精编分子生物学实验指南

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出版者:科学出版社
作者:
出品人:
页数:0
译者:
出版时间:1998-6
价格:110.00元
装帧:
isbn号码:9787030064080
丛书系列:
图书标签:
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具体描述

《生命之钥:探索细胞奥秘的实验之旅》 在这本详尽的实验指南中,我们将带领你踏上一场激动人心的探索之旅,深入生命的微观世界,揭示细胞运行的奥秘。本书并非枯燥的理论堆砌,而是一份沉浸式的实践体验,旨在赋能每一位求知者,从基础操作到复杂技术的掌握,都能自信满满地迈出科学探索的第一步。 一、 细胞的基石:分子世界的入门 在深入细胞的复杂机制之前,我们首先要理解构成生命的最基本单元。本书将从分子层面入手,为你构建对生物大分子(核酸、蛋白质、脂质、糖类)的清晰认知。我们将详细介绍如何提取和纯化这些关键分子,让你亲手触摸到生命的物质基础。 核酸的提取与鉴定: 从新鲜生物材料中分离DNA和RNA,是所有分子生物学实验的起点。我们将一步步指导你完成细胞裂解、蛋白质去除、核酸沉淀等关键步骤,并通过紫外分光光度法、琼涅特法等技术,准确评估核酸的浓度和纯度。你将学会如何辨别DNA与RNA的形态,理解不同提取方法的原理和适用性。 蛋白质的分离与分析: 蛋白质是生命活动的主要执行者。本书将教授你如何通过不同级别的裂解和匀浆技术,高效释放细胞内的蛋白质。我们将重点介绍 SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)技术,让你学会制备凝胶、上样、电泳分离,并最终通过染色(如考马斯亮蓝)观察到不同分子量的蛋白质条带。同时,我们还将触及Western Blotting的基础,让你理解如何特异性地检测目标蛋白质。 脂质与糖类的提取: 了解细胞膜的构成和能量储存形式同样重要。我们将介绍针对脂质和糖类的温和提取方法,并提供初步的定性检测方案,帮助你理解这些分子在细胞功能中的角色。 二、 基因的密码:DNA的操控与表达 一旦掌握了分子的提取,我们将进入更具挑战性的领域——基因的操控与表达。这一部分将让你领略基因工程的魅力,亲手改写生命的蓝图。 限制性内切酶的应用: 限制性内切酶是基因剪刀。本书将详细介绍不同类型限制性酶的性质、识别序列和切割位点,并指导你设计实验,利用限制性酶进行DNA的特异性切割、连接,构建重组DNA分子。你将学会如何预测酶切图谱,并利用琼脂糖凝胶电泳分析酶切产物。 DNA片段的回收与纯化: 从凝胶中回收特定的DNA片段是基因克隆的关键步骤。我们将介绍基于凝胶回收试剂盒和酚氯仿提取等方法的优缺点,并指导你如何获得高纯度的DNA片段,为后续的连接反应做好准备。 分子克隆技术: 将目标基因片段插入载体,并在宿主细胞中进行扩增,是实现基因功能研究和蛋白质表达的基础。本书将详细讲解连接酶的作用机制,引导你完成DNA片段与载体的连接反应,并介绍转化(Transformation)技术,将重组质粒导入大肠杆菌等常用宿主细胞。你将学会如何通过平板涂布、筛选等步骤,获得阳性克隆。 PCR(聚合酶链式反应)技术: PCR是指数级扩增特定DNA片段的强大工具。我们将深入讲解PCR的原理,包括DNA聚合酶、引物、dNTPs的作用,以及变性、退火、延伸三个核心步骤。你将学会设计合理的PCR引物,优化反应条件,并利用凝胶电泳验证扩增产物。我们将还会介绍qPCR(定量PCR)的基础,让你了解如何精确测定DNA的拷贝数。 三、 蛋白质的世界:结构、功能与相互作用 基因的最终表达是功能强大的蛋白质。本部分将聚焦于蛋白质的结构、功能以及它们之间复杂的相互作用,揭示生命活动背后的精妙调控。 蛋白质表达与纯化: 除了从天然样本中提取蛋白质,重组蛋白的原核或真核表达也是研究蛋白质功能的重要手段。我们将介绍表达载体的构建,以及如何在宿主细胞中诱导蛋白表达。同时,你将学习到多种层析纯化技术,如亲和层析、离子交换层析、尺寸排阻层析等,如何一步步获得高纯度的目标蛋白。 蛋白质活性检测: 纯化后的蛋白质是否具有生物活性至关重要。我们将介绍基于酶活性或底物结合的检测方法,让你学会如何评估重组蛋白的功能。 蛋白质相互作用研究: 细胞内的生命活动往往需要蛋白质之间协同作用。本书将介绍 Yeast Two-Hybrid(酵母双杂交)技术,让你理解如何利用这种经典方法,筛选与其他蛋白发生特异性相互作用的蛋白。我们还将简要介绍Co-Immunoprecipitation(免疫共沉淀)等技术,展示研究蛋白质复合物形成的方法。 四、 基因调控的艺术:转录与翻译的精细调控 生命的有序运行离不开基因表达的精准调控。本部分将带你探索转录和翻译过程中的关键调控机制。 RNA提取与分析: 除了DNA,RNA也是基因表达信息的重要载体。我们将重点介绍不同类型RNA(mRNA, rRNA, tRNA, microRNA)的提取方法,并介绍Northern Blotting等技术,用于检测特定RNA的表达水平和大小。 启动子与增强子功能分析: 基因的转录起始受启动子和增强子的调控。我们将介绍Reporter Gene Assays(报告基因检测),如荧光素酶报告基因系统,如何通过报告基因的活性来评估启动子和增强子的活性,以及转录因子对其的影响。 转录因子结合分析: EMSA(电泳迁移率变异分析)是研究转录因子与DNA结合亲和力的经典技术。你将学会如何设计EMSA实验,观察转录因子结合DNA后产生的迁移率变化,从而推断其结合能力。 五、 实验设计与数据分析:严谨科学的思维 掌握实验操作技能固然重要,但科学研究的灵魂在于严谨的设计和准确的数据分析。本书的每一章节都将强调实验设计的原则,包括对照组的设置、重复性的重要性以及结果的可重复性。在数据分析方面,我们将引导你掌握基础的统计学方法,如何解读实验结果,并从数据中提取有意义的结论。 《生命之钥》 是一本为你量身打造的实践工具书,它不仅教会你“如何做”,更在于培养你“为什么这么做”的科学思维。我们相信,通过这本书,你将不仅掌握一系列强大的分子生物学实验技术,更能激发你对生命科学的无限热情,为你在未来的科研道路上打下坚实的基础。准备好,开启你的生命探索之旅吧!

作者简介

目录信息

读后感

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用户评价

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作为一名已经工作多年的科研人员,我深知实验技能的重要性,也明白一本好的实验指南能为科研工作节省多少时间和精力。我在工作中经常会接触到各种分子生物学实验,虽然大部分技术都比较熟悉,但有时候总会遇到一些棘手的问题,或者需要优化一些实验条件。翻阅这本《精编分子生物学实验指南》之后,我感到非常惊喜。它的内容非常全面,几乎涵盖了我工作中可能遇到的所有主流分子生物学实验技术,而且细节处理得非常到位。书中的一些操作技巧和注意事项,是我在日常工作中很少注意到的,但它们却至关重要,能够有效地提高实验的成功率和数据的可靠性。我特别欣赏书中对于一些实验的比较分析,比如不同类型的PCR反应,不同表达系统的优缺点等等,这为我选择合适的实验方法提供了重要的参考。而且,这本书的条理非常清晰,结构安排也很合理,我能够快速地找到我想要的信息。这对我来说,绝对是一本值得放在手边的案头必备书籍。

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我一直对分子生物学这个领域充满敬畏,感觉它就像一个复杂的迷宫,里面充满了各种精巧的设计和不可思议的机制。虽然我不是生物学专业出身,但我一直渴望能够更深入地了解这个领域。我曾尝试阅读一些科普读物,但很多时候都停留在表面,让我无法真正领略其中的奥妙。直到我偶然发现了这本《精编分子生物学实验指南》,我才发现,原来分子生物学也可以如此亲切和易于理解。这本书给我最大的感受就是它的“引导性”。它不是简单地罗列知识点,而是像一个循循善诱的老师,带领我一步步地探索。书中对每一个实验的设置,都仿佛是在设计一个精巧的谜题,而我们通过一步步的实验操作,去解开这个谜题,最终揭示生命运行的规律。让我印象深刻的是,书中对于一些实验中的“坑”都提前做了预警,并给出了相应的规避方法,这对于我这样的新手来说,简直是太贴心了。读这本书,我感觉自己不再是旁观者,而是真正地走进了分子生物学这个充满魅力的世界。

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我一直对生命科学的奥秘充满好奇,尤其是分子生物学这个神奇的领域。我曾尝试阅读一些科普书籍,但总觉得它们要么过于浅显,无法触及核心;要么过于晦涩,让我望而却步。直到我偶然发现了这本《精编分子生物学实验指南》,我才真正找到了那种探索未知世界的兴奋感。这本书的内容非常丰富,涵盖了从基因克隆、蛋白质表达、到细胞培养、基因编辑等一系列经典和前沿的分子生物学实验技术。我尤其喜欢书中对每一个实验步骤的细致讲解,以及对实验原理的深入剖析。它不像很多教材那样枯燥乏味,而是用一种非常生动、易于理解的方式,将复杂的概念娓娓道来。书中配有大量的图示和流程图,这对于像我这样的初学者来说,简直是福音。我可以通过这些图文并茂的讲解,快速掌握实验操作要领,避免走弯路。更重要的是,这本书不仅仅是教我如何做实验,更重要的是它教会了我如何思考,如何设计实验,如何分析结果。这让我感觉自己不再是被动地学习知识,而是真正地参与到科学探索的过程中。我迫不及待地想在实验室里实践书中的内容,去亲眼见证那些神奇的分子世界。

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说实话,我在这本书里获得的体验,远超我最初的预期。我是一名大二的生物学专业的学生,实验课上老师讲的很多东西,我总是感觉云里雾里。尤其是那些听起来就很高大上的名词,比如“PCR”、“Western Blot”、“siRNA干扰”等等,虽然课本上有介绍,但总感觉隔着一层。这本书就完全不一样了。它就像一个经验丰富的导师,循序渐进地引导我一步步走进分子生物学的世界。它没有一开始就抛给我一堆复杂的理论,而是从最基础的概念讲起,然后逐步深入。让我印象深刻的是,书中对每一个实验的“为什么”都解释得很清楚,而不是简单地告诉你“怎么做”。比如,为什么PCR需要dNTP?为什么Western Blot需要封闭液?这些问题,在读这本书之前我可能根本不会想到,但它却一一解答了我的疑惑,让我对实验背后的科学原理有了更深的理解。而且,它的语言风格也很平实,没有那些华而不实的学术术语,读起来非常顺畅。我感觉自己像是跟一个朋友在聊天,而这个朋友恰好对分子生物学了如指掌,并且愿意毫无保留地分享他的知识。

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我一直认为,实验是检验真理的唯一标准,而分子生物学更是离不开精密的实验操作。这本书,恰恰完美地契合了我对实验教学的需求。它不仅仅是一本“如何做”的指南,更是一本“为何如此”的解释书。我之前参加过一些分子生物学实验的培训,发现很多培训只是机械地传授操作步骤,对于原理的讲解往往一带而过,这让我总觉得学得不够扎实。而这本《精编分子生物学实验指南》则恰恰相反,它在介绍每一个实验技术时,都会深入浅出地讲解其背后的分子机制和科学原理。例如,在讲解基因枪转染时,它不仅会告诉你如何操作,还会解释为什么选择这种方法,它的优势和局限性在哪里。这种深入的讲解,让我对每一个实验操作都有了更深刻的认识,也更容易在遇到问题时找到解决方案。此外,书中对实验数据的分析和解读也有详细的指导,这对于新手来说尤为重要,能够帮助我们避免误读实验结果。总而言之,这本书是一本非常实用且具有深度指导意义的教材。

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