambridge University Press
作者:Wilson, Keith
出品人:
页数:759
译者:
出版时间:2010-3-4
价格:GBP 37.99
装帧:Paperback
isbn号码:9780521731676
丛书系列:
图书标签:
  • 生物化学
  • 生物
  • 化学
  • Biochemistry
  • Molecular Biology
  • Biotechnology
  • Genetics
  • Cell Biology
  • Biomolecules
  • Metabolism
  • Enzymology
  • Proteomics
  • Genomics
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具体描述

This best-selling undergraduate textbook provides an introduction to key experimental techniques from across the biosciences. It uniquely integrates the theories and practices that drive the fields of biology and medicine, comprehensively covering both the methods students will encounter in lab classes and those that underpin recent advances and discoveries. Its problem-solving approach continues with worked examples that set a challenge and then show students how the challenge is met. New to this edition are case studies, for example, that illustrate the relevance of the principles and techniques to the diagnosis and treatment of individual patients. Coverage is expanded to include a section on stem cells, chapters on immunochemical techniques and spectroscopy techniques, and additional chapters on drug discovery and development, and clinical biochemistry. Experimental design and the statistical analysis of data are emphasised throughout to ensure students are equipped to successfully plan their own experiments and examine the results obtained.

生命科学前沿探索:分子生物学与生物化学的深度融合 内容提要 本书旨在为读者提供一个全面、深入且与时俱进的分子生物学与生物化学交叉学科知识体系。我们聚焦于阐述生命活动在分子层面的基本原理、核心技术以及当前研究的前沿进展。全书结构严谨,内容涵盖了从宏观生命现象到微观分子机制的各个层面,特别强调了结构、功能与调控之间的内在联系。 本书的特色在于深度融合了传统生物化学的严谨性与现代分子生物学的动态视角,力求展现一个活泼、互联的生命科学图景。内容侧重于对关键分子(如蛋白质、核酸、脂质)的结构解析、代谢途径的精细调控,以及基因表达的复杂网络。此外,我们还详细讨论了新兴的、革命性的研究工具和技术,这些工具正不断推动着我们对生命系统认知深度的拓展。 第一部分:生命分子的结构与功能基础 第一章:生物大分子的化学基石 本章首先回顾了构成生命体的基本有机分子——水、碳水化合物、脂质、氨基酸和核苷酸的化学特性及其在生命系统中的基础作用。我们深入探讨了化学键的类型、分子间相互作用力(如氢键、范德华力、疏水作用)如何决定生物分子的三维构象。重点分析了氨基酸侧链的化学多样性如何赋予蛋白质广泛的功能范围。 第二章:蛋白质的折叠、结构与动力学 蛋白质是生命活动的主要执行者。本章详细阐述了蛋白质的一级、二级、三级和四级结构,并深入解析了驱动蛋白质正确折叠的分子机制,包括伴侣蛋白的作用和折叠错误的后果(如错误折叠相关疾病)。我们通过实例分析了酶的活性中心设计、变构调控以及蛋白质在细胞骨架、膜运输中的动态行为,强调结构变化如何直接导致功能转换。 第三章:核酸的物理化学与遗传信息的存储 本章聚焦于DNA和RNA的分子结构,包括碱基堆积、双螺旋的稳定性和碱基错配修复的机制。我们探讨了染色质的组织结构——核小体如何实现对基因组的紧密包装和选择性开启。此外,还涵盖了RNA作为信息载体、催化剂和调控因子(如tRNA, rRNA, snRNA, miRNA, lncRNA)的多功能性。 第四章:生物膜的结构与跨膜信号转导 生物膜作为细胞的边界和功能区室,其结构与功能密不可分。本章详细描绘了流体镶嵌模型,解析了脂质双层的不对称性、膜的流动性以及膜蛋白(通道、载体、受体)的工作原理。随后,我们系统地梳理了细胞如何通过膜上受体接收环境信号,并通过复杂的第二信使系统将信号传递至细胞核或细胞质,实现精准的生理反应。 第二部分:中心法则的精确调控 第五章:基因组的复制与维持 本章深入解析了DNA复制的分子机器——复制叉的组装与协调运动。我们不仅关注DNA聚合酶的保真性,还详细讨论了拓扑异构酶、解旋酶等辅助蛋白的关键作用。此外,本章还涵盖了基因组的维护机制,包括DNA修复通路(如错配修复、核苷酸切除修复、碱基切除修复)如何确保遗传信息的稳定性。 第六章:转录的启动与调控艺术 转录是基因表达的第一步调控关口。本章详细区分了原核生物和真核生物中RNA聚合酶的结构与功能。在真核生物中,我们着重分析了复杂的转录因子网络、染色质重塑因子(如SWI/SNF复合物)以及染色质修饰(如组蛋白乙酰化和甲基化)如何协同作用,精确控制特定基因的开启或沉默。 第七章:翻译的效率与精准性 本章聚焦于遗传密码的破译过程。我们详细阐述了核糖体作为“分子机器”的结构与催化机制,以及tRNA如何充当“分子适配器”。重点讨论了翻译的起始、延伸和终止的分子步骤,并分析了翻译后调控机制,如氨基酸的密码子偏好性、阅读框移位以及mRNA降解通路对蛋白质合成速率的精细控制。 第八章:基因表达后的修饰与命运决定 基因表达并非止步于蛋白质的合成。本章探讨了蛋白质的翻译后修饰(PTMs)在功能实现中的核心地位,如磷酸化、泛素化、糖基化等。我们还讨论了mRNA和蛋白质的稳定性调控,包括miRNA介导的沉默机制和蛋白质降解系统(如蛋白酶体)如何对细胞内的蛋白质库进行动态管理和清除。 第三部分:代谢流与能量转换的动态平衡 第九章:生物能学的基本原理与ATP的循环 本章以热力学和动力学的视角审视生命活动所需的能量驱动力。我们阐述了氧化还原电位、自由能变(ΔG)在生物化学反应中的意义。重点解析了ATP作为通用能量货币的结构基础及其在能量耦合反应中的作用,为理解更复杂的代谢网络奠定基础。 第十章:基础代谢途径的调控网络 本章系统梳理了糖酵解、三羧酸循环、氧化磷酸化以及光合作用等核心代谢途径。我们深入探讨了关键酶(如磷酸果糖激酶、柠檬酸合酶)是如何通过底物浓度、产物抑制和激素信号被精确调控的,从而确保细胞在不同营养和能量需求下的代谢适应性。 第十一章:大分子合成的精细控制 本章关注生命构建模块(如核苷酸、脂质和氨基酸)的合成与分解。我们解析了脂肪酸的合成与β-氧化途径的耦联与反向调控机制,以及固醇类化合物的生物合成。对于氨基酸的代谢,我们重点讨论了尿素循环和氨基酸分解产物如何被重新整合进入中心代谢流。 第四部分:先进技术与未来展望 第十二章:重组DNA技术与基因工程的基石 本章详细介绍了现代分子生物学研究中不可或缺的核心技术。内容包括限制性内切酶的选择性切割、PCR技术的原理与变体(如qPCR),以及构建和筛选重组DNA载体的策略。我们阐述了如何利用这些工具进行基因克隆、表达和定点突变。 第十三章:蛋白质功能研究的前沿方法 本章聚焦于解析蛋白质复杂功能的先进技术。我们涵盖了蛋白质相互作用组学研究(如酵母双杂交、共免疫沉淀/质谱分析)、高分辨率结构解析技术(如冷冻电镜Cryo-EM),以及功能性筛选平台(如高通量筛选)。这些技术如何帮助科学家在生理相关条件下描绘分子机器的运作蓝图。 第十四章:基因组学、转录组学与蛋白质组学的整合 本章展望了“组学”技术对生命科学的革命性影响。我们探讨了新一代测序技术(NGS)如何以前所未有的精度揭示基因组变异、转录本多样性以及蛋白质表达谱。重点讨论了生物信息学工具如何将海量数据转化为可解释的生物学洞察,指导疾病机制的理解和新疗法的开发。 第十五章:系统生物学与计算模型构建 本章讨论了如何超越对单个分子或途径的分析,转向对整个细胞或系统层面的理解。我们介绍了建立代谢网络、信号网络和基因调控网络的计算方法。通过模拟和建模,本章旨在展示如何预测系统对扰动的响应,并设计更优化的生物工程策略。 --- 本书的每一章节都辅以丰富的图表、案例研究和思考题,确保读者不仅掌握了事实性知识,更培养了运用分子生物学和生物化学原理分析复杂生命现象的能力。本书是致力于生命科学、医学、药学及生物工程领域学习者和研究人员的理想参考资料。

作者简介

目录信息

Table of Contents
1. General principles K. Wilson
2. Cell culture techniques A. R. Baydoun
3. Centrifugation K. Ohlendieck
4. Microscopy S. W. Paddock
5. Molecular biology, bioformatics and basic techniques R. Rapley
6. Recombinant DNA and genetic analysis R. Rapley
7. Immunological techniques R. Burns
8. Protein structure, purification, characterisation and functional analysis J. M. Walker
9. Mass spectrometric techniques A. Aitken
10. Electrophoretic techniques J. Walker
11. Chromatographic techniques K. Wilson
12. Spectroscopic techniques I A. Hofmann
13. Spectroscopic techniques II A. Hofmann
14. Radioisotope techniques R. Slater
15. Enzymes K. Wilson
16. Principles of clinical biochemistry J. Fyffe and K. Wilson
17. Cell membrane receptors K. Wilson
18. Drug discovery and development K. Wilson.
· · · · · · (收起)

读后感

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用户评价

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这本书的名字,听起来就充满了知识的力量,让我对它寄予厚望,希望能从中汲取养分,解决我在学习过程中遇到的实际挑战。我一直在思考,当我们在研究基因的功能时,如何才能准确地设计siRNA或shRNA来沉默特定基因,并评估其沉默效率?书中关于RNA干扰(RNAi)的原理、设计策略和评估方法,是否能给予我足够的理论支持和实践指导?同样,在进行基因过表达研究时,如何选择合适的载体系统,以及如何高效地将外源基因导入目标细胞,书中关于转染和病毒载体递送技术的详细介绍,是否能帮助我避免一些常见的技术陷阱?我还需要了解,在研究细胞周期调控机制时,如何使用流式细胞仪来分析细胞周期的各个阶段,以及如何利用免疫荧光技术来检测细胞内特定蛋白的定位和表达,这些技术在生物化学和分子生物学研究中至关重要,我期待书中能有深入的讲解。而且,在研究DNA损伤修复机制时,如何利用彗星实验等技术来评估DNA损伤程度,书中是否能提供相关的技术细节和实验范例?我对这些具体的技术应用非常感兴趣,希望能在这本书中找到详尽的答案。

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这本书的书名,在我看来,就如同打开一扇通往生命奥秘的大门。我一直对细胞是如何感知外界环境并作出反应感到好奇。例如,细胞膜上的受体蛋白是如何识别特定的信号分子,并引发下游的信号级联反应的?书中关于受体生物学和信号转导的机制,是否能提供详尽的解释?我尤其想了解,在研究炎症和免疫反应时,细胞因子是如何发挥作用的?它们又是如何与其他免疫细胞相互作用,共同构建起机体的防御体系?书中对免疫生物学和细胞信号通路的交叉研究,是否能给我带来新的启示?而且,我一直在思考,当细胞受到损伤时,它们是如何启动凋亡程序,从而维持机体的稳态的?书中对细胞凋亡机制的研究,是否能提供深入的讲解?我对这些关于细胞生命活动的基本原理非常感兴趣,希望能在这本书中找到它们清晰而全面的答案,为我的学习和研究打下坚实的基础。

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这本书的标题,毫不夸张地说,正是我的学习需求所在。我在学习过程中,经常会对各种生化反应的机理感到好奇,比如,在糖酵解途径中,每一个步骤的催化酶是如何工作的?它们是如何降低反应的活化能,从而加速反应的进行的?而到了三羧酸循环,又是如何将乙酰CoA彻底氧化,产生大量的ATP和还原性辅酶?书中对这些核心代谢途径的原理,是否进行了深入浅出的阐述?而且,我一直对能量转换的过程非常着迷,比如,线粒体中的氧化磷酸化是如何实现的?电子传递链上的各个复合物是如何协同工作的,最终产生ATP?书中对线粒体生物学和能量代谢的讲解,是否能帮助我构建一个完整的认识?此外,在研究细胞信号转导时,G蛋白偶联受体(GPCRs)是如何接收外部信号并将其传递到细胞内部的?书中对GPCRs信号通路的研究,是否能提供一些经典的案例和研究方法?我对这些基础的生物化学和细胞生物学原理非常感兴趣,希望能在这本书中找到它们清晰的解答。

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坦白说,当我拿起这本书时,我的脑海里涌现出无数个想要探究的问题。在进行蛋白质结构与功能的研究时,我一直想知道,X射线晶体学和核磁共振(NMR)技术,是如何帮助我们解析三维蛋白结构的?它们各自的优势和局限性是什么?而一旦我们获得了蛋白结构,又如何利用计算机模拟和分子动力学等方法来预测蛋白的活性和与其他分子的相互作用?书中关于蛋白质结构解析和计算生物学的技术,是否能给予我启发?另外,在研究基因调控网络时,启动子、增强子、沉默子等顺式作用元件是如何发挥作用的?我们又是如何通过实验来鉴定和定位这些元件的?书中对基因组学和表观遗传学的相关技术,是否能提供一些最新的进展?我一直对这些研究前沿的领域充满兴趣,希望能在这本书中找到相关的信息,从而拓宽我的视野,提升我的科研能力。

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当我第一次看到这本书的书名时,我就知道它可能是我一直在寻找的那一本。作为一名对生命科学充满好奇的学习者,我总是在努力理解那些隐藏在生命现象背后的微观世界。例如,在学习DNA复制的机制时,我总是被那些复杂的酶和蛋白相互作用所震撼,但同时我也想知道,我们是如何通过实验来证明这些相互作用的?书中关于DNA聚合酶、解旋酶、引物酶等关键酶的功能,以及它们是如何协同工作的,是否能提供一个清晰的分子图像?更重要的是,我希望能了解一些经典的分子生物学实验,比如Sanger测序法,它是如何一步步揭示DNA序列的?而到了现代,全基因组测序技术是如何发展起来的,它们又在哪些方面彻底改变了我们对基因组学的认识?此外,在研究基因表达调控时,转录因子是如何与DNA结合并激活或抑制基因转录的?书中是否能提供一些关于转录因子结合位点分析和基因调控网络构建的实例?我一直渴望能更深入地理解这些基本原理,并知道它们是如何通过实验技术来验证的。

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拿到这本书,我首先想到的是它是否能为我解决在分子诊断领域遇到的具体问题。比如,当我们需要快速准确地检测病原体DNA或RNA时,PCR技术是必不可少的,但如何优化PCR反应条件,提高灵敏度和特异性?书中对PCR技术的原理和应用,是否能提供最新的优化策略和注意事项?同样,在进行基因突变检测时,如何利用DNA测序技术或基因芯片技术来寻找致病突变?书中对高通量测序技术在临床诊断中的应用,是否能给予我深入的了解?我还需要了解,在研究肿瘤发生发展过程中,哪些关键的基因突变和信号通路发生了异常?书中对肿瘤生物学和分子标志物的研究,是否能提供相关的线索?我对这些与疾病诊断和治疗密切相关的分子生物学技术和原理非常感兴趣,希望能在这本书中找到指导性的信息。

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这本书的名称,让我对其内容充满了期待,尤其是那些能够解答我心中疑惑的技术细节。我一直在思考,当我们在研究基因的表达调控时,组蛋白修饰,比如乙酰化、甲基化等,是如何影响基因转录的?书中关于表观遗传学和染色质重塑的原理,是否能提供清晰的解释?我尤其想了解,如何通过ChIP-seq等技术来研究组蛋白修饰与基因表达之间的关系?此外,在进行蛋白质相互作用的研究时,酵母双杂交、共免疫沉淀(Co-IP)等技术是如何帮助我们发现蛋白之间的物理连接的?书中对这些蛋白相互作用研究技术的详细介绍,是否能帮助我更好地设计和解读实验结果?我一直对这些深入探究基因和蛋白功能的研究方法非常感兴趣,希望能在这本书中找到相关的理论支持和技术指导,为我的研究提供更多的思路。

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作为一名科研工作者,对新知识的渴求是永恒的。当我拿到这本书时,它所涵盖的主题——生物化学与分子生物学的原理和技术——深深吸引了我。我特别关注的是那些能够直接指导我实验操作的实用技巧。例如,在进行DNA克隆时,选择合适的限制性内切酶、优化酶切条件、以及高效连接载体和插入片段,这些细节往往决定了实验的成败。书中对这些经典技术是否进行了细致的解析,包括各种酶的特性、反应条件的影响因素,以及可能遇到的问题和解决方案?另外,在蛋白质表达与纯化方面,如何设计高效的表达载体,选择合适的宿主细胞,以及利用各种亲和层析、离子交换层析等方法获得高纯度的目标蛋白,书中是否提供了详尽的实验流程和优化策略?我还需要了解如何使用SDS-PAGE、Western Blot等技术来验证蛋白的表达和纯度,这些技术的原理、操作步骤和结果判读,书中是否能够给予我清晰的指引?对于一些新兴的分子生物学技术,比如PCR的各种变体(RT-PCR, qPCR等),它们在基因定量分析中的应用,书中是否有深入的介绍和实例?总而言之,我希望这本书能够成为我实验室里的“圣经”,随时翻阅,解决我在实际操作中遇到的种种难题,提升我的实验技能和研究效率。

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这本书的题目,直接点明了我想要学习的领域。我总是在思考,生命是如何通过精密的分子机制来维持其有序运行的。例如,细胞膜上的离子通道是如何选择性地允许特定离子通过,从而维持细胞内外电位差的?书中关于膜蛋白和离子通道的研究,是否能提供深入的讲解?我尤其想知道,在研究神经信号传递时,神经递质是如何释放和结合到受体的,以及这个过程又是如何被调控的?书中对神经生物学和分子药理学的相关内容,是否能给我带来新的理解?而且,当细胞面临外界刺激时,它们是如何启动各种应对机制的?比如,应激反应通路是如何被激活的?我一直对这些关于生命活动精细调控的分子机制充满好奇,希望能在这本书中找到它们清晰而详尽的阐述,从而更深刻地理解生命的本质。

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这本书,我从拿到手里那天起,就有一种沉甸甸的期待感,毕竟“Principles and Techniques of Biochemistry and Molecular Biology”这个书名本身就带着一种严谨和全面的气息,仿佛预示着一场知识的盛宴。然而,当我迫不及待地翻开它,试图从中寻找我一直以来在学习和研究中遇到的那些困扰我的具体问题——比如,在进行蛋白质纯化时,常常遇到各种意想不到的杂质,如何才能高效地分离出目标蛋白,书中关于层析技术的详尽阐述,是否能提供更深入的理解和切实可行的解决方案?又或者,在设计基因编辑实验时,如何才能最大程度地提高编辑效率并减少脱靶效应,书中关于CRISPR-Cas9等新兴技术的原理和应用,是否能给出足够的理论指导和技术细节?更进一步,当我面对复杂的细胞信号通路,试图绘制出其完整的分子图谱时,书中关于各类激酶、磷酸酶以及其他关键信号分子的相互作用机制,是否能提供一个清晰、连贯的视角,帮助我理解它们的动态调控?此外,在进行代谢组学研究时,如何有效地鉴定和定量小分子代谢物,并从中挖掘出有价值的生物标志物,书中关于质谱技术和色谱联用技术在代谢物分析中的应用,是否能提供最新的技术进展和实验策略?我怀揣着这些问题,希望能在这本书中找到答案,期待它能像一位经验丰富的导师,为我指点迷津,扫清学习道路上的障碍。

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