Modern HPLC for Practicing Scientists

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出版者:Wiley-Interscience
作者:Michael W. Dong
出品人:
页数:304
译者:
出版时间:2006-6-12
价格:USD 91.95
装帧:Paperback
isbn号码:9780471727897
丛书系列:
图书标签:
  • 化学
  • HPLC
  • Chromatography
  • Analytical Chemistry
  • Modern Techniques
  • Practical Guide
  • Science
  • Research
  • Instrumentation
  • Separation Science
  • Laboratory Techniques
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具体描述

A comprehesive yet concise guide to Modern HPLC Written for practitioners by a practitioner, Modern HPLC for Practicing Scientists is a concise text which presents the most important High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) fundamentals, applications, and developments. It describes basic theory and terminology for the novice, and reviews relevant concepts, best practices, and modern trends for the experienced practitioner. Moreover, the book serves well as an updated reference guide for busy laboratory analysts and researchers. Topics covered include: HPLC operation Method development Maintenance and troubleshooting Modern trends in HPLC such as quick-turnaround and "greener" methods Regulatory aspects While broad in scope, this book focuses particularly on reversed-phase HPLC, the most common separation mode, and on applications for the pharmaceutical industry, the largest user segment. Accessible to both novice and intermedate HPLC users, information is delivered in a straightforward manner illustrated with an abundance of diagrams, chromatograms, tables, and case studies, and supported with selected key references and Web resources. With intuitive explanations and clear figures, Modern HPLC for Practicing Scientists is an essential resource for practitioners of all levels who need to understand and utilize this versatile analytical technology.

《先进色谱技术:原理、应用与实践》 图书简介 随着分析科学的飞速发展,色谱技术作为分离、鉴定和定量分析的基石,其重要性日益凸显。本书《先进色谱技术:原理、应用与实践》旨在为化学、生物化学、制药、环境科学以及材料科学等领域的专业人士和高阶学生提供一本全面、深入且极具实践指导意义的参考书。本书摒弃了过于基础的理论回顾,而是将焦点集中在当前色谱技术的前沿进展、复杂系统的分离策略以及解决实际样品挑战的实用方法上。 核心内容与结构 本书结构严谨,内容覆盖了从基础理论深化到尖端分离模式的广泛领域,共分为六个主要部分,涵盖了近二十个章节。 第一部分:色谱分离的理论深化与模型构建 本部分深入探讨了支撑现代色谱分析的理论基础,但侧重于那些对实际操作和方法优化具有直接影响的深化概念。 色谱分离的动力学与传质模型: 详细分析了固相萃取(SPE)和高效液相色谱(HPLC)中多重传质机制的速率理论。重点讨论了超长时间尺度上的色谱峰展宽(Peak Broadening)现象,包括了液相传质、固相传质、以及 Eddy扩散的非理想因素。我们引入了现代色谱柱设计如何通过优化孔隙结构和表面修饰来最小化这些效应的先进模型,如广义范德姆特方程(Generalized van Deemter Equation)在梯度洗脱中的应用。 选择性的热力学基础与多维色谱的维度控制: 阐述了溶质-固定相相互作用的精细热力学(如溶解度和吸附能的精确计算),并将其转化为可预测的选择性参数。此外,本章详细介绍了多维色谱(2D-LC)中选择性维度设计的重要性,包括正交性(Orthogonality)的量化指标和如何通过系统性地改变流动相极性、固定相化学性质或温度来实现高维分离。 第二部分:高效液相色谱(HPLC)的系统优化与硬件前沿 本部分聚焦于现代HPLC系统所面临的工程挑战和解决方案,特别是针对高通量和高分辨率需求的优化策略。 超高效液相色谱(UHPLC)与高压系统设计: 探讨了UHPLC技术的核心——亚2微米粒径填料的制备与挑战。详细分析了微粒尺寸对背压(Backpressure)的几何级影响,以及如何通过流体力学优化(如扁平化填充技术、低扩散连接器)来维持低扩散系数。本章还包括对高压泵技术(如往复式、衢道式)在瞬态梯度下的流量稳定性和脉动抑制的深度评估。 柱温控制(Column Temperature Control)的精细化: 将柱温视为分离的第三个维度。详细论述了等温、梯度升温以及程序升温色谱(PST)的理论模型。重点介绍了如何利用精确的温度编程来解决复杂混合物中高保留因子组分的有效分离和快速分析,并讨论了PST在应对高分子量或粘性样品时的独特优势。 第三部分:新型分离模式与极端环境色谱 本部分介绍了超越传统反相和正相HPLC的专业分离技术,以应对复杂基质的挑战。 亲水作用色谱(HILIC)的高级应用: 深入讲解了HILIC的机理,强调其与反相色谱的互补性。本章详细对比了基于纯溶剂和基于缓冲液的HILIC系统,并提供了针对极性药物代谢物、寡核苷酸和糖类分析的详细方法开发指南。特别关注了水含量在HILIC分离中的非线性影响。 尺寸排阻色谱(SEC)与分离聚合物的分子量表征: 重点关注了高分子材料分析中SEC的应用,包括对校正曲线依赖性的批判性分析(如使用窄分散标准品)。本章深入探讨了实时多角度激光散射(RT-MALS) 和粘度检测器(Viscometry) 联用在无校正条件下直接测定聚合物分子量、尺寸和构象的先进技术。 模拟移动床色谱(SMB)在工业纯化中的设计与操作: 侧重于连续色谱分离的工程实现。详细介绍了二组分、三组分系统的再生率、生产率和纯度之间的权衡分析。包含了对床层压实、流体动力学分布以及在线过程控制(MPC)策略在优化SMB运行中的关键作用的探讨。 第四部分:色谱与质谱联用的深入集成(LC-MS) 本部分侧重于提升LC-MS的性能,尤其是在痕量分析和高分辨数据采集方面。 电喷雾电离(ESI)的优化与离子传输控制: 不仅讨论了ESI的基本原理,更深入探讨了影响离子生成效率的参数,如雾化电压、辅助气体流速和加热温度对特定化合物离子强度的影响。重点分析了离子抑制/增强效应的定量评估方法,以及如何通过在线混合或选择性进样来缓解基质效应。 高分辨质谱(HRMS)的数据处理与鉴定: 阐述了准确质量(Accurate Mass)在化合物鉴定中的核心作用。本章提供了使用HRMS(如Orbitrap和TOF)数据进行骨架重建(Backbone Elucidation) 和代谢物或杂质的“从头”鉴定(De Novo Identification) 的系统化流程,包括对同位素模式匹配和碎片谱解析的详细软件工具介绍。 第五部分:方法的开发、验证与质量保证 本部分为实践工程师提供了如何建立稳健且符合监管要求的分析方法的蓝图。 设计空间与稳健性测试(Robustness Testing): 详细介绍了基于质量中心设计(DoE) 的方法开发理念。阐述了如何通过系统地改变关键方法参数(如pH、梯度时间、柱温)来建立清晰的设计空间(Design Space),并利用鲁棒性测试来确保方法在日常操作中的性能稳定性和可转移性。 色谱方法的转移与验证(Method Transfer and Validation): 提供了针对不同分析场景(如实验室A到实验室B,或HPLC到UHPLC)的系统性转移协议。详细介绍了ICH指导原则框架下的分离度(Resolution)、拖尾因子(Tailing Factor)和柱效的性能指标设定与验证步骤。 第六部分:特定应用领域的复杂基质分析 本部分通过案例研究展示了上述技术的集成应用。 生物药品的表征与异质性分析: 重点关注单克隆抗体(mAb)的质量属性分析,包括ADC(抗体偶联药物)的偶联率测定、糖基化谱分析(Glycoform Profiling),以及使用离子交换色谱(IEX) 和疏水作用色谱(HIC) 对电荷变体和疏水变体进行分离的策略。 痕量环境污染物(如PFAS)的提取与分析: 讨论了从复杂环境样品(水、土壤、生物组织)中提取全氟和多氟烷基物质(PFAS)的最新技术,特别是针对其低浓度和高极性的挑战。介绍了在LC-MS/MS或HRMS平台上实现高灵敏度定性和定量的具体方法。 本书的语言力求精确、专业,但避免过度使用复杂的数学推导,而是强调概念理解与实际操作的联系。通过大量的图表、流程图和实际数据实例,本书致力于成为从业人员在解决复杂分析难题时的重要技术手册。

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