精编蛋白质科学实验指南

精编蛋白质科学实验指南 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:科学出版社发行部
作者:E.科林根
出品人:
页数:751
译者:李慎涛
出版时间:2007-1
价格:120.00元
装帧:
isbn号码:9787030180865
丛书系列:
图书标签:
  • 工具书
  • 蛋白質組學
  • 實驗技能
  • LifeScience
  • 蛋白质科学
  • 生物化学
  • 实验指南
  • 分子生物学
  • 蛋白质表达
  • 蛋白质纯化
  • 蛋白质结构
  • 生物技术
  • 实验室操作
  • 科研方法
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具体描述

本书取材于原始的核心手册,包括蛋白质科学研究方面的500多个实验方案,并对其基本方法有详细叙述。本书可作为蛋白质科学研究领域的研究人员和生命科学专业的教师、研究生参考使用。

《精编蛋白质科学实验指南》是一本为蛋白质科学领域研究者量身打造的实用参考书,其核心目标在于提供全面、系统且易于操作的实验技术指导。本书内容严谨,覆盖了蛋白质研究的各个关键环节,从蛋白质的提取、纯化到其结构、功能和相互作用的深入分析,旨在帮助研究人员高效、准确地开展实验,并解决实验过程中可能遇到的实际问题。 本书首先详细阐述了蛋白质提取与初步分离的技术。涵盖了从不同细胞类型(如细菌、酵母、哺乳动物细胞、植物组织等)中高效提取总蛋白的方法,包括细胞裂解的多种途径,如机械破碎、化学裂解、酶解等,并对不同裂解方法的适用范围、优缺点及注意事项进行了深入分析。在初步分离方面,本书详细介绍了基于蛋白质大小、电荷、疏水性等物理化学性质进行分离的常用技术,如差速离心、超速离心、透析、沉淀(如硫酸铵分级沉淀、异电点沉淀)等,并提供了优化这些技术的建议。 接下来,本书重点介绍了蛋白质纯化的核心技术。对于各种层析技术的原理、仪器配置、填料选择、缓冲液体系的优化以及操作流程进行了详尽的描述。这包括亲和层析(如GST标签、His标签、MBP标签等)、离子交换层析、凝胶过滤层析(尺寸排阻层析)、疏水作用层析等。本书特别强调了如何根据目标蛋白质的特性,设计并优化多步层析策略,以获得高纯度的蛋白质。同时,对于低表达量或难纯化蛋白的处理策略,本书也提供了独到的见解和实用的技巧。 在蛋白质鉴定与表征方面,本书提供了多种关键技术的详细指导。其中包括SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)的分离原理、凝胶制备、电泳条件优化以及结果分析,并介绍了考马斯亮蓝、银染等多种染色方法的原理和应用。二维电泳(2-DE)作为区分同工酶和修饰蛋白的重要手段,本书对其样品制备、等电聚焦、SDS-PAGE分离及图像分析进行了深入的讲解。蛋白质印迹(Western Blot)技术作为检测特定蛋白质的方法,本书详细阐述了从样品制备、电泳、转膜、封闭、抗体孵育到显影的全过程,并提供了优化信噪比、避免假阳性/假阴性的实用技巧。 本书还深入探讨了蛋白质结构分析的方法。对于质谱(Mass Spectrometry, MS)在蛋白质鉴定、翻译后修饰分析、定量蛋白质组学等方面的应用,本书进行了详细的阐述,包括肽段质量分析、de novo测序、数据库搜索等。X射线晶体学和核磁共振(NMR)波谱作为解析蛋白质三维结构的经典方法,本书介绍了它们的实验原理、样品要求、数据收集与解析的基本流程,并讨论了不同方法的适用范围和局限性。冷冻电镜(Cryo-EM)作为近年来飞速发展的结构生物学技术,本书也对其原理、样品制备、数据采集与处理进行了介绍。 蛋白质功能研究是本书的重要组成部分。本书详细介绍了各种酶活性测定方法,包括比色法、荧光法、放射性同位素法等,并提供了针对不同酶类进行活性测定的实验方案和注意事项。蛋白质相互作用分析是理解生命活动机制的关键,本书系统介绍了多种常用的相互作用分析技术,如酵母双杂交(Y2H)、共免疫沉淀(Co-IP)、表面等离子共振(SPR)、等温滴定微量热法(ITC)、生物层叠(BLI)等,并对各种技术的原理、实验设计、数据解读进行了详尽的说明。 此外,本书还涵盖了蛋白质翻译后修饰(PTMs)的研究技术,如磷酸化、糖基化、乙酰化、泛素化等,并介绍了相关的鉴定和功能研究方法。在蛋白质稳定性与折叠方面,本书介绍了差示扫描量热法(DSC)、圆二色谱(CD)等技术在评估蛋白质热稳定性、研究构象变化方面的应用。 本书的另一大亮点是提供了大量的实验方案范例和优化建议,这些内容均来源于作者和合作者的丰富实验经验,具有极高的实用价值。书中不仅有标准的操作流程,还特别强调了实验设计中的关键考量因素、潜在的实验陷阱以及如何排除干扰、提高实验的重复性和准确性。例如,在设计纯化方案时,本书会引导读者考虑目标蛋白的分子量、等电点、溶解度、稳定性以及是否存在与其他蛋白的特异性结合位点,从而选择最合适的层析介质和缓冲液体系。在进行Western Blot时,本书会详细解释不同封闭剂的选择、抗体稀释度的优化以及显影时间的控制如何影响检测结果。 本书的语言清晰、逻辑严谨,行文风格注重实用性和可操作性,避免了冗余和过于理论化的描述。图表丰富,直观地展示了实验流程和结果分析。每章末尾都附有参考文献,方便读者进一步深入学习。 总而言之,《精编蛋白质科学实验指南》是一本集理论指导、技术操作、方案设计和经验总结于一体的综合性实验手册。无论您是初入蛋白质科学领域的学生,还是经验丰富的资深研究员,本书都能为您提供宝贵的帮助,助您在蛋白质科学的研究道路上取得更大的突破。

作者简介

目录信息

译者的话前言参编者推荐的背景读物第1章 蛋白质纯化和定性的策略第2章 计算分析第3章 检测和分析方法第4章 提取、稳定和浓缩第5章 重组蛋白的生产第6章 重组蛋白的纯化第7章 重组蛋白的定性第8章 常规层析分离第9章 亲和层析第10章 电泳第11章 化学分析第12章 翻译后修饰:糖基化第13章 翻译后修饰:磷酸化和磷酸酶第14章 翻译后修饰:特定的应用第15章 蛋白质的化学修饰第16章 质谱第17章 肽的制备和处理第18章 蛋白质互相作用的鉴定第19章 蛋白质相互作用的定量第20章 肽酶第21章 基于凝胶的蛋白质组分析附录1 试剂和溶液附录2 常用的度量制和数据附录3 常用技术附录4 试剂和设备供货商参考文献索引
· · · · · · (收起)

读后感

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用户评价

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拿到这本书的时候,我被它严谨的排版和清晰的目录吸引住了。我是一名正在进行生物学研究的研究生,平时接触到的文献和实验操作不少,但总觉得在蛋白质学这一块,我的理论基础不够扎实,实验技能也还有提升的空间。我尤其关注的是蛋白质的分离纯化技术,因为这直接关系到后续的各种研究,如何高效、高纯度地获得目标蛋白一直是我在实验中面临的挑战。这本书的出现,让我看到了希望,我期待它能提供一些实用的、经过验证的实验方法和技巧,帮助我解决实际操作中遇到的难题。另外,我也对蛋白质的活性检测和定量分析的方法很感兴趣,希望能学习到一些先进的技术,让我的研究数据更加准确可靠。我对书中可能包含的各种实验原理的深入剖析和步骤的详细讲解充满期待。

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我是一位对生命科学充满好奇的自学者,平时喜欢阅读一些科普读物来拓展自己的知识面。最近我对蛋白质的生物合成和修饰过程非常着迷,觉得它们是细胞内精密的“制造工厂”。我希望通过这本书,能够以更直观、易懂的方式了解蛋白质是如何从基因信息转化为具有特定功能的分子。特别是,我对蛋白质翻译后修饰,例如磷酸化、糖基化等,在调节蛋白质功能和细胞信号传导中的作用非常感兴趣。这本书的标题“精编”二字,让我觉得它在内容的选择和呈现上会非常精炼和实用,不会过于晦涩难懂,非常适合我这样的初学者。我希望它能提供一些生动的例子和插图,帮助我更好地理解这些复杂的生物学过程,并能启发我对生命本质的更深层次思考。

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这本书的封面设计简约大气,给我留下了很好的第一印象。我一直对生物化学领域非常感兴趣,尤其是在蛋白质的研究方面,总觉得这是一个充满奥秘且至关重要的领域。我希望通过这本书能够更深入地理解蛋白质的结构、功能以及它们在生命活动中扮演的角色。特别是,我一直对蛋白质的折叠机制和可能出现的错误折叠导致疾病的机制感到好奇,希望能在这本书中找到相关的解释和深入的探讨。同时,我对蛋白质的相互作用,比如它们如何协同工作形成复杂的生物通路,也充满了求知欲。这本书似乎为我打开了一扇通往蛋白质世界的大门,我期待着能够在这段探索之旅中,不仅收获知识,更能激发我对科学研究的更多热情。这本书的厚度和内容量也让我感觉物有所值,相信它能为我提供扎实的理论基础和前沿的视角。

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这本书的名字让我眼前一亮,因为我一直对生物材料和生物医学工程领域的研究抱有浓厚的兴趣。我关注的是蛋白质在组织工程、生物传感器以及药物递送系统等方面的应用。我希望这本书能够深入探讨如何利用蛋白质的生物相容性和特异性来设计创新的生物材料,以及如何将蛋白质作为关键组分构建高效的生物传感器。我对蛋白质的表面修饰和固定化技术,以及如何调控其在体内的行为和响应,也充满了疑问。这本书的“实验指南”性质,让我觉得它可能会包含一些实际操作的案例,这些案例对于我将理论知识转化为实际应用非常有帮助。我期待通过阅读这本书,能够拓宽我的研究思路,并在生物医学工程领域找到新的突破点。

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作为一名在制药行业工作的研发人员,我深知蛋白质在药物研发中的核心地位。我一直关注着蛋白质药物的设计、开发以及质量控制等环节。我特别希望这本书能够涵盖一些关于重组蛋白表达、纯化以及活性评估的最新技术和方法。例如,如何设计表达载体以获得高产量、高活性的蛋白质,以及如何利用各种色谱技术、电泳技术进行高效的分离和鉴定。此外,蛋白质的稳定性研究和制剂开发也是我非常关心的问题,希望能在这本书中找到相关的指导和案例分析。我期待这本书能够为我的日常工作提供宝贵的参考,帮助我更有效地解决研发过程中遇到的技术瓶颈,并推动新药研发的进程。

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