血液学检验实验指导

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页数:151
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出版时间:2009-8
价格:22.00元
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isbn号码:9787506742207
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具体描述

《血液学检验实验指导》为全国医药职业教育检验类规划教材之一,为血液学检验实验指导。全书共十四章五十八个实验,包括正常血细胞形态学观察、血细胞化学染色、贫血骨髓象检查、红细胞膜与红细胞酶缺陷检验、珠蛋白异常检验、免疫性溶血性疾病检验、传染性单核细胞增多症检验、白血病骨髓象检验等。内容全面,操作性强,与临床结合密切,适用于医药高职高专教育师生选用。

临床免疫学检验实验指南 引言 免疫系统是人体抵御外来病原体、维持自身稳态的关键防线。免疫学检验作为临床诊断学的重要分支,通过检测免疫系统的组成、功能以及相关抗原、抗体等物质,为疾病的诊断、疗效评估和预后判断提供重要的依据。本实验指导旨在系统地介绍临床免疫学检验的基本原理、常用技术方法、实验操作步骤及结果判读,帮助学习者掌握免疫学检验的核心技能,并能将其应用于实际的临床工作中。 第一章 绪论 1.1 免疫学检验在临床诊断中的地位与意义 阐述免疫系统在疾病发生发展中的作用。 重点介绍免疫学检验在感染性疾病(如病毒、细菌、寄生虫感染)、自身免疫性疾病、肿瘤、过敏性疾病、器官移植等领域的诊断价值。 强调免疫学检验在监测疾病进展、评估治疗效果、预测复发等方面的作用。 1.2 免疫学检验的基本原理 抗原-抗体反应:详述抗原与抗体的特异性结合,这是免疫学检验的核心原理。介绍抗原、抗体结构及其识别机制。 免疫应答过程:简要回顾体液免疫和细胞免疫的基本过程,理解免疫细胞(B细胞、T细胞、巨噬细胞等)和免疫分子(细胞因子、补体等)的作用。 标记技术:介绍如何利用标记物(如酶、荧光素、放射性核素、胶体金等)来放大和检测抗原-抗体反应,使其可视化和量化。 1.3 常用免疫学检验方法概述 体外免疫诊断试剂:介绍当前临床上常用的各类免疫诊断试剂盒的特点和应用。 仪器设备:简要介绍免疫学检验常用的仪器,如酶标仪、化学发光免疫分析仪、流式细胞仪等。 质量控制与标准化:强调免疫学检验结果的准确性和可靠性,介绍质量控制的基本原则和方法。 第二章 免疫学检验标本的采集与处理 2.1 标本种类 血液标本:血清、血浆的采集、分离与保存。 其他体液标本:尿液、脑脊液、关节液、胸腹水、唾液、分泌物等的采集与处理。 组织标本:活检组织、细胞涂片等。 2.2 标本采集的注意事项 严格遵循无菌操作原则。 避免溶血、脂血、污染等影响检验结果的因素。 详细记录患者信息、标本类型、采集时间等。 2.3 标本的保存与运输 根据不同的检测项目,选择合适的保存温度(室温、4℃、-20℃、-80℃)和保存时间。 掌握标本运输过程中的注意事项,确保标本的稳定性。 第三章 免疫学检验基本技术 3.1 沉淀反应 免疫扩散法: 单向免疫扩散:包括Mancini法和Ouchterlony法。原理、操作步骤、结果判读。 双向免疫扩散(Ouchterlony法):原理、操作步骤、结果判读,尤其适用于分析抗原抗体之间的交叉反应和鉴定。 琼脂凝胶免疫电泳:将免疫扩散与电泳结合,用于分离和鉴定多种抗原或抗体。 3.2 凝集反应 标准凝集反应(SAA): 红细胞凝集反应:介绍正向和反向血型鉴定、自身抗体检测的原理和操作。 乳胶颗粒凝集反应:介绍类风湿因子、C反应蛋白等检测的原理和操作。 被动血凝法(PHA):将抗原或抗体吸附在载体(如红细胞、乳胶颗粒)上,用于检测相应的抗体或抗原。 被动血球吸附试验(PAAT):在输血前用于检测与红细胞表面抗原相关的抗体。 3.3 补体结合试验(CFT) 原理:利用补体的消耗来指示抗原-抗体复合物的形成。 操作步骤:详细介绍抗原、抗体、补体、溶血素、指示细胞的配制和加入顺序。 结果判读:掌握阳性(补体被消耗,指示细胞不溶血)和阴性(补体未消耗,指示细胞溶血)的判断。 应用: syphilis(梅毒)、病毒感染等检测。 3.4 免疫荧光技术(IF) 原理:利用荧光标记的抗体与抗原结合,在荧光显微镜下观察荧光信号。 分类: 直接免疫荧光法(DFA):荧光标记抗体直接与标本中的抗原结合。 间接免疫荧光法(IFA):未标记抗体与标本抗原结合,再用荧光标记的抗抗体与之结合。 操作步骤:标本处理、抗体孵育、洗涤、封片、荧光显微镜观察。 结果判读:根据荧光信号的强度、分布和形态进行判断。 应用:自身抗体(如抗核抗体 ANA)、病原体检测。 3.5 酶联免疫吸附试验(ELISA) 原理:利用酶标记的抗体或抗原,通过显色反应来定量检测抗原或抗体。 类型: 间接ELISA:检测血清中抗体的含量。 直接ELISA:检测标本中的抗原。 双抗体夹心ELISA:检测标本中的抗原。 竞争ELISA:定量检测抗原或抗体。 操作步骤:包被、封闭、孵育、洗涤、显色、读取吸光度。 结果判读:根据吸光度值计算样品中抗原或抗体的浓度。 应用:各种传染病标志物(如乙肝、丙肝、HIV)、激素、肿瘤标志物等检测。 3.6 化学发光免疫分析(CLIA) 原理:利用化学发光物质在酶催化下发光,通过检测发光强度来定量抗原或抗体。 优点:灵敏度高、特异性强、操作简便、自动化程度高。 仪器与试剂:介绍化学发光免疫分析仪的工作原理及常用标记物(如吖啶酯、鲁米诺等)。 应用:与ELISA类似,应用范围更广,是当前临床免疫学检验的主流技术之一。 3.7 免疫印迹技术(Western Blot) 原理:将蛋白质样本经电泳分离后,转移到膜上,再用特异性抗体进行检测。 操作步骤:电泳、转膜、封闭、抗体孵育、洗涤、显影。 结果判读:根据条带的位置和强度判断目标蛋白是否存在。 应用:HIV确诊试验、自身抗体分析(如针对特定自身抗原的抗体检测)。 3.8 流式细胞术(Flow Cytometry) 原理:利用激光束照射悬浮在液体中的细胞,通过检测细胞散射光和荧光信号来分析细胞的各项指标。 基本原理:前向散射角(FSC)反映细胞大小,侧向散射角(SSC)反映细胞内部复杂性,荧光信号反映细胞表面或胞内标记物。 常用技术: 细胞表面标志物检测:如CD标志物的鉴定,用于淋巴细胞亚群分析、白血病/淋巴瘤的分型。 细胞内标志物检测:如细胞因子、增殖标志物检测。 细胞凋亡检测。 操作流程:细胞悬液制备、染色、上机检测、数据分析。 应用:免疫缺陷病、淋巴组织增生性疾病、免疫监视、细胞生物学研究。 第四章 临床常用免疫学检验项目 4.1 感染性疾病标志物检测 病毒感染: 乙型肝炎病毒(HBV):HBsAg, Anti-HBs, HBeAg, Anti-HBe, Anti-HBc IgM/IgG。 丙型肝炎病毒(HCV):Anti-HCV, HCV RNA。 人类免疫缺陷病毒(HIV):Anti-HIV, HIV p24抗原, HIV RNA。 其他:TORCH感染(Toxoplasma, Rubella, Cytomegalovirus, Herpes simplex virus)、EB病毒、流感病毒等。 细菌感染:幽门螺杆菌抗体、肺炎支原体抗体、梅毒螺旋体血凝试验(RPR/TPPA)。 寄生虫感染:弓形虫、疟原虫等相关抗体检测。 4.2 自身免疫性疾病标志物检测 抗核抗体(ANA):及其谱(如抗dsDNA, 抗Sm, 抗SSA/Ro, 抗SSB/La, 抗Scl-70, 抗Jo-1等),用于系统性红斑狼疮、干燥综合征、硬皮病等。 类风湿因子(RF):用于类风湿关节炎的辅助诊断。 抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP):类风湿关节炎的早期诊断标志物。 抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb):用于甲状腺自身免疫性疾病。 抗胰岛细胞抗体(ICA)、抗谷氨酸脱羧酶抗体(GADA):用于1型糖尿病。 4.3 肿瘤标志物检测 癌胚抗原(CEA):消化道肿瘤。 甲胎蛋白(AFP):肝细胞癌、生殖细胞肿瘤。 CA125:卵巢癌。 CA19-9:胰腺癌、胆囊癌、胃癌。 PSA:前列腺癌。 4.4 过敏性疾病检测 总IgE:过敏性疾病的筛查。 特异性IgE(皮肤点刺、体外检测):明确过敏原。 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)。 4.5 补体系统检测 C3, C4:常用于自身免疫性疾病的评估。 CH50:总补体活性,用于评估补体经典途径的完整性。 4.6 细胞免疫功能检测 淋巴细胞亚群分析(T细胞、B细胞、NK细胞及其亚群):通过流式细胞术进行,评估免疫缺陷、免疫重建等。 第五章 实验操作与结果判读 5.1 各类免疫学检验的具体实验操作规程 针对第三章中介绍的各类技术,提供详细的、图文并茂的实验步骤。 包括试剂准备、仪器设置、样品处理、孵育时间与温度、洗涤次数、判读标准等。 5.2 实验结果的记录与报告 规范的实验记录格式。 标准的检验报告单撰写要求,包括检验项目、方法、结果、参考范围、临床意义等。 5.3 结果判读的注意事项与常见问题分析 如何正确理解参考范围。 假阳性、假阴性结果的可能原因分析。 不同检测方法结果的比较与解读。 结合临床信息进行综合分析。 第六章 免疫学检验的质量控制与安全 6.1 室内质量控制(IQC) 质控品的选择与使用。 控制图的应用(如均值-全距图、累积均值图)。 偏差分析与处理。 6.2 室间质量评价(EQA) 参加国家或地区的室间质评活动。 根据反馈信息改进检测流程。 6.3 实验室生物安全 生物安全等级的划分与防护措施。 个人防护用品(PPE)的正确使用。 标本、试剂、废弃物的安全处理。 应急预案的制定与演练。 附录 常用免疫学检验试剂盒说明书解读。 临床常用免疫学检验参考值列表。 实验报告模板。 结语 本实验指导力求全面、系统地介绍临床免疫学检验的知识和技能。通过理论学习与实践操作相结合,希望学习者能够扎实掌握免疫学检验的核心技术,理解各类检验项目的临床意义,并能准确、可靠地完成检验工作,为临床诊断和治疗提供有力的支持。在未来的临床实践中,免疫学检验技术将不断发展,新的标志物和检测方法将层出不穷,鼓励学习者保持终身学习的态度,不断更新知识,提升技能,为人类健康贡献力量。

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